海水輪蟲高密度培養技術

■ 廣東省海洋漁業試驗中心 楊宇晴 劉蘇 張海發 吳錦輝 黃培衛/文圖

海水輪蟲高密度培養技術

■ 廣東省海洋漁業試驗中心 楊宇晴 劉蘇 張海發 吳錦輝 黃培衛/文圖

輪蟲是水產養殖動物苗種階段優良的開口餌料，其作為活餌料的應用大大促進了水產動物種苗生產的發展。近幾年來隨著水產養殖業的發展壯大，水產動物種苗的培育量大大提高，作為優質活餌料的輪蟲的需求量也日益增加。目前國內輪蟲的來源，主要是通過室外土池人工養殖或室內水泥池培育，一般的培養密度只有200個/mL左右，產量低、周期長。現有傳統的輪蟲培養方法已經不能滿足生產的需要，亟需研究一種新型的快速、高效的輪蟲培養方法。本文研究如何在小水體提高輪蟲培育密度，以獲得生產性的技術要求和運用。

一、培養條件

2017年在廣東省海洋漁業試驗中心開展了輪蟲高密度培養；所用容器為塑料圓桶，墊高一側使桶面與水平面呈5度傾斜狀，培養水體為每桶200L；培養用水為過濾的自然海水，水溫23～26℃，鹽度32‰，pH值8.0，培養開始前用強氯精進行消毒，待余氯檢測合格后施加40mL濃縮藻；每個桶放氣石4個，其中1個采用納米氣石連接制氧機進行純氧充氣，其余3個采用普通氣石進行自然充氣；每個桶中懸掛吸污濾布，并每天清洗2～3次。實驗所用輪蟲種為廣東省海洋漁業試驗中心培養的SS型褶皺臂尾輪蟲；輪蟲培養所用餌料為濃縮的海水小球藻，藻細胞含量為250億/mL，投餌量為每百萬輪蟲1天投喂6mL，采用微量泵進行連續投喂；培養周期為5天。在培養過程中，我們探討了純氧充氣、初始接種密度（密度比例約1∶2∶4）、投餌量等不同條件對輪蟲數量增長的影響，總結出海水輪蟲高密度培養技術的適宜條件。

二、培養結果

1．純氧充氣進行輪蟲培養

充氣是保證水體溶解氧的主要途徑，是高密度培養的基礎條件。我們通過自然充氣和增加純氧充氣進行了輪蟲培養，經過5天的培養，輪蟲密度從200個/ml增長到約1500個/mL。但是隨著培養的進行（圖1），自然充氣組溶解氧會下降，從最初的13.7mg/L到實驗結束時下降為4.07mg/L；而純氧充氣組溶解氧能一直維持在12mg/L左右。增加純氧充氣對高密度培養輪蟲有更好的溶解氧保證。

2．合適的投餌量

合適的投餌量是成功培養的關鍵。投餌太少，輪蟲吃不飽影響增殖速度；投餌太多，多余的餌料敗壞水質從而導致培養失敗。我們設置3個投餌量組（圖2），經過5天的培養，每百萬輪蟲1天投喂濃縮藻6mL和9mL組，輪蟲密度從大約70個/mL增長到約590個/mL；而3mL組的只增長到241個/mL。同時，輪蟲密度越高，培養水體的氨氮含量也越高，6mL組和9mL組最終都為30mg/L左右，3mL組為11.4mg/L。從圖3培養水體的溶解氧來看，3mL組和6ml組都能保持在10mg/L以上；9mL組溶解氧則有明顯的下降，培養結束時溶解氧只有6.27mg/L。綜合來看，每百萬輪蟲1天投喂濃縮藻6mL是最佳的選擇，不但能保證輪蟲數量的大量增長，同時能保持水體溶解氧在一個較高的水平。隨著輪蟲數量的增長，應注意控制水體的氨氮含量。

3．接種密度的比較

圖1 增加純氧充氣進行輪蟲培養

在理想條件下，輪蟲的增殖是按2的倍數進行的，接種密度對輪蟲的數量增殖將產生很大的影響。我們采用3種不同的接種密度進行了輪蟲培養，經過5天的培養，低密度組（接種密度116個/mL）最終輪蟲密度為1138個/mL，中密度組（接種密度208個/mL）最終輪蟲密度為1637個/mL，高密度組（接種密度413個/mL）最終輪蟲密度為3313個/mL。表明經過同樣時間的培養，接種密度越高，輪蟲數量增加越多。但是，輪蟲密度越高，氨氮含量也隨之越高，應注意控制。同時，輪蟲密度高對水體溶解氧消耗更大，中密度組和高密度組在培養結束時水體溶解氧較低，分別為5.66mg/L和5.58mg/L（圖5），因此高密度培養中應注意增加純氧的供應量以防止培養后期輪蟲密度增加后造成水體缺氧。

圖2 不同投餌量進行的輪蟲培養

圖3 不同投餌量進行輪蟲培養的水體溶解氧情況

三、培養的技術要點

圖4 不同初始接種密度進行輪蟲培養

圖5 不同初始接種密度進行輪蟲培養的水體溶解氧情況

通過對輪蟲培養過程中各條件的摸索，我們總結形成了一種簡易的小水體海水輪蟲高密度培養方法，其技術要點總結如下：

1．設置培養桶。培養用桶設置呈大約5度的傾斜，且桶內懸掛吸污濾布。在輪蟲培養過程中，培養桶里會產生大量泡沫，傾斜桶面能保證其被及時排出，清潔培養水體。高密度培養的空間里，輪蟲會產生很多排泄物，需要通過吸污濾布對其進行吸附去除。吸污濾布每天應進行多次清洗，對清潔培養水體有很好的效果。

2．純氧充氣。桶內要有純氧充氣以及自然充氣。高密度輪蟲培養，對氧氣消耗大，要求水體溶解氧達到標準，應保證培養水體溶解氧大于6mg/L。自然充氣無法滿足水體溶解氧的要求，因此需要增加純氧充氣，同時應采用納米氣石以延長純氧與海水彌散接觸時間，能有效保證水體溶解氧含量。自然充氣在輪蟲培養中也是不可或缺，采用普通氣石，開大充氣量，能使培養水體翻滾。自然充氣一是為了攪動水體使投喂的濃縮藻不沉底，同時使污物附著在吸污濾布上，二是使培養水體產生大量泡沫，泡沫排出能帶走部分污物以清潔水體，同時泡沫顏色也能反映餌料充足與否。如泡沫顏色呈綠色，表明投餌量過多；如泡沫顏色發白，表明投餌量過少；如泡沫顏色呈灰褐色，表明投餌量適宜。

3．水質管理。培養用水要過濾消毒，防止原生動物在水體中成為優勢種而導致的培養失敗。一般控制水體pH值在8.0、在水溫25～30℃以及保持穩定的鹽度。

4．接種密度。輪蟲數量增長與接種密度呈正相關，我們在200L水體中按照413個/mL的密度進行接種，經過5天培養最終密度可高達3313個mL。另外，在培育初始時，要采用高接種密度。

5．餌料投喂。餌料投喂的量要合適，過少不利于輪蟲數量增長，過多則容易導致水質敗壞。適宜的投喂量為每百萬輪蟲1天投喂濃縮藻（濃度為250億/ml）6mL。投喂方式采用微量泵向培養桶中持續投喂濃縮小球藻。

6．換水與收獲。在連續性的培養過程中，換水與收獲一般同時進行。使用300～400目篩網，每次收獲水體的1/3，以利于輪蟲恢復密度。5～7天進行一次徹底換水。