桶裝水中疑似銅綠假單胞菌的分離鑒定

【摘 要】 銅綠假單胞菌是一種重要的水源性致病菌，廣泛存在于各類型水中，對消毒劑、干燥、紫外線燈梨花因素具有很強(qiáng)的體抗力，可引起急性腸道炎、腦膜炎、敗血癥和皮膚炎癥等疾病。近年來隨著桶裝水等商品化飲用水的逐漸普及，市場上各種品牌、各種類型桶裝水走進(jìn)了千家萬戶，隨之而來的桶裝水安全問題也日益突出，本文就中心開展的桶裝水水質(zhì)監(jiān)測工作，現(xiàn)將全自動(dòng)生化鑒定儀的結(jié)果分析介紹如下，以供參考。

【關(guān)鍵詞】 銅綠假單胞菌 桶裝水 全自動(dòng)生化鑒定儀

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2017.08.002

1 材料與方法

1.1 樣品來源

市場上流通的各品牌桶裝水（包括8份礦泉水、2份山泉水），樣品均在保質(zhì)期內(nèi)。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

0.45微米微孔過濾膜、CN平板（陸橋）、乙酰胺肉湯（陸橋）、生化鑒定試劑條（陸橋）、氧化酶試劑、金氏B培養(yǎng)基（陸橋）、GN卡（梅里埃）。

1.3 儀器設(shè)備

4聯(lián)不銹鋼過濾器、生化培養(yǎng)箱（上海一恒）、紫外線熒光觀察箱、全動(dòng)生化鑒定儀VITEKⅡ（梅里埃）。

1.4 檢測方法

《飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》GB 8538-2016。

2 檢驗(yàn)程序與結(jié)果

2.1 檢驗(yàn)過程

取250ml水樣在微孔徑0.45μm的濾膜上過濾，將濾膜放在CN瓊脂培養(yǎng)基上36℃培養(yǎng)48小時(shí)，觀察CN平板沒有藍(lán)色或綠色的菌落，在紫外燈下觀察培養(yǎng)后的CN平板，有帶有熒光的可疑菌落，將帶有熒光的菌落進(jìn)行乙酰胺肉湯確證性試驗(yàn)，將其他紅褐色不發(fā)熒光的菌落進(jìn)行氧化酶，金氏B培養(yǎng)基確證性試驗(yàn)，將CN上的可疑菌落劃線接種營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基36℃培養(yǎng)24小時(shí)，將純培養(yǎng)物接種到乙酰胺肉湯的試管中，36℃培養(yǎng)24小時(shí)，向每支試管加入1-2滴納氏試劑，顏色從深黃色變?yōu)榇u紅色，氧化酶驗(yàn)證為陽性，在金氏B培養(yǎng)基上的菌落不產(chǎn)熒光，生化鑒定試劑條鑒定結(jié)果疑似銅綠假單胞菌，將純培養(yǎng)物加到GN卡中上全自動(dòng)生化鑒定儀VITEKⅡ檢測。詳見圖1。

2.2 結(jié)果

通過全自動(dòng)生化鑒定儀VITEKⅡ進(jìn)一步鑒定，在采集的10份樣品中其中的一份山泉水中最終得出結(jié)果為少動(dòng)鞘氨醇桿菌。

3 結(jié)果分析

（1）通過該實(shí)驗(yàn)，讓我們了解銅綠假單胞菌和少動(dòng)鞘氨醇桿菌的相似之處和一些容易混淆的生化結(jié)果，應(yīng)引起注意。

（2）通過手動(dòng)生化試劑條和全自動(dòng)生化鑒定儀的結(jié)果比較分析，儀器的鑒定要好于手工法。

4 總結(jié)

綜上所述，要做好飲用水中銅綠假單胞檢測工作，關(guān)鍵是做好如下工作：

（1）純菌落的選取要準(zhǔn)確。

（2）實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制要嚴(yán)格，避免交叉污染。

（3）生化鑒定結(jié)果可選擇多種方式平行實(shí)驗(yàn)，避免漏檢和誤檢的可能。

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作者簡介

王昳慧，大專學(xué)歷，檢驗(yàn)師，于本溪市食品檢驗(yàn)檢測中心從事食品檢驗(yàn)工作。

呂厚明，本科學(xué)歷，主管檢驗(yàn)師，于本溪市食品檢驗(yàn)檢測中心從事食品檢驗(yàn)工作。