微生物分析儀法和紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的應用價值探討

侯新月 孟存仁

微生物分析儀法和紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的應用價值探討

侯新月 孟存仁

目的分析比較紙片擴散（K-B）法與微生物分析儀（Vitek）法在細菌耐藥表型檢測中的應用效果。方法選取肺炎克雷伯桿菌、大腸埃希菌及金黃色葡萄球菌各80株，分別應用K-B法與Vitek法進行細菌耐藥表型檢測。比較兩種方法的檢測結果。結果兩種方法的超廣譜β-內酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）檢出陽性率無統計學差異（P＞0.05），K-B法的紅霉素耐藥克林霉素誘導實驗檢測陽性率低于Vitek法檢測陽性率（P＜0.05）。結論微生物分析儀法能夠較快速地判斷細菌的耐藥表型，具有較高準確率和靈敏度。

紙片擴散法；微生物分析儀法；檢測效果

作者單位：830011 烏魯木齊，新疆維吾爾自治區第二濟困醫院檢驗科（侯新月）；8300542 烏魯木齊，新疆醫科大學第一附屬醫院醫學檢驗中心（孟存仁）

細菌感染是影響人們身體健康的重要因素，隨著各種抗生素藥物的應用，細菌的耐藥性問題也更加凸顯，快速、準確地提供抗生素藥敏結果，是保障臨床合理應用抗生素藥物的重要前提[1]。紙片擴散（K-B）法與微生物分析儀（Vitek）法是臨床常用的細菌藥物敏感性檢測方法[2]，為了解這兩種檢測方法在細菌耐藥表型檢測中的應用效果，本文對其進行了如下探討，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 于2015年3月-2017年3月我院細菌室分離保存的大腸桿菌、肺炎克雷伯桿菌以及金黃色葡萄球菌中各選取80株，并以將金黃色葡萄球菌ATCC29213與大腸桿菌ATCC25922作為質控菌。Vitek法：應用法國梅里埃公司所生產的VITEK 2 Compact微生物分析儀及配套檢測板。常規K-B法：血培養基、M-H培養基、麥康凱培養基、藥敏紙片。

1.2 方法 本研究所選菌株均分別應用K-B法和Vitek法對其細菌耐藥表型進行檢測。常規K-B法檢測：（1）超廣譜β-內酰胺酶（extended-spectrum β-lactamase,ESBLs）驗證試驗；（2）耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（meticillin-resistantStaphylococcus aureus,MRSA）檢測；（3）紅霉素耐藥克林霉素誘導實驗的具體方法均參照《全國臨床檢驗操作規程》（第三版）[3]，其陽性判定標準參照相關文獻[4-6]。

Vitek法：選取大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌，分別配置0.5 MCF的懸濁液，然后應用梅里埃Vitek-GN13檢測板對大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌進行檢測。金黃色葡萄球菌檢測，配置同等濃度的金黃色葡萄球菌懸濁液后，應用梅里埃Vitek-GP67檢測板進行藥敏檢測[7]。

1.3 觀察指標 對兩種檢測方法的藥敏實驗結果進行記錄，并比較這兩種方法的ESBLs、MRSA以及克林霉素誘導陽性率。

1.4 統計學方法 數據應用SPSS 18.0進行分析，計數資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同檢測方法的ESBLs陽性率對比 Vitek法檢測陽性率略高于K-B法，但組間差異無統計學意義（P＞0.05），見表1。

2.2 不同檢測方法的MRSA陽性率比較 K-B法對金黃色葡萄球菌進行耐MRSA檢測，陽性51株，檢出率為63.75%；Vitek法檢測陽性53株，檢出率為67.50%。兩組比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.3 不同檢測方法的克林霉素誘導陽性率比較 在克林霉素誘導實驗中，K-B法的紅霉素耐藥克林霉素誘導實驗檢測陽性37株，檢出率為46.25%。Vitek法檢測陽性45株，檢出率為56.25%。組間差異有統計學意義（P＜0.05）。

表1 不同檢測方法的ESBLs陽性率對比

3 討論

隨著現代醫療水平的不斷進步，抗生素藥物在臨床治療中的應用也更加廣泛，抗生素藥物的應用極大地提高了臨床治療效果，但同時也會增強細菌耐藥性，導致耐藥菌產生，使得抗生素藥物的應用也面臨困境[8]。因此，細菌耐藥表型檢測具有非常重要的臨床意義。

K-B法是臨床進行細菌藥物敏感性檢測的常用方法，操作簡單，費用低，使用靈活，但是該檢測方法耗時長，影響因素多，難以達到檢測標準[9]。隨著微生物檢測技術的不斷進步，Vitek法在細菌藥物敏感性測定中的應用受到較多關注，Vitek法能夠對細菌的MSRA、誘導克林霉素耐藥以及ESBLs等多種耐藥表型進行檢測和推斷，與常規K-B法相比，Vitek法能夠在較短的時間內獲得藥敏鑒定結果，檢測速度快，且具有較高準確率和特異度，能夠及時為臨床提供藥敏檢測結果，具有較高應用價值[10]。

本研究中，通過對肺炎克雷伯桿菌、大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌分別應用K-B法與Vitek法進行ESBLs、MSRA等檢測發現，兩種方法的檢測結果略有差異，可能與K-B法影響因素較多有關，從而對檢測結果造成影響。比較紅霉素耐藥克林霉素誘導實驗檢測結果發現，K-B法檢測陽性率為46.25%，Vitek法陽性率為56.25%，顯著高于K-B法，說明Vitek法有助于提高克林霉素誘導實驗陽性檢出率，且該方法檢測時間短，可加強應用。

總而言之，與傳統K-B法相比，細菌耐藥表型檢測應用Vitek法更具有優勢，能夠為臨床提供更為準確、可靠的藥敏檢驗結果。

1 張麗紅.重癥監護病房細菌感染及耐藥性現狀調查.中國消毒學雜志,2013,30(10): 944-946.

2 李莉.微生物分析儀法與常規紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的比較.氨基酸和生物資源,2014,36(2): 67-69.

3 中華人民共和國衛生部醫政司．全國臨床檢驗操作規程．第3版．南京: 東南大學出版社,2006: 759-762．

4 張健.兩種檢測產ESBLs肺炎克雷伯菌方法的比較.泰山醫學院學報,2015,36(1): 30-32.

5 張麗麗.主動監測培養對于控制院內MRSA感染的效果.中國微生態學雜志,2014,26(6): 690-692.

6 王鳳玲.金黃色葡萄球菌紅霉素誘導克林霉素耐藥性分析.國際檢驗醫學雜志,2013,34(1): 100-101.

7 李玉棟.微生物分析儀法與常規紙片擴散法在細菌耐藥表型檢測中的比較.臨床醫藥文獻,2016,3(56): 15-17.

8 張文韜.災難性的威脅: 抗生素耐藥性.世界科學,2013(5):45-46.

9 花扣珍.藥敏試驗-紙片擴散法影響因素的探討.實用醫技雜志,2014(4): 400-4001.

10 婁立革.全自動微生物鑒定藥敏分析儀的臨床應用價值分析.中國醫療器械信息,2015(2Z): 90.

Application value of microbial analyzer and disk diffusion in detection of bacterial drug resistance phenotype

Xinyue HOU1,Cunren MENG2

1Department of Clinical Laboratory,Xinjiang Uygur Autonomous Region Second Hospital,Urumqi 830011,China;2Medical Examination Center of the First Affiliated Hospital of Xinjiang Medical University,Urumqi 830054,China

ObjectiveTo compare and analyze the effect of K-B and Vitek in the detection of bacterial drug resistance phenotype.MethodsA total of 80 strains ofKlebsiella pneumoniae,Escherichia coliandStaphylococcus aureuswere selected.Bacterial resistance phenotype was detected by K-B and Vitek respectively.ResultsThe positive rates of extended-spectrum β-lactamase (ESBLs) and meticillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)in the two methods were not statistically different (P＞0.05).The positive rate of erythromycin resistant clindamycin induced by K-B was lower than that of Vitek (P＜0.05).ConclusionThe microbial analyzer can be used to determine the drug resistance phenotype of bacteria rapidly,and has higher accuracy and sensitivity.

K-B; Microbiological analyzer; Detection effect