[摘 要] 動物樣品采樣是實驗室檢驗程序中最為關鍵的一步,但因距離、運輸、采樣方法、保存等多種因素的影響導致樣品采樣存在一些問題,對實驗室檢驗結果產生一定的消極影響。因此,本文對動物樣品采樣方法及常見問題進行詳細的探討。
[關鍵詞] 動物樣品;采樣方法;常見問題
[中圖分類號] S851.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-7909(2017)04-65-2
動物樣品采樣方法包括采集前的準備工作、采樣實踐以及送驗、記錄等各個環節,以下先對日常需求下的準備工作進行說明,然后選取最為常見的血液與組織采樣作為實例加以討論,然后按照流程對送樣、記錄等做出全面介紹。
1 采樣方法
1.1 準備階段
動物樣品采樣前應對各種器具進行消毒處理,如刀、剪、鑷子、針管等,需要在開水中煮沸,以0.5 h為宜。然后在采樣前實施酒精燈火焰消毒或涂抹酒精消毒;對于相關的裝載樣品器皿,應進行高壓處理,可以選擇高壓103 kPa處理0.5 h;若條件不足可以進行干烤處理,以160 ℃為準,持續干烤2 h即可[1]。同時,應將所有的容器、器械全套擺放于安全盒內。然后根據實驗室檢驗需要,制定針對不同種類動物的樣品采集流程,包括部位選擇、采樣量、對應的放置器具等。
1.2 血液、組織采樣方法
1.2.1 血液采樣方法。其中包括部位的選取、采樣操作、保存。比如,通常按照要求對豬、兔進行耳靜脈采血,牛、羊、兔多實施頸靜脈采血,禽以翅靜脈為主。具體操作中,需要先對確定好的采血部位實施剔毛處理,并在清洗干凈之后,實施酒精消毒(75%)后進行血液采樣。一般對于動物血液的采樣多應用一次性注射器實施采集,要求先用三棱針進行穿刺,應用針管或塑料試管進行吸入,通常以直徑3~4 mm的試管吸入5 cm即可,要求存放時做好封口處理,并按照要求實施豎立插入樣品盒并進行保存。保存時考慮到時間、距離等而增加抗凝劑,以確保采樣血液的可用性。要求加入后進行搖勻處理(通常針對全血樣品)。至于血清樣品則以靜置為準,其中要求實施離心機離心后的血清析出,令血清與血凝塊分開放置。通常采樣車中會設置對應的保存箱可以保障溫度控制,在不出現反復凍融的情況下均可以滿足保存要求。
1.2.2 組織采樣。其中包括內臟、尿液、呼吸道、皮膚和腸內容物等各個方面的組織或組織液采集。比如死亡后的動物內臟采樣就需要及時采集,以保證病料的新鮮、預防污染。夏冬兩季的采集時間盡可能控制在2 h以內、6 h以內。若溫度過高,應確保在死亡后立即實施采樣處理,以確保相關的組織檢驗有效性。從采樣經驗可知,在內臟組織塊的采樣方面,通常選用1~2 cm2的切塊即可。按照采樣流程需要做好消毒、組織切塊、消毒容器放置、保存。由于組織采樣會應用到各種檢驗項目中,需進行多樣塊切塊處理,尤其應針對病理學實施病灶臨近組織采樣,并根據要求保存時置于福爾馬林溶液(10%),保存溫度控制在冷藏容器密閉下的常用溫度即可,但要求送檢速度要快,確保其由組織采樣到實驗室檢驗的時間最小化。對于尿液的采樣以一次性塑料杯接取即可,要求以動物排尿時的新鮮尿液為準;然后進行用量選擇,以試管吸取或直接將接尿杯置于保存盒內。至于呼吸道的樣品采集,則需要通過棉拭子對鼻腔、咽喉等可分泌部位進行蘸式取樣,完成采樣后立即置于5 mL滅菌肉湯、磷酸相加緩沖液內保存。至于皮膚以病變位為準進行采樣,腸內容物可以通過吸管穿孔吸取,要求將內容物置于甘油鹽水緩沖液(30%)中保存;也可以選擇剪取腸管扎緊后的內容物直接采樣。
2 常見問題
歸納總結動物樣品采樣的工作經驗以及對于日常易出現問題的發現,比較常見的采樣問題體現在采血后血清不見析出,可以通過斜面靜置2 h左右再離心處理即可析出,要求視溫度條件而定。另一個就是血清溶血現象、變質問題,可以通過嚴格操作確保此類問題的預防。比如送樣過程以24 h內為準,其中要求保持冷藏狀態,并避免破碎、傾倒、泄露、震蕩等,尤其要求按照采樣后的標簽標示做好記錄、備份,其中包括地址、號牌、樣品的飼養地、聯系方式、實驗情況、免疫情況、送檢時間、數量、臨床癥狀和用藥等各項資料[2]。
3 結語
在動物樣品采樣過程中需要做好采集前的準備工作,并根據不同動物樣品,不同實驗室檢驗需求實施針對動物類型的對應性采樣。由于現代化實驗室檢驗中要求檢驗動物的體液、組織、各種分泌物、腸內容物等。因此,應在采集中注重相應的采樣體系建設,并在不同類型下實施統籌化的程序化采樣,提高采樣品質,為進一步的檢驗工作做好準備。
參考文獻
[1]萬蓉,湯建國.常見動物疫病監測的采樣原則、方法及應注意的問題[J].養殖技術顧問,2015(10):91-92.
[2]呂趙芳,鄧文平,曹振芳,等.動物疫病監測采樣工作的幾點體會[J].農業技術與裝備,2013(15):53-54.