玉米蛋白粉混合物對血鸚鵡魚生化機能的影響

孫學亮，季延濱，尚東維，白東清，崔 培，華旭峰，尤宏爭，陳成勛

( 1.天津農學院 水產學院，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384；2.天津市寶坻區里自沽農場，天津 301809； 3.天津市水產研究所, 天津 300042 )

玉米蛋白粉混合物對血鸚鵡魚生化機能的影響

孫學亮1，季延濱1，尚東維2，白東清1，崔 培1，華旭峰1，尤宏爭3，陳成勛1

( 1.天津農學院 水產學院，天津市水產生態及養殖重點實驗室，天津 300384；2.天津市寶坻區里自沽農場，天津 301809； 3.天津市水產研究所, 天津 300042 )

(28±1) ℃水溫下，將體質量(8.75±0.88) g血鸚鵡魚飼養在300 cm×150 cm×80 cm的水泥池中，投喂含不同水平玉米蛋白、磷脂和維生素E混合物的飼料30 d，觀察血鸚鵡魚的生長、體色、抗氧化指標和肝功能。飼料中玉米蛋白粉按1‰(A1)、3‰(A2)、5‰(A3)的比例分別與磷脂1‰(a1)、3‰(a2)，維生素E 1‰(b1)、3‰(b2)混合。試驗結果表明，A1a1組中血鸚鵡魚體色亮度顯著高于對照組(P<0.05)，A2a2組和A3b1組中血鸚鵡魚黃度顯著高于對照組(P<0.05)。除A1a1組外，對照組肝臟中的類胡蘿卜素含量顯著低于其他組(P<0.05)。A1b1組血鸚鵡魚肌肉組織中類胡蘿卜素的含量顯著高于對照組(P<0.05)。A3b1組的相對質量增加率顯著高于其他組(P<0.05)。A3b1組血鸚鵡魚特定生長率最高，顯著高于除A3a1、A3a2、A3b2組外的其他各組(P<0.05)；A2b1和A2b2組血鸚鵡魚肝胰臟超氧化物歧化酶比活力顯著高于其他組(P<0.05)；A2b2組肝胰臟過氧化氫酶比活力顯著高于其他組(P<0.05)。A1a2、A2b1、A3a1組血鸚鵡魚肝胰臟丙二醛含量顯著高于對照組(P<0.05)。A3a1組血鸚鵡魚谷丙轉氨酶活性顯著高于對照組(P<0.05)。綜合考慮，含3‰～5‰的玉米蛋白粉和1‰～3‰維生素E飼料可促進血鸚鵡魚生長、調節體色、增強抗氧化和肝功能。

血鸚鵡魚；玉米蛋白粉；生長；體色；生理機能

血鸚鵡魚(Cichlasomacitrinellum×C.synspilum)，又名發財魚，是由紅魔鬼魚(C.citrinellum)的雄魚和紫紅火口魚(C.synspilum)的雌魚雜交所得的新品種，幼魚期體色灰白，成年魚體態臃腫，著色處理后體色呈血紅色或粉紅色，故名血鸚鵡魚[1]。

玉米蛋白粉含蛋白質60%以上，淀粉20%和約13%的纖維素、維生素A、谷氨酸等多種營養物質，還含有15種無機鹽以及玉米獨有的黃色素。它具有特殊的味道和色澤，是一種優良的飼用著色劑，資源優勢明顯，不含有毒有害物質，可直接作飼料蛋白原料[2-3]。維生素E是一種脂溶性維生素，其重要功能之一是抗氧化作用，能有效地防止機體脂肪過氧化及外因導致的氧化，保護細胞骨架、蛋白質巰基，維持細胞膜的正常功能[4]。磷脂是生物細胞的構成物質，也是生命的基礎物質之一。魚類飼料中的磷脂為卵磷脂，直接影響魚體攝入營養物質的消化利用，促進脂肪吸收和轉運[5]。

本試驗測定了血鸚鵡魚的著色指標及生化指標，探討不同比例的玉米蛋白、磷脂和維生素E飼料對血鸚鵡魚生長、著色和免疫功能的影響，以指導血鸚鵡魚健康飼料的配制。

1 材料與方法

1.1 材料

挑選體質健壯，規格一致，體質量(8.75±0.88) g，體長(3.3±0.5) cm的血鸚鵡魚，共520尾。

玉米蛋白粉：魯洲生物技術有限公司生產，水分≤12%，粗蛋白≥60%，粗脂肪≤5%，粗纖維≤3%，粗灰分≤2%。

磷脂：鶴喜園磷脂科技有限公司生產，含量≥95%。

維生素E：鄭州錦德化工食品添加劑貿易有限公司生產，含量為50%。

1.2 方法

1.2.1 飼養管理

在普通飼料的基礎上，噴灑以玉米蛋白粉為主要飼料，添加磷脂和維生素E的混合溶液。將玉米蛋白粉按1‰(A1)、3‰(A2)、5‰(A3)的比例分別與磷脂1‰(a1)、3‰(a2)和維生素E 1‰(b1)、3‰(b2)進行混合。設立空白對照組，共設13組。試驗魚養殖在300 cm×150 cm×80 cm水泥池中，20尾/池。水溫(28±1) ℃，pH 6.5～7.5，溶解氧8 mg/L。日投喂3次，日投喂量為魚體質量1%。養殖30 d，每日觀察、記錄魚的攝食、殘餌及死亡情況。

分別測量試驗前后血鸚鵡魚的體質量、體長。測量前擦干魚體表面水分，用濕布包裹魚體頭部，放置于電子秤上。按以下公式計算相對質量增加率和特定生長率：

相對質量增加率/%=(m2-m1)/m1×100%

特定生長率/%·d-1=[(lnm2-lnm1)]/(t2-t1)×100%

式中，m1、m2為t1、t2時刻的平均體質量(g)，t為養殖時間(d)。

1.2.2 指標的測定

血清和組織勻漿的制備：試驗結束時，每箱隨機抽取15尾魚，尾動脈采血，4 ℃、4500 r/min離心30 min，取血清備用。

取約200 mg的肝臟組織塊在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，用移液器加入9倍于組織塊質量的預冷勻漿介質(0.86%的生理鹽水)，在勻漿器中進行勻漿，用勻漿管在冰水中勻漿15 min，4 ℃、4500 r/min離心15 min，取上清液備用。

著色指標和類胡蘿卜素含量的測定：用色差分析儀分別測量血鸚鵡魚背部表皮的亮度(L)、紅度(a)、黃度(b)。測量前擦干魚體表的水分。樣品以丙酮—石油醚(1∶1體積比)混合溶劑反復萃取使類胡蘿卜素與其他成分分離，在450 nm波長條件下進行HPLC分析檢測，通過外標法計算各種類胡蘿卜素的含量。

抗氧化性能和肝功能的測定：用南京建成生物工程研究所生產的試劑盒測定超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、谷草轉氨酶、谷丙轉氨酶的活性及丙二醛的含量。

1.3 數據處理

數據用平均值±標準差表示，用Excel 2007及SPSS 13.0分析處理，用Excel軟件制圖表。

2 結果與分析

2.1 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚著色指標的影響

除對照組和A2b2組外，A3b2組中亮度顯著低于其他組(P<0.05)，對照組和A2b2組差異不顯著(P>0.05)；A1a1組中亮度顯著高于對照組(P<0.05)。試驗組中紅度均顯著低于對照組(P<0.05)。A2a2組和A3b1組中黃度顯著高于對照組(P<0.05)(表1)。

表1 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚著色指標的影響(平均值±標準差)

注：標相同字母的平均值間差異不顯著(P>0.05)，標不同字母的平均值間差異顯著(P<0.05)，下同.

2.2 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚組織中類胡蘿卜素含量的影響

除A1a1組外，對照組魚肝臟中類胡蘿卜素的含量顯著低于其他組(P<0.05)；肌肉中A1b1組的類胡蘿卜素含量顯著高于對照組(P<0.05)(表2)。

2.3 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚生長指標的影響

A3b1組魚的相對質量增加率最高，顯著高于其他組(P<0.05)；A3b1組魚特定生長率最高，顯著高于除A3a1、A3a2、A3b2組外的其他各組(P<0.05)(表3)。

2.4 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚抗氧化指標的影響

A1a1、A1a2和對照組魚肝胰臟中超氧化物歧化酶的比活力顯著低于其他組(P<0.05)，A2b1和A2b2組顯著高于其他組(P<0.05)；A2b2組魚肝胰臟過氧化氫酶比活力最大，顯著高于其他組(P<0.05)；A1a2、A2b1、A3a1組魚肝胰臟丙二醛含量顯著高于對照組(P<0.05)，其他組與對照組差異不顯著(P>0.05)(表4)。

表2 玉米蛋白混合物對組織中類胡蘿卜素含量的影響(平均值±標準差) mg/kg

表3 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚生長指標的影響(平均值±標準差)

表4 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚肝胰臟中抗氧化指標的影響(平均值±標準差)

2.5 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚肝功能指標的影響

各組間魚谷草轉氨酶活性均無顯著差異(P>0.05)；A3a1組谷丙轉氨酶顯著高于對照組(P<0.05)(表5)。

表5 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚肝功能指標的影響(平均值±標準差)

3 討 論

3.1 玉米蛋白粉混合物對血鸚鵡魚體色和類胡蘿卜素含量的影響

玉米蛋白粉具有特殊的味道和色澤，葉黃素含量高達90～180 mg/kg，是黃玉米的5倍以上，能有效地被吸收，使魚體呈金黃色，是優良的飼用著色劑。類胡蘿卜素是一類廣泛存在于高等植物中的烯萜類化合物，包括胡蘿卜素和葉黃素類，是高等植物、藻類和藍細菌光合膜的組成成分[6]。本試驗中，除對照組和A2b2組外，A3b2組中亮度顯著低于其他組(P<0.05)；紅度均顯著低于對照組(P<0.05)。除A1a1組外，對照組肝臟組織中的類胡蘿卜素含量顯著低于其他組(P<0.05)。A1b1組肌肉組織中類胡蘿卜素的含量顯著高于其他組(P<0.05)。玉米蛋白粉在魚體內代謝為蝦青素，使體色更為鮮艷。程云生等[7]研究結果表明，紅辣椒粉、螺旋藻、玉米蛋白粉3種著色劑混合投喂，著色效果顯著優于各最佳單組。向梟等[8]認為，當魚類從飼料中吸收類胡蘿卜素后，一部分類胡蘿卜素在魚體內轉化為維生素 A，作為營養物質被魚體利用或直接、間接地參與孕酮的生成，另一部分類胡蘿卜素則在魚蝦皮層、肌肉和外殼等處沉積，改變了魚蝦的色澤。韓學哲[9]認為，類胡蘿卜素對魚體的著色作用與其被吸收、沉積的量以及其被代謝損失的量相關。當餌料中類胡蘿卜素含量較低時，其在消化吸收過程中可能被氧化代謝掉，起不到著色效果; 當類胡蘿卜素含量過高時，脂蛋白載體或其受體可能被飽和而受到抑制。類胡蘿卜素的添加量最適時才能達到最佳著色效果。

3.2 玉米蛋白混合物對血鸚鵡魚生長指標的影響

血鸚鵡魚是肉食性為主的雜食性魚類，為觀賞需要，保持圓潤的體態尤為重要，因此飼料中動物蛋白和脂肪的含量要求較高。玉米蛋白粉中脂肪含量遠高于豆餅類。本試驗顯示，A3b1組試驗魚相對質量增加率最高，顯著高于其他組(P<0.05)；特定生長率最高，顯著高于除A3a1、A3a2、A3b2組外的其他各組。本試驗表明飼料中添加3%玉米蛋白粉有效提高了血鸚鵡魚的生長率，有利于飼用蛋白質、脂肪資源的開發利用。玉米蛋白粉添加量過高會抑制魚類生長，朱磊等[10]研究發現，在黃顙魚(Pelteobagrusfulvidraco)擠壓膨化飼料中可以使用6%的玉米蛋白粉，能夠維持黃顙魚的正常生產性能和正常生理功能，隨著玉米蛋白粉用量的增加，飼料系數呈增高的趨勢，特定生長率呈降低的趨勢，蛋白質沉積率也有下降趨勢。

3.3 玉米蛋白粉混合物對血鸚鵡魚抗氧化能力的影響

超氧化物歧化酶能消除生物體新陳代謝過程中產生的有害物質[11]。清除生物體內自由基的首要物質就是超氧化物歧化酶，它可對抗與阻斷因氧自由基對細胞造成的損害，及時修復受損細胞，復原因自由基造成的對細胞的傷害。過氧化氫酶存在于紅細胞及某些組織內的過氧化體中，催化H2O2分解為H2O與O2，使得H2O2不致于與O2在鐵螯合物作用下反應生成有害的-OH。丙二醛是脂質過氧化反應中的降解產物，脂質過氧化作用不僅將活性氧轉化成活性化學劑，即非自由基性的質類分解產物，而且通過鏈式或鏈式支鏈反應，放大活性氧的作用。

本試驗表明，A1a1、A1a2和對照組魚肝胰臟超氧化物岐化酶比活力顯著低于其他組(P<0.05)，A2b1和A2b2顯著高于其他組(P<0.05)。維生素E作為體脂的主要抗氧化劑，可保護體細胞免受自由基的破壞，并使細胞膜維持正常功能。本試驗在基礎飼料中添加3‰玉米蛋白粉和1‰～3‰維生素E，有助于提高血鸚鵡魚肝胰臟超氧化物歧化酶的比活力。徐力等[12]研究表明，鏈長為2～6個氨基酸殘基的玉米肽，具有較好的類超氧化物歧化酶活性。本試驗中，A2b2組肝胰臟過氧化氫酶比活力最大，顯著高于其他組(P<0.05)；A1a2、A2b1、A3a1組肝胰臟丙二醇含量顯著高于對照組(P<0.05)，其他組與對照組差異不顯著(P>0.05)。在超氧化物歧化酶和過氧化氫酶的聯合作用下，丙二醛作為脂質過氧化反應中的降解產物，減少了因脂質過氧化物的分解產物引起細胞損傷。邢克智等[13]研究表明，適當添加維生素E可以提高點帶石斑魚(Epinephelusmalabaricus)的抗氧化能力。

3.4 玉米蛋白粉混合物對血鸚鵡魚部分肝功能的影響

血清中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活力的變化是反應肝功能正常與否的重要指標[14]。本試驗中血鸚鵡魚各組間肝功能指標谷草轉氨酶均無顯著差異(P>0.05)。A3a1組谷丙轉氨酶活性顯著高于對照組(P<0.05)。大量醫學試驗表明谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶是肝細胞受損最靈敏指標之一，血清中微量的轉氨酶活力即可表征肝功能己受到損傷[15]。正常情況下血清中的轉氨酶活性值很低;當組織中毒病變或受損組織范圍較大時，血清中的谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶含量會相應上升且活性也會相應增強[16]。陳權文等[17]研究發現，在飼料中添加玉米蛋白粉，中華絨螯蟹(Eriocheirsinensis)血清中谷丙轉氨酶和谷草轉氨酶活力顯著高于其他組，提示中華絨螯蟹的肝胰臟可能受到了損傷。因此，將玉米蛋白粉與磷脂和維生素E混合添加到飼料中，在一定程度上保持了肝功能水平的正常，對肝功能基本無顯著損傷。

4 結 論

綜合考慮，3‰～5‰的玉米蛋白粉和1‰～3‰的維生素E在促進血鸚鵡魚生長、體色、抗氧化和肝功能等方面具有較好效果。在血鸚鵡魚養殖中，可以使用這種比例的配合飼料，保證血鸚鵡魚生長速度，魚體健康，提高養殖產量，獲得健康且形態優美、圓潤、色澤鮮艷的血鸚鵡魚。

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EffectsofCornProteinMixtureonPhysiologicalFunctioninBloodParrotCichlasomasynspilum♀×C.citrinellum♂

SUN Xueliang1, JI Yanbin1,SHANG Dongwei2,BAI Dongqing1, CUI Pei1, HUA Xufeng1,YOU Hongzheng3, CHEN Chengxun1

( 1.Tianjin Key Laboratory of Aqua-ecology and Aquaculture, College of Fisheries, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China； 2. Tianjin Lizigu Farm, Tianjin 301809,China; 3. Tianjin Fisheries Research Institute, Tianjin 300042, China )

A 30 day feeding trail was conducted to study the effects of corn protein mixture on growth, body-color, antioxidant index and liver function in blood parrot (Cichlasomasynspilum♀×C.citrinellum♂) at water temperature of (28±1) ℃. Blood parrot with body weight of (8.75±0.88) g were reared in 300 cm×150 cm×80 cm cement tanks and fed to apparent satiation diets containing corn protein mixture at a rate of corn protein 1‰ (A1), 3‰ (A2) and 5‰(A3); phospholipid 1‰ (a1) and 3‰ (a2) and vitamin E 1‰(b1) and 3‰ (b2). The results showed that there was significantly higher brightness in body in A1a1group than that in the control group (P<0.05), and there was significantly higher yellow index in A2a2group and A3b1group than that in the control group (P<0.05) . The carotenoid content in the blood parrot was found to be significantly lower in the control group than in other groups (P<0.05) except for A1a1group. The blood parrot in A1b1group had significantly higher muscular carotenoid content than the fish in the control group did (P<0.05). There was significantly higher relative weight gain rate in the fish in A3b1than that in other groups (P<0.05), with the maximal specific growth rate, significantly higher than in the other groups except for A3a1, A3a2, and A3b2groups (P<0.05). Superoxide dismutase (SOD) activities in hepatopancreas were significantly higher in A2b1and A2b2groups than those in other groups (P<0.05), and catalase (CAT) activity in hepatopancreas was significantly higher in A2b2group than that in other groups (P<0.05). There were significantly higher MDA contents in hepatopancreas in A1a2, A2b1and A3a1groups than those in the control group (P<0.05). The blood parrot in A3a1group had significantly higher activity of glutamic-pyruvic transaminase (ALT) than the fish in the control group did (P<0.05). It is concluded that diet containing 3‰—5‰ of corn protein and 1‰—3‰ of vitamin E leads to improvement of good growth, body color, antioxidant and liver function.

blood parrot; corn protein; growth; body-color; physiological function

10.16378/j.cnki.1003-1111.2017.04.014

S965.8

A

1003-1111(2017)04-0488-05

2016-05-27；

2016-09-23.

國家星火計劃項目(2014GA610001)；天津市高等學校創新團隊基金資助項目(TD12-5018)；天津市科技支撐計劃項目(14ZCZDNC00010)；天津市科技計劃項目(14ZCDGNC00029)；天津市科技型中小企業創新項目(14ZXCXNC00058)；天津市應用基礎與前沿技術研究計劃(重點項目)(13JCZDJC29200).

孫學亮(1984—)，男，碩士；研究方向：水產養殖.E-mail：sunxueliang12345@163.com.通訊作者：陳成勛(1976—)，男，研究員；研究方向：水產養殖.E-mail：ccxnxy@163.com.