CaMK II介導(dǎo)20-HETE誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞凋亡及肥大作用研究

賀 滟，賈蟬憶，韓 勇，郭立榮，陳遠(yuǎn)壽

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，貴州 遵義 563099)

基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究

CaMK II介導(dǎo)20-HETE誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞凋亡及肥大作用研究

賀 滟1，賈蟬憶1，韓 勇1，郭立榮2，陳遠(yuǎn)壽1

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，貴州 遵義 563099)

目的探究CaMK II在20-HETE誘導(dǎo)的乳鼠心肌細(xì)胞凋亡和肥大中的作用。方法原代培養(yǎng)乳鼠心肌細(xì)胞，隨機(jī)分為正常對(duì)照組(Con組)，20-HETE組，20-HETE+KN-93組以及KN-93組；采用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活性、TUNEL法檢測(cè)凋亡、HE染色后檢測(cè)心肌細(xì)胞表面積、BAC法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)蛋白濃度；RT-qPCR檢測(cè)心肌肥大特征性基因心鈉肽(ANP)的表達(dá)；Western Blot檢測(cè)CaMK II及其磷酸化蛋白表達(dá)。結(jié)果與對(duì)照組相比，20-HETE組心肌細(xì)胞活性顯著下降，細(xì)胞凋亡率顯著升高(Plt;0.05)；同時(shí)，20-HETE明顯促進(jìn)心肌細(xì)胞表面積增加、蛋白濃度升高以及肥大基因ANP的表達(dá)上調(diào)(Plt;0.05)；使用CaMK II抑制劑KN-93共孵育后，阻斷了20-HETE誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和肥大的作用(Plt;0.05)；20-HETE促進(jìn)心肌細(xì)胞CaMK II蛋白以及磷酸化CaMK II蛋白表達(dá)(Plt;0.05)，具有激活CaMK II作用。結(jié)論20-HETE激活CaMK II信號(hào)通路誘導(dǎo)心肌細(xì)胞肥大和凋亡。

20-羥二十烷四烯酸；CaMK II；細(xì)胞肥大；細(xì)胞凋亡

20-羥二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid ,20-HETE)是近年來發(fā)現(xiàn)的由細(xì)胞色素P-450(Cytochrome P450,CYP450)催化花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)生成的代謝產(chǎn)物，它的生成與很多血管性疾病的發(fā)生發(fā)展相關(guān)，如高血壓、腦血管疾病、腎臟疾病、冠心病、妊娠毒血癥等[1]。近年研究發(fā)現(xiàn)20-HETE具有誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡作用[2]，但其中機(jī)制尚待進(jìn)一步闡明。此外，有大量證據(jù)表……