寧夏枸杞與黑果枸杞有效成分的比較研究

[摘 要] 本文研究分析寧夏枸杞和黑果枸杞中有效成分情況。利用索式提取法，溶劑為75%乙醇，料液比率為1∶15，時間為2.5 h，對黑果枸杞和寧夏枸杞中的總黃酮成分進行提取，使用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法在紫外分光光度計下于510 nm位置測量所提取液的吸光度值，之后對總黃酮水平進行計算并對比。利用DPPH方法對提取液中自由基活性進行研究。結(jié)果表明，寧夏枸杞中總黃酮水平為1.651%，而黑果枸杞中總黃酮水平為2.754%，同時2種枸杞都能夠有效地對DPPH進行清除，黑果枸杞的清除率為94.55%，比寧夏枸杞的清除率93.26%略高。黑果枸杞中有效成分總黃酮水平及對自由基的清除率均略高于寧夏枸杞。

[關(guān)鍵詞] 寧夏枸杞；黑果枸杞；總黃酮；自由基活性

[中圖分類號] TS255.1 [文獻標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-7909（2017）07-72-2

經(jīng)過藥理學(xué)家的不斷研究，發(fā)現(xiàn)枸杞中存在黃酮類物質(zhì)，這是枸杞內(nèi)一類重要的活性成分。有了黃酮類物質(zhì)的存在，自由基會被清除，自由基的過多或者人體自身自由基清除過慢，都會誘發(fā)疾病的產(chǎn)生，加速機體的衰老速度[1，2]。截至目前，許多研究都是圍繞枸杞中總黃酮的提取而展開的[3，4]。本次研究旨在為寧夏枸杞和黑果枸杞的開發(fā)利用提供參考價值，對寧夏枸杞和黑果枸杞中總黃酮進行測定，并輔以抗自由基活性作為對比數(shù)據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

永福元牌寧夏中寧枸杞，寧夏中寧清水河野生黑果枸杞；DPPH 1，1-二苯基-2-三基苯肼（純度>95%），NaOH、AL（NO3）3、NaNO2，75%乙醇，無水酒精。

1.2 試驗儀器

UV-1600紫外分光光度儀，萬分之一AEU-210電子分析天平，回流提取裝置，電熱套。

1.3 試驗方法

1.3.1 總黃酮的提取及含量測定

1.3.1.1 提取總黃酮含量。選取黑果枸杞與寧夏枸杞，用清水將其洗干凈，而后對其進行烘干處理，之后采取研磨方式將其粉碎，過40目篩，分別取10 g粉末放置于索式提取器具中，添加75%乙醇進行提取，按照1∶14的比例配置料液，提取2.5 h，并對提取液做減壓蒸餾處理，排除剩余的醇液，轉(zhuǎn)入至100 mL的容量瓶中，并加入同等濃度的乙醇，將其搖勻，提取3次，溶液備用。

1.3.1.2 測定總黃酮含量。提取1 mL黑果枸杞與寧夏枸杞的提取液，而后將其放置于50 mL容量瓶中，使用NaNO2-Al（NO3）3-NaOH比色法進行操作，取同等濃度的乙醇進行定容，在520 nm下進行吸光度的測定，依據(jù)線性回歸方程對黃酮濃度進行計算，相應(yīng)地根據(jù)稀釋倍數(shù)進行總黃酮含量的計算，計算公式如下：總黃酮含量=（C×50×0.1）/10×100%。其中，C代表提取液稀釋后總黃酮的濃度（g/L）；50代表稀釋的倍數(shù)；0.1代表提取液的總體積（L）；10代表枸杞子粉末的總質(zhì)量（g）。

1.3.2 測定寧夏枸杞和黑果枸杞DPPH自由基清除率

1.3.2.1 配制DPPH 溶液。稱量選取20 mg DPPH自由基，用甲醇對其進行溶解，而后放置于100 mL容量瓶中，甲醇定容，將其配置為DPPH的貯備液，并對其進行避光保存。按照1.8∶8.2的比例將甲醇溶液與DPPH貯備液配置成為DPPH工作液，并在515 nm位置對吸光度值A(chǔ)進行測定。

1.3.2.2 測定樣品溶液DPPH自由基的清除率。稱取20 μL黑果枸杞與寧夏枸杞的提取液，并將其放置于5 mL容量瓶中，用現(xiàn)配的DPPH工作液進行定容，而后在515 nm位置測定吸光度值B，進行3次平行測定。

2 寧夏枸杞與黑果枸杞有效成分對比

2.1 對比2種枸杞的總黃酮水平

經(jīng)過計算公式可得知，2種枸杞的總黃酮水平分別見表1和表2。

2.2 對比2種枸杞的自由基清除率

自由基清除率計算公式如下：自由基（DPPH）清除率=（A-B）/A×100%，具體結(jié)果見表3。

3 結(jié)論

黃酮類物質(zhì)本身具有對人體有利的藥理作用與生理功能，能夠提高免疫力、降脂降壓、抗衰老以及治療心腦血管疾病。本研究以蘆丁作為標(biāo)準(zhǔn)品，運用索式提取法提取總黃酮在寧夏枸杞和黑果枸杞中的含量。由結(jié)果可知，黑果枸杞總黃酮含量為2.754%，寧夏枸杞為1.651%，顯然前者高于后者，奠定了研究與利用黑果枸杞的重要理論基礎(chǔ)；DPPH自由基都能被黑果枸杞提取液和寧夏枸杞提取液有效清除，黑果枸杞提取物中DPPH清除率為94.55%，寧夏枸杞提取液中DPPH清除率為93.26%。對DPPH清除率的分析可知，黑果枸杞清除自由基能力較強，原因在于2種枸杞中的有效成分存在差異，因此對自由基的清除水平不同。

參考文獻

[1]閆亞美，戴國禮，冉林武，等.不同產(chǎn)地野生黑果枸杞資源果實多酚組成分析[J].中國農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（22）：4540-4550.

[2]閆亞美，羅青，冉林武，等.黑果枸杞功效研究進展及產(chǎn)業(yè)發(fā)展前景[J].寧夏農(nóng)林科技，2015（1）：21-24，57.

[3]薛定磊，曾少華，王瑛.黑果枸杞和寧夏枸杞FT（FloweringLocusT）基因的克隆及表達(dá)分析[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2015（3）：565-570.

[4]沈笑飛，劉永亮，王瑛，等.黑果枸杞和寧夏枸杞中黃酮醇合酶基因的克隆及表達(dá)分析[J].基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)，2014（3）：591-597.