老年陰道感染患者的細菌分布及耐藥性分析

李春霞，伍輝，熊麗，畢珺（1.武漢市武昌醫院婦產科，武漢430063；.武漢市紅十字會醫院婦產科，武漢 430015）

·臨床藥學與研究·

老年陰道感染患者的細菌分布及耐藥性分析

李春霞1＊，伍輝1#a，熊麗1#b，畢珺2（1.武漢市武昌醫院婦產科，武漢430063；2.武漢市紅十字會醫院婦產科，武漢 430015）

目的：為指導老年患者陰道感染治療方案的制訂提供參考。方法：選取2014年6月－2016年10月武漢市武昌醫院（以下簡稱“我院”）老年陰道感染患者200例，對其陰道側壁分泌物進行白帶常規檢查以及細菌培養、鑒定、藥敏試驗，比較各年齡段患者陰道感染性疾病的發生情況，觀察其細菌分布、清潔度分級和細菌耐藥情況。結果：200例患者的陰道感染性疾病類型包括假絲酵母菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎、細菌性陰道炎、非特異性陰道炎。其中，66～70歲患者陰道感染性疾病的總發生率顯著高于60～65歲和71～80歲患者，60～65歲患者陰道感染性疾病的總發生率也顯著高于71～80歲患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。共檢出細菌205株，除大腸埃希菌外，其余大部分均為革蘭氏陽性菌。檢出細菌以鏈球菌屬最為常見，共76株（占37.07%）；其次為葡萄菌屬，共48株（占23.41%）。陰道分泌物清潔度為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ度的患者分別有10、70、90、30例，且細菌的檢出量隨陰道分泌物清潔度的升高而增多，其中Ⅲ～Ⅳ度患者以鏈球菌屬和葡萄球菌屬感染更為多見。主要細菌對青霉素、慶大霉素、紅霉素的耐藥率普遍較高，大部分細菌對替考拉寧、利奈唑胺的耐藥率較低，均對萬古霉素敏感（耐藥率均為0）。結論：我院老年陰道感染性疾病類型較多，且好發于66～70歲患者；檢出細菌以革蘭氏陽性菌為主，且以鏈球菌屬細菌居多；對檢出菌株較為敏感的藥物包括萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺等。臨床應根據藥敏試驗合理選擇抗菌藥物。

陰道感染；老年患者；清潔度；細菌；耐藥性

陰道感染是臨床婦科常見多發病，感染種類多、流行面廣，發病病例約占婦科門診患者的30%，嚴重危害女性身心健康，已成為公共衛生問題[1-2]。常見陰道感染類型包括霉菌性、滴蟲性、老年性和細菌性感染，以外陰不適、白帶異常等臨床表現最為多見[3]。陰道內有多種病原體寄居，并形成陰道微生物群，在正常生態平衡下并不致病，然而平衡一旦被打破，將會引發各種感染性陰道疾病，而老年患者因其自身免疫力下降，更易出現各種病原菌的大量繁殖[4]。目前，臨床對該病的治療以抗菌藥物為主，但近年來隨著抗菌藥物的濫用，病原菌耐藥率呈逐年增長的趨勢，給臨床治療帶來新的挑戰[5]。因此，為全面了解老年陰道感染患者病原菌的分布及耐藥情況，筆者對武漢市武昌醫院（以下簡稱“我院”）老年陰道感染患者的陰道分泌物進行了細菌培養、鑒定及藥敏試驗，以期為指導臨床治療方案的制訂提供參考。

1 資料與方法

1.1 研究對象

選擇2014年6月－2016年10月我院收治的老年陰道感染患者作為研究對象。納入標準：（1）年齡≥60歲；（2）對本研究知情并自愿簽署知情同意書；（3）未合并其他嚴重婦科疾病。排除標準：（1）納入研究前3個月內使用過陰道感染治療藥物及抗菌藥物者；（2）納入研究前使用過激素類藥物及其他免疫抑制劑者；（3）合并嚴重婦科腫瘤者；（4）合并心、肝、腎等重要臟器功能障礙者。

本研究共納入老年陰道感染患者200例，年齡60～80歲，平均年齡（76.35±2.69）歲；病程1～5年，平均病程（3.10±1.21）年。其中，陰道瘙癢192例、白帶異常190例、尿頻尿急125例。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 參照《全國臨床檢驗操作規程》（第4版）[6]相關規定采集患者陰道上側壁1/3處分泌物并送檢，行白帶常規檢查以及細菌分離、鑒定、藥敏試驗。1.2.2 檢查方法 ①采用胺試驗法、濕片法和革蘭染色法聯合鏡檢進行陰道分泌物檢測，以判斷患者陰道感染性疾病的類型[1]。②將分泌物置于含無菌生理鹽水的試管中，采用婦科白帶涂片多功能染色液（福建三明貝真生物科技有限公司）檢測患者陰道內細菌及清潔度狀況，并于YYS-100型雙目倒置金相顯微鏡（上海復興埃科公司）下對陰道分泌物進行實驗室鏡檢（最大放大倍數為3萬倍，分辨率為0.22 μm），觀察細菌類型及數量。③采用無菌棉試紙收集陰道上側壁約2 cm處的單層柱狀上皮細胞，置于無菌試管中，進行細菌培養與鑒定[6-7]。將標本迅速接種于麥康凱培養基（鄭州安圖生物工程股份有限公司）中（接種操作在30 min內完成），于37℃下孵育24 h，進行厭/需氧菌和淋球菌培養。采用VITEK2-Compact型全自動微生物分析儀（含配套鑒定卡，法國生物梅里埃公司）進行鑒定，采用快速革蘭氏染色液（珠海貝索生物技術有限公司）確定細菌種類。④采用紙片擴散（Kirby-Bauer，K-B）法進行藥敏試驗：配制0.5麥氏濁度單位的菌懸液，用無菌棉簽均勻涂布在M-H瓊脂平板（上海恒遠生物科技有限公司）上，于無菌間放置約5 min后，將藥敏卡貼在平板表面，于35℃下孵育約20 h，采用ATB-Expression型半自動細菌鑒定和藥敏分析儀（含配套藥敏卡，法國生物梅里埃公司）自動讀取藥敏結果，所有操作均嚴格按照儀器說明書進行。藥敏試驗結果評價參照美國臨床和實驗室標準協會（CLSI）和K-B法抗菌藥物敏感試驗標準（WS/T125-1999）[8]。

1.3 觀察指標

（1）將所有患者分為60～65、66～70、71～80歲3個年齡段，觀察不同年齡段患者陰道感染性疾病的分布情況。（2）觀察患者陰道細菌的分布情況。（3）評價患者陰道分泌物清潔度，分析細菌與清潔度的分布情況。陰道分泌物清潔度分級標準[9]——Ⅰ度：陰道多為正常菌群，未見病原菌，上皮細胞充滿視野，膿細胞或白細胞0～5/Hp；Ⅱ度：陰道無病原菌，視野內可見較多的上皮細胞，膿細胞或白細胞5～15/Hp；Ⅲ度：陰道病原菌較少，視野內上皮細胞較少，膿細胞或白細胞15～30/Hp；Ⅳ度：陰道病原菌較多，視野內無上皮細胞，膿細胞或白細胞＞30/Hp。（4）觀察患者陰道細菌的耐藥情況。

1.4 數據處理

采用WHONET 5.6軟件對藥敏試驗結果進行分析處理，應用Excel 2007錄入數據，采用SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析。計數資料以株數或率表示，組間比較采用χ2檢驗；計量資料以x±s表示，組間比較采用F檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡段患者陰道感染性疾病分布情況

200例患者陰道感染性疾病的類型包括假絲酵母菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎、細菌性陰道炎、非特異性陰道炎。各年齡段患者陰道感染性疾病的總發生率比較，差異有統計學意義（χ2＝151.935，P＜0.05）；不同年齡段患者陰道感染性疾病的總發生率由高到低依次為66～70、60～65、71～80歲，兩兩比較差異均有統計學意義[χ2（60～65歲vs.66～70歲）＝64.523、χ2（60～65歲vs.71～80歲）＝19.073、χ2（66～70歲vs.71～80歲）＝136.571，P＜0.05]，詳見表1。

表1 不同年齡段患者陰道感染性疾病分布情況[例（%%）]Tab 1 Distribution of vaginal infectious diseases among different age groups[case（%%）]

2.2 陰道感染患者細菌的分布狀況

共檢出細菌205株，其中以鏈球菌屬最為常見，共76株（占37.07%）；葡萄球菌屬次之，共48株（占23.41%）；除大腸埃希菌外，其余大部分均為革蘭氏陽性菌，詳見表2。

表2 陰道感染細菌的分布狀況Tab 2 Distribution of vaginal bacteria

2.3 細菌與清潔度的分布情況

200例患者中，陰道分泌物清潔度為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ度者分別有10、70、90、30例，且葡萄球菌屬、鏈球菌屬、棒狀桿菌屬等細菌的檢出量隨陰道分泌物清潔度等級的升高而增多，其中Ⅲ～Ⅳ度清潔度患者以鏈球菌屬和葡萄球菌屬細菌感染更為多見，詳見表3。

表3 細菌與清潔度的分布情況[株（%%）]Tab 3 Distribution of bacteria and cleanliness[strain（%%）]

2.4 主要細菌的耐藥情況

老年陰道患者的主要細菌即金黃色葡萄球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、陰道棒桿菌、大腸埃希菌、溶組織梭菌、產氣莢膜桿菌對常用抗菌藥物的耐藥情況各有差異。上述細菌對青霉素的耐藥率分別為13.16%、2.86%、20.00%、35.71%、33.33%、45.00%、37.50%，對慶大霉素的耐藥率分別為13.16%、5.71%、16.00%、42.86%、36.67%、40.00%、50.00%，對紅霉素的耐藥率分別為52.63%、14.29%、8.00%、7.14%、13.33%、5.00%、12.50%，耐藥率普遍較高；上述細菌均對萬古霉素敏感（耐藥率均為0）；金黃色葡萄球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血型鏈球菌、大腸埃希菌、溶組織梭菌、產氣莢膜桿菌對替考拉寧敏感（耐藥率均為0）；陰道棒狀桿菌、大腸埃希菌、溶組織梭菌、產氣莢膜桿菌對利奈唑胺均敏感（耐藥率均為0），詳見表4。

表4 老年陰道感染患者主要細菌對常用抗菌藥物的耐藥情況[株（%%）]Tab 4 Drug resistance of main bacteria in elderly patients with vaginal infection to commonly used antibiotics[strain（%%）]

3 討論

隨著現代生活節奏的加快，女性生殖系統感染性疾病的發生率日趨升高，已成為世界范圍內的公共衛生問題[10]。正常情況下，女性陰道具有較好的自凈能力，其中包含由20多種微生物構成的正常菌群，與雌激素在維持陰道生態平衡中共同發揮著重要的作用[11]。目前，由陰道微生物菌群、局部解剖結構、免疫功能和內分泌調節系統共同構成女性陰道微生態系統已成為共識[12]。老年女性絕經后，體內性激素水平明顯降低，自身免疫功能明顯下降，同時伴有卵巢功能衰退，導致陰道內環境發生改變，易受到病原菌侵襲，從而引發各類陰道感染性疾病[13]。故全面了解老年女性生殖健康問題，及時為其進行婦科檢查及對癥治療對提高其晚年生活質量有著重要的臨床意義。同時，由于廣譜抗菌藥物的廣泛應用，經驗性用藥劑量及頻次的增加，使得老年陰道感染患者病原菌的耐藥現象日益嚴重[14]。因此，合理選擇敏感性抗菌藥物已成為臨床關注的焦點。

陰道分泌物檢查是婦科常見實驗室檢查項目，是監測女性生殖道感染的病原菌分布及耐藥情況的重要手段。200例患者陰道感染性疾病的類型包括假絲酵母菌性陰道炎、滴蟲性陰道炎、細菌性陰道炎、非特異性陰道炎，且66～70歲患者陰道感染性疾病的總發生率顯著高于60～65歲患者（P＜0.05）。其原因可能為：隨著患者年齡的增長，機體雌激素水平明顯降低，卵巢功能及免疫功能也隨之下降，因而更易受到病原菌的侵襲；此外，66～70歲患者陰道感染性疾病的總發生率亦顯著高于71～80歲患者（P＜0.05），可能與后者陰道內環境逐漸趨于穩定有關[15-16]。

同時，本研究通過采集老年陰道感染患者陰道分泌物，對其進行細菌培養、鑒定及藥敏試驗，分析我院老年陰道感染患者的細菌分布及耐藥情況。本研究共檢出細菌205株，其中除大腸埃希菌外，大部分菌株均為革蘭氏陽性菌，且以鏈球菌屬細菌的檢出量最多（76株，占37.07%），其次為葡萄球菌屬細菌（48株，占23.41%），此外還包括棒狀桿菌屬、大腸埃希菌、溶組織梭菌、產氣莢膜桿菌、奇異變形桿菌等。這表明我院老年陰道感染患者的細菌種類多樣，以革蘭氏陽性菌較為多見。

200例患者陰道分泌物清潔度以Ⅱ～Ⅲ度為主，分別為70、90例，且細菌的檢出量隨清潔度變差而增加。其中，陰道分泌物清潔度Ⅰ度患者常見的細菌以葡萄球菌屬、鏈球菌屬及大腸埃希菌為主；Ⅱ度以大腸埃希菌、鏈球菌屬、葡萄球菌屬為主；Ⅲ度以鏈球菌屬、葡萄球菌屬、大腸埃希菌屬和溶組織梭菌較為常見；而Ⅳ度則以鏈球菌屬、葡萄球菌屬、大腸埃希菌、棒桿菌屬和溶組織梭菌較為常見。陰道分泌物清潔度與卵巢功能、病原菌侵襲以及女性生理周期等因素緊密相關，當陰道感染的發生率升高時，病原菌大量繁殖，導致陰道分泌物清潔度變差[9]。因此，病原菌侵襲直接影響陰道分泌物清潔度，清潔度變差則預示著陰道感染性疾病發生的可能，與文獻[17]的觀點基本一致。

藥敏試驗結果顯示，本研究檢出的主要細菌對青霉素、慶大霉素、紅霉素的耐藥率普遍較高，對替考拉寧、利奈唑胺耐藥率較低，對萬古霉素耐藥率為0。青霉素耐藥的主要機制與菌株產生β-內酰胺酶使其水解滅活有關，慶大霉素的耐藥機制與修飾酶介導的耐藥有關，紅霉素的耐藥性主要與其藥物作用靶位的改變有關[18-20]。因此患者在進行對癥治療時，應高度重視陰道病原菌的鑒定及藥敏試驗，并根據試驗結果選用敏感性治療藥物，以有效減少耐藥菌株的產生[21-22]；而對于攜帶病原菌但無臨床癥狀的患者而言，更不應過度治療，否則會適得其反，致使陰道微生態平衡系統被破壞，細菌耐藥性增強[23]。

綜上所述，我院老年陰道感染性疾病類型較多，且好發于66～70歲患者；檢出細菌以革蘭氏陽性菌為主，且以鏈球菌屬細菌居多；對檢出菌株敏感的藥物包括萬古霉素、替考拉寧、利奈唑胺等。但本研究樣本量小，且未對真菌感染的情況進行分析，仍有待擴大樣本量進一步確證。

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Analysis of Distribution and Drug Resistance of Bacteria in Elderly Patients with Vaginal Infection

LI Chunxia1，WU Hui1，XIONG Li1，BI Jun2（1.Dept.of Obstetrics and Gynecology，Wuhan Wuchang Hospital，Wuhan 430063，China；2.Dept.of Obstetrics and Gynecology，Wuhan Red Cross Hospital，Wuhan 430015，China）

OBJECTIVE：To provide reference for the formulation of clinical therapy plan for elderly patients with vaginal infection.METHODS：From Jun.2014 to Oct.2016，200 elderly patients with vaginal infection were selected from Wuhan Wuchang Hospital（called our hospital for short）.Leucorrhea routine examination，bacterial culture，identification and drug sensitivity test were all performed for the secretions of vaginal side wall.The occurrence of vaginal infection was compared among different age groups.The distribution of bacteria，distribution of cleanliness and drug resistance were observed.RESULTS：The types of vaginal infectious diseases in 200 patients included Candida vaginitis，Trichomonas vaginitis，bacterial vaginitis，nonspecific vaginitis.The incidence of vaginal infection in 66-70 age group was significantly higher than 60-65 age group and 71-80 age group，the incidence of vaginal infection in 60-65 age group was significantly higher than 71-80 age group，with statistical significance（P＜0.05）.A total of 205 strains of bacteria were detected，most of which were Gram-positive bacteria，except for Escherichia coli.Streptococcus was the most common pathogen，with a total of 76 strains（37.07%），followed by Staphylococci（48 strains，23.41%）.The vaginal secretion cleanliness was gradeⅠ，Ⅱ，Ⅲ andⅣ respectively in 10，70，90，30 cases.The amount of bacteria increased with the increase of vaginal secretion cleanliness，and Streptococcus and Staphylococcus infection were the most common in patients withⅢ toⅣ degree.Resistance rate of bacteria to penicillin，gentamicin and erythromycin were relatively higher while most of them to teicoplanin and linezolid were relatively lower；they were all sensitive to vancomycin（resistance rate of 0）.CONCLUSIONS：There are many types of vaginal infectious diseases in our hospital，and most of them are 66-70 years old.The majority of bacteria were Gram-positive bacteria，most of them were Streptococcus.The drugs which are sensitive to pathogen include vancomycin，teicoplanin and linezolid.Antibiotics should be rationally selected according to drug sensitivity test.

Vaginal infection；Elderly patients；Cleanliness；Bacteria；Drug resistance

R711.73

A

1001-0408（2017）35-4928-04

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.35.09

＊主管護師。研究方向：婦產科護理。電話：027-51153557。E-mail：baobeizhu699@126.com

#通信作者a：副主任護師。研究方向：婦產科護理。電話：027-51153557。E-mail：tj88865@126.com

#通信作者b：主任醫師。研究方向：婦產科。電話：027-51153557。E-mail：fire356@163.com

2017-01-07

2017-09-08）

（編輯：張元媛）