米諾環(huán)素對(duì)人類膠質(zhì)瘤U87和LN229細(xì)胞體外增殖及凋亡的影響

趙海龍，嚴(yán)婉約，李巧巧，李 科，劉 麗，李麗娟

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2014級(jí)卓越醫(yī)生班，貴州 遵義 563099)

米諾環(huán)素對(duì)人類膠質(zhì)瘤U87和LN229細(xì)胞體外增殖及凋亡的影響

趙海龍1，嚴(yán)婉約2，李巧巧2，李 科2，劉 麗2，李麗娟1

(1.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室，貴州 遵義 563099；2.遵義醫(yī)學(xué)院 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2014級(jí)卓越醫(yī)生班，貴州 遵義 563099)

目的探討米諾環(huán)素對(duì)人類膠質(zhì)瘤U87和LN229細(xì)胞體外增殖及凋亡的影響，為米諾環(huán)素治療臨床膠質(zhì)瘤提供基礎(chǔ)。方法采用MTT法和BrdU標(biāo)記法檢測(cè)不同濃度米諾環(huán)素(0、50、100、200 μmol/L)對(duì)人類膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U87和LN229細(xì)胞增殖水平的影響；軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)米諾環(huán)素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自我更新能力的影響；通過免疫熒光標(biāo)記自噬相關(guān)蛋白LC3B和Annexin V-FITC/PI雙染細(xì)胞凋亡法分別檢測(cè)米諾環(huán)素處理膠質(zhì)瘤細(xì)胞中自噬水平和凋亡水平；使用3-甲基腺嘌呤(3-MA)阻斷細(xì)胞自噬通路后，分別觀察米諾環(huán)素對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞自噬水平和凋亡水平的影響；qRT-PCR法和Western blot法檢測(cè)米諾環(huán)素作用下促凋亡蛋白Bax、抑凋亡蛋白Bcl-2的基因和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果米諾環(huán)素對(duì)人類膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖和自我更新能力有明顯抑制作用，并呈劑量依賴性；米諾環(huán)素可誘導(dǎo)人類膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)生廣泛的細(xì)胞自噬與凋亡，但凋亡水平呈現(xiàn)劑量依賴性，而不同濃度處理下的自噬水平無顯著性差異；使用3-MA阻斷自噬通路對(duì)細(xì)胞凋亡水平、細(xì)胞增殖水平和自我更新能力無顯著性影響；……