冠心病不同冠脈病變程度患者外周血Treg細胞及全球急性冠狀動脈事件注冊評分的關系

郭 楠，顏利求，鄭 曄，曹緒芬

(河北省滄州市中心醫院心內一科 061014)

冠心病不同冠脈病變程度患者外周血Treg細胞及全球急性冠狀動脈事件注冊評分的關系

郭 楠，顏利求，鄭 曄，曹緒芬

(河北省滄州市中心醫院心內一科 061014)

冠心病；外周血；Treg細胞；全球急性冠狀動脈事件注冊評分

冠心病患者心血管事件發生率明顯增高，心腦血管事件的發生對社會和家庭造成嚴重的經濟負擔，控制冠心病患者心血管事件發生，是當前研究的重點課題[1-2]。冠狀動脈病變程度是影響冠心病患者心血管事件的重要因素，早期明確并采取積極的應對措施，有助于減少不良事件發生。全球急性冠狀動脈事件注冊評分(GRACE)和其危險分層的評價是評價冠心病危險分級的重要量表之一，與冠心病臨床預后密切相關[3-4]。免疫活化是冠脈病變的主要病理機制之一，血清中Treg細胞水平反映機體免疫活化的程度[5]。本研究探討冠心病患者外周Treg細胞變化與冠脈病變程度及GRACE的關系，現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2012年7月至2014年7月行冠狀動脈造影確診為冠心病的患者150例，其中男74例，女76例；年齡37～61歲，平均(52.4±4.5)歲；單支病變48例，雙支病變78例，多支病變24例；輕度閉塞42例，中度閉塞42例，重度閉塞44例，完全閉塞22例。所有患者行冠狀動脈造影檢查，冠心病診斷標準參照2007年美國心臟病學會(ACC)和美國心臟協會(AHA) 指南[6]。入選標準：(1)符合冠心病的診斷標準；(2)所有患者均同意參加本研究；排除標準：(1)合并腎病等其他臟器嚴重并發癥患者；(2)精神異?；颊?；(3)孕婦或哺乳期婦女。根據150例患者冠狀動脈造影結果分為單支、雙支、多支病變組。依據計算機密度測定法評估冠狀動脈狹窄程度，分為輕度、中度、重度、完全閉塞組，其中50%～<75%為輕度，75%～<90%為中度，90%～<100%為重度，100%為完全閉塞[9]。記錄入選患者的年齡、性別、吸煙史等情況。

1.2方法

1.2.1Treg細胞及Th17細胞水平監測 收集患者空腹外周靜脈血，用Active motif公司的試劑盒按說明書提取外周血單個核細胞(PBMCs)，得到PBMCs后PBS重懸細胞，取20 μL細胞懸液，調節細胞濃度，按照流式細胞檢測說明書加入流式細胞儀抗體后，按照說明書進行相關操作，流式細胞儀上檢測Treg細胞和Th17細胞水平，Treg細胞采用Foxp3 Alexa Fluor488/CD25PE/CD4 PerCP，Th17細胞采用抗人IL-17Alexa Fluor647/CD3 FITC/CD4PE，兩種抗體均購于上海百賽生物科技有限公司。

1.2.2GRACE 所有患者均進行GRACE，分值為2～283分，內容包括年齡、心律、收縮壓、肌酐、Killip分級、是否發生心血管事件、心肌酶標志物、ST段變化，所有患者均在入院后評估以上臨床資料，最后進行GRACE。

2 結 果

2.1不同冠脈病變患者一般臨床資料比較 多支病變組患者高脂血癥和糖尿病發病率明顯高于雙支病變組和單支病變組(均P<0.05)，見表1；輕度閉塞組患者高脂血癥及糖尿病發病率均低于中、重度、完全閉塞組患者，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

2.2不同冠脈病變患者Treg細胞、Th17細胞及Grace比較 多支病變組患者Treg細胞、Treg/Th17比值、GRSCE分別為(1.42±0.25)%、(0.39±0.08)%、(165.3±28.9)分明顯高于雙支病變和單支病變組，而Th17細胞為(3.14±0.99)%明顯低于雙支病變和單支病變組(P<0.05)，見表3；完全閉塞組Treg細胞、Treg/Th17比值、GRACE分別為(1.45±0.31)%、(0.42±0.09)%、(168.4±25.7)分明顯高于輕度、中度、重度狹窄組，而Th17細胞為3.01±1.03明顯低于輕度、中度、重度狹窄組，組間差異有統計學意義(P<0.05)，見表4。

2.3冠脈病變與Treg細胞、Th17細胞及GRACE的關系 冠脈病變支數和閉塞程度均與Treg細胞、Treg/Th17比值及GRACE呈正相關(r值分別為0.435、0.543、0.632,和0.534、0.631、0.698，P<0.05)，與Th17水平均呈負相關(r值分別為-0.387、-0.427，P<0.05)，見表5。

表1 不同冠脈病變支數患者一般臨床資料比較

a：P<0.05，與單支病變組比較；b：P<0.05，與雙支病變組比較

表2 不同冠脈狹窄程度患者一般臨床資料比較

a：P<0.05，與輕度閉塞比較

表3 不同冠脈病變支數患者Treg細胞及Th17細胞水平比較

a：P<0.05，與單支病變比較；b：P<0.05，與雙支病變比較

表4 冠脈不同狹窄程度患者Treg細胞及Th17細胞水平比較

a：P<0.05與輕度閉塞組比較；b：P<0.05，與中度閉塞組比較；c：P<0.05，與重度閉塞組比較

表5 冠脈病變與Treg細胞、Th17細胞及 GRACE的關系

3 討 論

冠狀動脈病變的主要原因是動脈粥樣硬化，動脈粥樣硬化的主要病理機制之一是炎性反應，炎癥細胞產生的各種炎癥因子可能加重動脈粥樣硬化[6-8]。本研究結果提示冠心病患者具有較高的高脂血癥及糖尿病發生率，而且隨著冠脈病變程度的加重，高脂血癥及糖尿病的發病率也上升，組間差異有統計學意義(P<0.05)。

炎癥和氧化應激是動脈粥樣硬化的主要病因學說，Treg細胞具有負向調控免疫炎性反應的作用，有助于抑制免疫炎性反應的形成，而且Treg細胞可以抑制Th17細胞，而Th17細胞在動脈粥樣硬化形成過程中有重要的臨床意義，Th17可促進活性氧(ROS)形成，ROS形成過多導致氧化應激增強，促進動脈粥樣硬化過程中泡沫細胞形成，促進內皮細胞損傷加速動脈血管損傷[9-11]。Th17細胞可分泌大量趨化因子活化核因子(NF)-κB信號通路，促進炎癥因子活化形成，腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素(IL)-6等炎癥因子可誘發微炎癥狀態促進動脈損傷[12]。這就意味著冠心病患者冠脈損傷可能與Treg細胞和Th17細胞水平密切相關。

因此本研究通過回顧性分析本院150例冠心病患者的臨床資料，探討血清中Treg及Th17細胞水平與冠心病冠脈病變程度及GRACE的關系。本研究結果提示，冠心病患者冠脈病變程度越嚴重，患者Treg細胞的含量越高，Th17細胞含量越低，而Treg/Th17比值也逐漸升高，表明冠心病患者冠脈病變程度與Treg和Th17細胞水平密切相關；進一步探討冠脈病變程度與GRACE的關系，結果證實冠脈狹窄程度越高和冠脈病變支數越多GRACE越高，這也進一步證實了GRACE與冠心病患者病情的相關性，能較好地反映患者病情的嚴重程度。

研究提示Treg細胞抑制Th17細胞分化，抑制炎癥因子形成從而抑制動脈粥樣硬化的進程，而且Treg細胞還可以影響膽固醇代謝從而抑制泡沫細胞形成[13-14]，Treg細胞水平可能與冠狀動脈粥樣硬化程度相關的重要因素之一。相關性分析結果提示Treg細胞水平、GRACE與冠脈病變程度呈正相關，與Th17細胞水平呈負相關。

本研究采用GRACE對患者冠脈風險進行分層，將T細胞水平與GRACE進行相關性分析，結果提示GRACE與Treg細胞水平、Treg/Th17比值呈正相關、與Th17水平呈負相關，這就進一步提示Treg細胞水平與患者冠脈風險事件密切相關，積極監測Treg細胞水平有重要的臨床意義。

本研究結果提示，血清中Treg細胞水平與冠心病患者動脈粥樣硬化病變程度密切相關，而且與患者GRACE相關，Treg細胞水平越高患者冠脈病變程度越嚴重、GRCAE越高，Treg細胞水平越低患者冠狀動脈風險事件發病率越高，檢測患者外周血中Treg細胞有助于病情監測。

[1]王越越，汪琦瑛，韓國鑫，等．青年冠心病患者臨床特點及危險因素分析[J]．中華急診醫學雜志，2015，24(4)：386-390．

[2]韓全樂，毛瑞英，王金艷，等．早發冠心病患者血清骨保護素水平及其臨床危險因素[J]．中國老年學雜志，2015(19)：5461-5464．

[3]李琳，李芳，肖婷，等．冠心病患者血清活化T細胞趨化因子水平變化及與髓過氧化物酶、脂蛋白磷脂酶A2水平和全球急性冠狀動脈事件注冊評分的相關性[J]．中國老年學雜志，2016，36(3)：585-587．

[4]馬冰寧，徐戈．急性冠狀動脈綜合征患者全球急性冠狀動脈事件注冊危險評分系統與載脂蛋白的相關研究[J]．中華老年心腦血管病雜志，2015(9)：977-979．

[5]王歡，胡元會，魏藝，等．冠心病慢性心力衰竭患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg細胞的研究[J]．中西醫結合心腦血管病雜志，2015，13(1)：33-36．

[6]盧浩，李夢豪，王媛媛，等．5項炎癥指標對動脈粥樣硬化及冠心病風險判斷的價值[J]．實用醫學雜志，2016，32(2)：203-207．

[7]周亮亮，宮劍濱，李德閩，等．心外膜脂肪定量及其炎癥狀態與冠狀動脈粥樣硬化斑塊易損性的關系[J]．中華心血管病雜志，2015，43(2)：134-140．

[8]尚玉秀，劉一郡．抑郁與炎癥對中老年冠心病患者預后的影響[J]．中國老年學雜志，2016，36(13)：3154-3155．

[9]田秀青，王清，葛慶玲．β受體阻滯劑對急性冠脈綜合征Th17/Treg的作用研究[J]．中國臨床實用醫學，2016，7(3)：16-19．

[10]姜紅菊，王蕾，李潤智，等．Th1/Th2、Treg/Th17漂移在急性冠狀動脈綜合征中的研究進展[J/CD]．中華臨床醫師雜志(電子版)，2013，7(7)：3104-3106．

[11]朱治蓉．Th17細胞和Treg細胞與急性冠狀動脈綜合征相關性研究進展[J]．心血管病學進展，2013，34(4)：583-585．

[12]冀元元，李綱，劉志遠，等．阿托伐他汀對冠心病炎癥因子hs-CRP、TNF-α和IL-6水平的干預作用[J]．中國生化藥物雜志，2014，39(7)：147-149．

[13]張艷平，丁矢．急性冠狀動脈綜合征患者Th17和Treg細胞的變化檢測[J]．中國醫藥指南，2012，10(3)：103-104．

[14]李慶．外周Th17/Treg失衡在動脈粥樣硬化中的作用及全反式維甲酸對其的影響和機制[D]．合肥：安徽醫科大學，2010．

目的探討冠心病不同冠脈病變程度患者外周血Treg細胞及全球急性冠狀動脈事件注冊評分(GRACE)的關系。方法選擇2012年7月至2014年7月行冠狀動脈造影確診為冠心病的患者150例作為研究對象，收集患者外周血，檢測外周血中Treg細胞水平并進行GRACE。結果多支病變組患者Treg細胞水平及Treg/Th17比值明顯高于雙支病變組和單支病變組，而Th17細胞水平明顯低于雙支病變組和單支病變組(P<0.05)。完全閉塞組Treg細胞水平及Treg/Th17比值明顯高于輕度、中度、重度狹窄組，而Th17細胞水平明顯低于輕度、中度、重度狹窄者(P<0.05)。冠脈病變支數和閉塞程度均與Treg細胞水平、Treg/Th17比值及GRACE呈正相關(r值分別為0.435、0.543、0.632,和0.534、0.631、0.698，P<0.05)，與Th17細胞水平均呈負相關(r值分別為-0.387、-0.427，P<0.05)。結論冠心病患者外周血Treg細胞水平與冠脈病變程度及GRACE密切相關。

R541.4

B

1671-8348(2017)31-4413-03

10.3969/j.issn.1671-8348.2017.31.033

郭楠(1981-)，在讀博士，副主任醫師，主要從事冠心病方面的研究。

2017-05-18

2017-06-22)