胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平與胃炎的相關性研究

黃 勤

（宜賓市第三人民醫院 四川 宜賓 644000）

胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平與胃炎的相關性研究

黃 勤

（宜賓市第三人民醫院 四川 宜賓 644000）

目的：探討胃黏膜組織中腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor，TNF-α）及誘導型一氧化氮合酶（isoform of nitric oxide synthase，iNOS）的水平與胃炎之間的關系。方法：選取近期我院收治的54例慢性胃炎患者及在我院進行健康體檢的60例健康人作為研究對象。將54例慢性胃炎患者作為觀察組，將60例健康體檢者作為對照組。使用放射免疫法測定兩組受試者胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平。分析TNF-α及iNOS的水平與胃炎之間的關系。結果：經檢測發現，觀察組患者TNF-α及iNOS的水平均明顯高于對照組受試者，差異具有統計學意義（P＜0.05）。結論：胃炎患者胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平會升高，檢測其胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平可作為診斷其是否患有胃炎的依據。

胃黏膜組織；腫瘤壞死因子α；誘導型一氧化氮合酶

胃炎是目前臨床上常見的一種疾病。該病主要因幽門螺桿菌（Helicobacter pylori，Hp）感染所致，可嚴重影響患者的正常生活[1]。胃炎在發達國家居民中的發病率為30%～50%，在發展中國家居民中的發病率為80%以上。相關的報道指出，胃黏膜組織中的TNF-α及iNOS在胃炎的發病過程中扮演著重要的角色。胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平可作為診斷胃炎或判定胃炎進展情況的依據[2]。為此，我院使用放射免疫法檢測近期收治的54例慢性胃炎患者及在我院進行健康體檢的60例健康人的TNF-α及iNOS的水平，分析其TNF-α及iNOS的水平與胃炎之間的關系，現將研究結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本文的研究對象為我院2014年1月至2014年12月期間收治的54例慢性胃炎患者及在我院進行健康體檢的60例健康人。將54例慢性胃炎患者作為觀察組，將60例健康體檢者作為對照組。觀察組中有男性患者28例，女性患者26例；其年齡為22～67歲，平均年齡為（41.32±7.45）歲；其病程為3個月～5年；其臨床癥狀主要是上腹痛、腹脹、噯氣、出血、食欲不振、反酸、惡心嘔吐、乏力、便秘、腹瀉、消瘦、貧血等。該組患者均經臨床診斷被確認患有慢性胃炎，其癥狀符合《中國慢性胃炎共識意見》（2012年）中關于慢性胃炎的診斷標準。對照組中有男性受試者30例，女性受試者30例；其年齡為24～65歲，平均年齡為（41.50±7.50）歲。兩組研究對象的一般資料相比，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 使用胃鏡刮取所有受試者的胃黏膜組織。使用放射免疫法測定兩組受試者胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平，具體的方法是：1）測定受試者TNF-α的水平：用濃度為0.9%的氯化鈉沖洗胃黏膜樣本至無血。用分析天平稱量樣本的濕質量，并將其放入微型玻璃勻漿器中，并加入濃度為0.9%的氯化鈉。粉碎樣本。將樣本放置在離心機中，將參數設置為3000 r/min，持續離心15min。提取樣本的上層清液，將其保存在-20°C的冷柜中。使用BH6020全自動γ計數器測定TNF-α的水平。2）測定受試者iNOS的水平：將胃黏膜組織樣本切片脫蠟至水。將組織切片浸泡在尿素溶液中30min。使用10 ml/L的過氧化氫對組織切片進行0.5 h的封閉內源酶處理。使用正常羊血清封閉樣本，在37°C的環境下放置0.5 h。在樣本中滴加一抗，在4°C的環境下放至隔天。在樣本中加入生物素羊抗兔IgG（1∶100），在37°C的環境下放置40min。在樣本中滴入ABC復合物（1∶100），在37°C的環境下放置40min。在樣本中加入DAB顯色液，用蘇木精進行襯染。將樣本脫水，封片。使用400倍視野的光學顯微鏡觀察每片切片中相對染色強、陽性細胞多的部位，得出陽性細胞所占的比例。綜合每個視野中陽性細胞所占的比例[5,6]。

1.3 觀察指標 觀察兩組受試者胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平。

1.4 統計學方法 本次研究的數據均采用統計學軟件SPSS17.0進行處理，兩組受試者TNF-α及iNOS的水平用均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

經檢測發現，觀察組患者TNF-α的水平為（1.41±0.33）ng/mg，iNOS的水平為（69.34±6.10）%。對照組受試者TNF-α 的水平為（0.64±0.22）ng/mg，iNOS的水平為（21.94±3.87）%。觀察組患者TNF-α及iNOS的水平均明顯高于對照組受試者，差異具有統計學意義（P＜0.05）。詳細情況見表1。

表1 兩組受試者TNF-α及iNOS的水平（±s）

表1 兩組受試者TNF-α及iNOS的水平（±s）

組別 TNF-α（ng/mg） iNOS（%）觀察組（n=54） 1.41±0.33 69.34±6.10對照組（n=60） 0.64±0.22 21.94±3.87 t 14.790 50.043 P＜0.05 ＜0.05

3 討論

胃炎是多種不同病因引起的胃黏膜急性或慢性炎癥，是臨床上常見的一種消化系統疾病。該病患者在臨床上的表現主要是上腹痛、腹脹、噯氣、食欲不振、反酸、惡心嘔吐、乏力、便秘、腹瀉、消瘦、貧血等。臨床上一般按照患者發病的緩急和病程的長短，將胃炎分為急性胃炎和慢性胃炎。急性胃炎是由多種病因引起的急性胃黏膜炎癥。急性胃炎的發病較急。慢性胃炎是由各種病因引起的胃黏膜慢性炎癥或萎縮性病變。據統計，慢性胃炎患者約占接受胃鏡檢查患者的80%～90%。流行病學調查結果顯示，隨著人們年齡的增加，其罹患胃炎的幾率也不斷上升。胃炎嚴重影響患者的日常工作和生活。臨床醫生主要使用保護胃黏膜的藥物、調整胃腸運動功能的藥物、抗生素、制酸劑、止痛藥等藥物治療該病。胃炎患者若未得到有效的治療，其病情可發展為胃潰瘍，進而發展成胃癌。據統計，我國胃癌患者的數量及胃癌的發病率均處于較高的水平。如何準確地診斷胃炎患者的病情是臨床醫生對其進行治療的重要前提，也是減少胃炎所致不良影響、阻止其病情惡化的關鍵。

TNF-α是當今醫學界發現的抗腫瘤活性最強的細胞因子。TNF-α是單核細胞、巨噬細胞受到致炎因子影響后釋放的一種細胞因子，是一種可使中性粒細胞移動的促炎癥蛋白。TNF-α可調控內皮細胞上黏附分子和中性粒細胞的表達，誘導中性粒細胞黏附，促使白細胞穿出血管壁，從而損傷胃黏膜細胞，減少胃黏膜組織的血流量[3]。而胃黏膜組織血流正常是維持胃黏膜組織整體防御機制正常運行的重要因素。同時，TNF-α能夠干擾靶細胞膜的磷脂代謝，進而導致氧自由基的出現，引發溶酶體破裂，對組織造成損傷或導致組織死亡[4]。

iNOS水平的高低可以反應機體發生炎癥的程度。正常生理狀態下，胃黏膜血管內皮細胞與神經元產生的iNOS含量較低，其主要作用為調節胃黏液的分泌功能及胃黏膜的微循環，是保護胃黏膜的重要物質。但在炎癥病理狀態下，iNOS過量會導致羥自由基和過氧硝基陰離子的毒性增強，甚至引發基因突變[5]。胃炎患者體內的iNOS水平升高時，會導致其體內的一氧化氮與氧相互作用，形成二氧化氮、三氧化二氮、四氧化二氮等大量的氧代謝產物。這些氧代謝產物存在著不同程度的毒性，在與生物大分子蛋白質、脂肪、核酸等發生相互作用后，會對患者的各組織細胞造成損傷，破壞其機體內環境的穩定性，使其胃黏膜逐步喪失屏障功能，無法應對炎性細胞因子的侵襲，進而發生病理改變。

由于TNF-α及iNOS對機體的病理改變存在較高的敏感性，而胃炎的發生屬于一種病理改變。因此，從理論上來說，檢測胃黏膜組中TNF-α及iNOS的水平可作為診斷胃炎的依據。但這一理論是否對臨床工作具有指導作用還需要通過大量的臨床實踐來論證。目前，圍繞胃炎發病機制及影響因素開展的研究比較廣泛，鮮有研究涉及胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平與胃炎的相關性。這使得該研究領域存在較大的空白。本次研究結果顯示，胃炎患者胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平均明顯高于健康人。這充分證明檢測胃黏膜組中TNF-α及iNOS水平可作為診斷胃炎的指標。

綜上所述，胃炎患者胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平會升高。檢測胃黏膜組織中TNF-α及iNOS的水平可作為診斷胃炎的依據。

[1]趙敏，呂賓，黃宣，等.胃復春對腫瘤壞死因子誘導人胃上皮GES-1細胞炎癥和腸化的影響[J].中國中西醫結合消化雜志，2012，20(9):394-397.

[2]中華醫學會消化病學分會，房靜遠，劉文忠，等.中國慢性胃炎共識意見(2012年，上海)[J].中華消化雜志，2013，33(1):5-16.

[3]盧燦榮，孫剛，周智勇，等.血清中白細胞介素及腫瘤壞死因子-α含量與幽門螺桿菌感染的關系[J].中華醫院感染學雜志，2012，22(8):1552-1554.

[4]伍紅英，方慧祺，鄧燕，等.尾型同源異型盒基因2、腫瘤壞死因子α蛋白表達及幽門螺桿菌感染與慢性胃病伴腸上皮化生關系研究[J].中國醫師進修雜志，2014，37(4):20-23.

[5]孫波.腫瘤壞死因子α和白介素1β及誘導型一氧化氮合酶的表達與幽門螺桿菌相關性胃炎的關系[J].中國全科醫學，2010，13(11):1155-1157.

Relationship between tumor necrosis factor alpha and iNOS expression in gastric mucosa and the pathogenesis of gastritis

Huang Qin Yibin Third People’s Hospital,Yibin Sichuan 644000

Objective∶ To investigate the relationship between the levels of tumor necrosis factor (TNF-α)and iNOS (inducible nitric oxide synthase)in gastric mucosa and gastritis.Methods∶ Fifty - four cases of chronic gastritis and 60 cases of healthy subjects in our hospital were selected as subjects.54 cases of chronic gastritis patients as the observation group,60 cases of healthy subjects as a control group.The levels of TNF-α and iNOS in the gastric mucosa were measured by radioimmunoassay.The relationship between the levels of TNF-α and iNOS and gastritis was analyzed.Results∶ The levels of TNF-α and iNOS in the observation group were significantly higher than those in the control group,the difference was statistically significant (P ＜0.05).Conclusion∶ The levels of TNF-α and iNOS in gastric mucosa of patients with gastritis are increased.The levels of TNF-α and iNOS in gastric mucosa can be used as the basis for diagnosis of gastritis.

Gastric mucosa; Tumor necrosis factor α; Inducible nitric oxide synthase

R573.3

B

2095-7629-（2017）1-0007-03