沙丁胺醇氣霧劑含量測定方法研究

2017-12-20 20:55:40王桂清

科學與財富 2017年29期

王桂清

摘要：目的：實驗人員通過采取高效液相色譜法來對沙丁胺醇氣霧劑里面存在的沙丁胺醇的含量進行檢測。方法：把辛烷基硅烷鍵合硅膠當作相應的填充劑，而且還需要從庚烷磺酸鈉溶液精確提取2.87g的庚烷磺酸鈉及其2.5g的磷酸二氫鉀，添加適量的水進行充分溶解，然后稀釋到大概1000ml的容量，這個時候實驗人員通過使用磷酸溶液（1→2）調節該pH值到3.65]-乙腈（78：22）當作相應的流動相；在實際檢測的波長是220nm。結果：在系統適用性進行的試驗中存在的沙丁胺醇以及硫酸特布他林有著較好的分離效果，并且在0.112～1.12μg濃度范圍里面，沙丁胺醇進樣量能夠和峰面積處于良好的狀態；得到的回收率是99.94%，RSD是1.40%；采取中間精密度進行試驗得到的RSD是1.25%；樣品溶液通常是在8小時的時候才能夠處于穩定的狀態；重復性RSD是0.34%；對于沙丁胺醇的定量來說，一般控制在8.43ng的范圍。結論：通過使用該方法有著較多的優勢，例如操作簡單，有著較強的準確性，能夠當作沙丁胺醇氣霧劑里面對沙丁胺醇的含量的一種測試手段，值得在未來的道路上得到大力的推廣。

關鍵詞：沙丁胺醇氣霧劑；沙丁胺醇；高效液相色譜法

顯而易見的是，沙丁胺醇氣霧劑當作我國相關藥典收藏的一種藥品，對于藥品存在的含量選擇的測定手段當作高效液相色譜法，然而因為其系統適用性得到的分離效果不明顯，這樣就需要實驗人員對含量測定手段做好了詳細的分析，并對含量的測定方法進行適當的調整。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀，泵：LC-10AT，檢測器：RID-10A，工作站：N2000雙通道色譜工作站。

1.2 試藥

沙丁胺醇對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號為100204-200702）；硫酸特布他林對照品（中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用，批號為100273-199701）；乙腈（色譜純），重蒸餾水，其余試劑為分析純。

2 方法和結果

2.1 色譜條件

用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以庚烷磺酸鈉溶液[取庚烷磺酸鈉2.87g與磷酸二氫鉀2.5g，加水溶解并稀釋至1000ml，用磷酸溶液（1→2）調節pH值至3.65]-乙腈（78：22）為流動相；檢測波長為220nm；進樣量20μl。

2.2 溶液制備

實驗人員對照品溶液進行制備的過程中，需要將沙丁胺醇對照品通過精密的方式進行提取，并且加流動相進行溶解并稀釋成每毫升大概為0.2mg的溶液。

實驗人員通過系統適用性實驗來對對照品存在的溶液進行制備，并通過精密的方式將硫酸特布他林對照品及其相關沙丁胺醇對照品存在的含量進行提取，加流動相進行溶解的過程中需要稀釋成每毫升大概為0.2mg的溶液。

在對供試品溶液進行制備的時候，實驗人員將含有沙丁胺醇氣霧劑樣品通過精密的方式提取了1瓶，采取撳壓噴射數次的手段放置到指定的容器中，采取精密的方式添加到流動相10ml，并且采取超聲的方式能夠促使沙丁胺醇得到充分的溶解，經過認真的過濾，提取濾液當作相應的供試品溶液。這個時候實驗人員將不含有沙丁胺醇的樣品進行提取，依據此種方法對陰性溶液進行制備。

2.3 測定方法

精密量取供試品溶液和對照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，見圖1～3。

3 方法學

3.1 檢測波長的確定

取沙丁胺醇對照品溶液，于190～400nm波長范圍內進行紫外掃描，在220nm有最大吸收，故確定檢測波長為220nm。

3.2 線性試驗

精密稱取沙丁胺醇對照品約14mg，置于50ml量瓶內，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻；分別精密吸取1.0，3.0，5.0，7.0，10.0ml置50ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。照《中國藥典2010年版二部》附錄“高效液相色譜法”，在220nm波長處，分別吸取20μl測定峰面積，以峰面積-濃度求回歸方程，計算相關系數。

線性方程為：y=16424.59909x+543.19457，相關系數r=0.99999。

3.3 回收率試驗

實驗人員采取精密的方法對不含有沙丁胺醇存在的陰性樣品9瓶的液體提取出來，并分別在鋁聽的側壁上面數字順著指定的位置鉆上適量的小孔，將其插入到相應的注射針頭中（禁止和液面減少接觸的機會），把已經氣化的拋射劑放入到具有50ml流動相中存在的100ml量瓶里面進行注入，等到拋射劑除盡以后，除了要把鋁蓋除去之外，實驗人員還需要對空瓶及其有關閥門零件通過流動相的方式洗滌幾次，并且每一次洗滌的數量是10ml，洗液并放置到指定的容器里面，編號為：實驗人員需要通過精密的方法將沙丁胺醇原料提取含量為22.4mg、28mg、33.6mg各有三份，使用到上面的100ml容量瓶里面，通過振搖的方法促使其可以得到充分的溶解，通過加流動相的方法稀釋到指定的位置，經過搖勻的方法，通過精密測量的方式提取5ml，放入到指定數量的量瓶中，通過采取加流動相的方法稀釋到指定的容量中，經過充分的搖勻，當作相應的供試品溶液。不僅僅如此，實驗人員采取精密的方法將沙丁胺醇對照品含量提取大概14mg，放置到指定的容器中，通過加流動相的方法進行溶解并達到指定的位置，采取精密的方式提取為5.0ml的溶液放入到50ml量瓶里面，采取流動相的方式稀釋到指定的位置，通過搖勻的方法當作相應的對照品溶液。這個時候實驗人員需要對上述供試品溶液及其對照品溶液進行了分析，提取20μl在220nm波長階段對產生的定峰面積進行了詳細的檢測，分別對沙丁胺醇含有的回收量及其回收率進行分別的預算。經過實驗得到的結果平均回收率大概在100.2%、99.9%、100.1%，而RSD是0.34%。

3.4 中間精密度試驗

取同一批沙丁胺醇氣霧劑樣品，由不同分析人員于不同時間按上法測定含量，RSD為0.49%；小于3.0%。

3.5 溶液穩定性試驗

取沙丁胺醇氣霧劑按上法制備樣品溶液，分別于0、3、6、9、12小時進樣，記錄苦參堿峰面積，RSD為1.28%，小于3.0%，樣品溶液在12小時內穩定。

3.6 重復性

取沙丁胺醇氣霧劑，分別按上法制備樣品溶液六份，測定沙丁胺醇的含量，結果含量分別為98.0%、98.3%、99.0%、98.7%、97.7%、97.6%，平均回收率為98.2%，RSD為0.58%。

3.7 定量限

取線性試驗最低濃度的樣品溶液繼續稀釋，照《中國藥典2010年版二部》附錄“高效液相色譜法”在220nm波長處測定。以信噪比10：1的相應濃度為定量限，結果，定量限為8.43ng。

4 樣品含量測定

用上述確定的方法對3批沙丁胺醇氣霧劑樣品進行含量測定，結果如下：

5 討論

該法能夠準確而有效的測定沙丁胺醇氣霧劑的含量，能夠有效的控制產品質量。