阿格列汀聯(lián)合格列美脲治療糖尿病大鼠的療效及對(duì)胰島β細(xì)胞功能的影響

吳堅(jiān)++++++溫建東++++++肖林林++++++薛小燕++++++段德正

[摘要]目的 探討阿格列汀聯(lián)合格列美脲對(duì)2型糖尿病大鼠的降糖療效及對(duì)胰島β細(xì)胞功能的影響。方法 將50只采用高糖高脂飲食喂養(yǎng)和小劑量注射鏈脲佐菌素建立的雄性糖尿病大鼠模型隨機(jī)分為5組，即：2型糖尿病模型對(duì)照組（A組），阿格列汀單藥組（B組），格列美脲單藥組（C組），阿格列汀聯(lián)合格列美脲組（D組）及阿格列汀聯(lián)合格列苯脲組對(duì)照組（E組），每組各10只大鼠。另取10只正常大鼠作為正常對(duì)照組（F組），口服給藥，每日固定時(shí)間給藥1次。觀察連續(xù)給藥28 d后各組大鼠的空腹血糖（FBG）、血漿胰島素水平（FIns）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）的變化，計(jì)算HOMA-βF指數(shù)及胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）。結(jié)果 經(jīng)過(guò)28 d的治療后，A、B、C、D及E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均高于F組，HOMA-βF低于F組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。B、C、D和E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均顯著低于A組，HOMA-βF高于A組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。C組大鼠的FBG、FIns低于B組，TG、TC高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），D、E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均顯著低于B組，HOMA-βF高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。D、E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均低于C組，HOMA-βF高于C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。D組和E組大鼠的各指標(biāo)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 分別給予阿格列汀單藥、格列美脲單藥或是聯(lián)合用藥均能顯著降低2型糖尿病大鼠的血糖，改善TG、TC其胰島β細(xì)胞功能及胰島素抵抗，但聯(lián)合用藥效果優(yōu)于單藥治療。

[關(guān)鍵詞]阿格列汀；格列美脲；2型糖尿病大鼠；胰島β細(xì)胞功能

[中圖分類號(hào)] R285.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2017）11（c）-0010-03

Effect of Alogliptin combined with Glimepiride in diabetes rats and its influence on islet β cells function

WU Jian WEN Jian-dong XIAO Lin-lin XUE Xiao-yan DUAN De-zheng

Department of Pharmacy，Ganzhou People′s Hospital，Jiangxi Province，Ganzhou 341000，China

[Abstract]Objective To investigate the hypoglycemic effects and the function of islet β cells of Alogliptin combined with Glimepiride in type 2 diabetes mellitus rats.Methods fifty rats of type 2 diabetes mellitus which were induced through high-sucrose and high-fat diet combined with low-dose abdominal injection of Streptozotocin were randomly divided into five groups：model group（group A），Alogliptin group （group B），Glimepiride group （group C），Alogliptin combined with Glimepiride group （group D），Alogliptin combined with Glibenclamide （group E），10 rats in each group.Another 10 normal rats were selected as normal group （group F）.The fasting blood glucose （FBG），level of plasma insulin （FIns），total cholesterol （TC） and triglyceride（TG） levels were detected in rats after treated for 28 days，the HOMA-βF index and insulin resistance index （HOMA-IR） were calculated.Results After 28 d treatment，the FBG，TG，TC，F(xiàn)ins and HOMA-IR of the rats in group A，B，C，D and E were all higher than those in group F，the HOMA-βF was lower than group F，and the differences were statistically significant （P<0.01）.The FBG，TG，TC，F(xiàn)Ins，and HOMA-IR of rats in group B，C，D and E were significantly lower than those in group A，and HOMA-βF was higher than group A，and the differences were statistically significant （P<0.01）.The FBG and FIns of rats in group C were lower than those in group B，TG and TC were higher than those in group B，the differences were statistically significant （P<0.05）.The FBG，TG，TC，F(xiàn)ins and HOMA-IR of rats in group D and E were significantly lower than those of group B，HOMA-βF was higher than group B，and the differences were statistically significant （P<0.01）.The FBG，TG，TC，F(xiàn)Ins and HOMA-IR of the rats in group D and E were lower than those in group C，HOMA-βF was higher than that in group C，and the differences were statistically significant （P<0.05）.There was no statistically significant difference between D and E groups （P>0.05）.Conclusion Alogliptin，Glimepiride single or combined can significantly reduce the blood glucose of type 2 diabetic rats，improve TG，TC，the function of islet β cell and insulin resistance，but combined effect is better than single drug therapy.endprint

[Key words]Alogliptin；Glimepiride；Type 2 diabetes mellitus rats；Islet β cell function

隨著中國(guó)步入老齡化社會(huì)，最新流行病學(xué)調(diào)查顯示：2010年中國(guó)成年2型糖尿病發(fā)病率已為11.6%[1]，患者人數(shù)已經(jīng)位居世界第一，且有快速增加的趨勢(shì)[2]，糖尿病的防治工作任重道遠(yuǎn)。糖尿病臨床主要表現(xiàn)為：β細(xì)胞胰島素分泌不足及胰島素抵抗，并常伴有動(dòng)脈粥樣硬化、高血壓以及脂代謝異常[3]。以格列美脲為代表的磺脲類口服降糖藥是目前臨床上廣泛用于治療糖尿病的主要藥物類別之一[4]。但隨著患者病程的延長(zhǎng)，單一用藥無(wú)法有效控制患者的血糖，指南及臨床多采用聯(lián)合用藥，進(jìn)而進(jìn)一步控制患者血糖[5]。使用新型降糖藥DPP-4抑制劑治療2型糖尿病是目前較新的方法[6]。關(guān)于格列美脲聯(lián)合西格列汀[5]、沙格列汀[7]及利格列汀[8]用于臨床的研究已有報(bào)道，但阿格列汀作為DPP-4抑制劑的最新的代表藥物[9]，其聯(lián)合用藥的動(dòng)物研究尚未見，故本研究以2型糖尿病大鼠為研究對(duì)象，觀察阿格列汀聯(lián)合格列美脲的降糖療效及胰島β細(xì)胞功能的影響，現(xiàn)具體報(bào)道如下。

1對(duì)象與方法

1.1對(duì)象

SPF級(jí)8周齡的雄性大鼠，體重（200±20）g，80只，購(gòu)于江西中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào)：JZDW 2016-0547。

1.2藥品與試劑

格列美脲[亞莫利，賽諾菲（北京）制藥有限公司，2 mg/片，批號(hào)：7BJB038]，阿格列汀片（尼欣那，武田藥品工業(yè)株式會(huì)社，25 mg/片，批號(hào)：AM324）均購(gòu)于我院藥劑科。鏈脲佐菌素（STZ，美國(guó)Sigma公司，批號(hào)：F-0711），鼠胰島素酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）試劑盒購(gòu)于上海寶曼生物科技有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物高脂飼料購(gòu)買于江西中醫(yī)藥大學(xué)。

1.3儀器

Beckman AU5800全自動(dòng)生化分析儀（貝克曼公司），高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)SIGMA 3-18K），美國(guó)強(qiáng)生血糖儀。

1.4模型制備與分組

選取空腹血糖正常大鼠70只，予以高糖高脂聯(lián)合鏈脲佐菌素（45 mg/kg，ip）[10]，72 h后空腹測(cè)尾靜脈血糖，以血糖≥11.1 mmol/L為造模成功。選取造模成功的2型糖尿病大鼠50只，隨機(jī)分為2型糖尿病模型組（A組），阿格列汀單藥組（B組，每天給藥5 mg/kg），格列美脲單藥組（C組，每天給藥0.5 mg/kg）[11]，阿格列汀聯(lián)合格列美脲用藥組（D組，每天分別給藥2.5 mg/kg及0.25 mg/kg），阿格列汀聯(lián)合格列苯脲用藥組（E組，每天分別給藥2.5 mg/kg及0.25 mg/kg），每組各10只，另取10只空腹血糖正常的大鼠作為正常對(duì)照組（F組），給予生理鹽水。于每天固定時(shí)間給予相應(yīng)藥物，連續(xù)給藥28 d。

1.5觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

觀察連續(xù)給藥28 d后大鼠的空腹血糖（FBG）、血漿胰島素水平（FIns）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）的變化，計(jì)算HOMA-βF指數(shù)及胰島素抵抗指數(shù)（HOMA-IR）。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，大鼠禁食8 h以上，采用葡萄糖氧化酶法測(cè)定空腹血糖（FBG），采用10%水合氯醛3 ml/kg，ip麻醉，取腹主動(dòng)脈血，離心，取血清采用Beckman X20全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)FIns、TG、TC。HOMA-βF=20×FIns/（FBG-3.5）[12]。HOMA-IR=FIns×FBG/22.5[13]。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

經(jīng)過(guò)28 d的治療后，A、B、C、D及E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均高于F組，HOMA-βF低于F組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。B、C、D和E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均顯著低于A組，HOMA-βF高于A組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。C組大鼠的FBG、FIns低于B組，TG、TC高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），D、E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均顯著低于B組，HOMA-βF高于B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。D、E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR均低于C組，HOMA-βF高于C組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。D組和E組大鼠的FBG、TG、TC、FIns、HOMA-IR、HOMA-βF比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

3討論

近年來(lái)，隨著對(duì)2型糖尿病發(fā)病機(jī)制的深入研究，針對(duì)不同的致病環(huán)節(jié)，新的治療2型糖尿病的藥物不斷涌現(xiàn)并逐漸廣泛應(yīng)用于臨床，其療效得到了證實(shí)。阿格列汀為最新上市的DPP-4抑制劑的代表藥物，是通過(guò)選擇性抑制二肽基肽酶-4，減少體內(nèi)GIP和GLP-1的失活，從而控制血糖[14]。在有效控制血糖的同時(shí)，阿格列汀亦有改善患者體重和LDL-C、HDL-C、TG的作用，特別是在TC的改善方面效果非常顯著[15]。格列美脲（亞莫利）作為第三代磺脲類口服降糖藥，其生理性——血糖依賴性促胰島素分泌，低血糖發(fā)生率低。確切的胰外增敏作用，有效改善胰島素抵抗，節(jié)約內(nèi)源性胰島素分泌[16]，對(duì)患者體重影響趨中，另其給藥方式為1次/d，患者依從性好，進(jìn)而被臨床上推廣應(yīng)用[17]。

雖然新藥層出不窮，目前尚沒(méi)有一種有效的藥物或手段能完全治愈2型糖尿病，臨床中往往多采用“階梯式療法”[18]，采用藥物聯(lián)合應(yīng)用方式來(lái)幫助患者控制血糖。本研究以2型糖尿病大鼠為研究模型，考察阿格列汀聯(lián)合格列美脲的降糖療效及對(duì)胰島β細(xì)胞功能的影響，結(jié)果表明：阿格列汀或格列美脲無(wú)論是單藥還是聯(lián)合用藥都能顯著降低2型糖尿病大鼠的血糖，改善TG、TC、胰島β細(xì)胞功能及胰島素抵抗，格列美脲單藥治療降糖效果優(yōu)于阿格列汀單藥治療，但TG、TC改善相對(duì)弱于阿格列汀組，二者聯(lián)合用藥效果優(yōu)于單藥治療。本研究以動(dòng)物模型為研究對(duì)象，為阿格列汀聯(lián)合格列美脲用于臨床治療2型糖尿病患者提供了參考依據(jù)。endprint

綜上所述，阿格列汀聯(lián)合格列美脲對(duì)2型糖尿病大鼠的降糖療效良好，值得臨床推廣應(yīng)用。

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（收稿日期：2017-09-04 本文編輯：孟慶卿）endprint