枯草芽孢桿菌對肉雞小腸黏膜組織形態結構的影響

摘 要：本試驗旨在探討枯草芽孢桿菌對肉雞小腸形態參數的影響，為枯草芽孢桿菌在肉雞生產中的應用提供參考依據。試驗選取200羽1日齡健康的AA肉雞，隨機分為4組，每組5個重復，每個重復10羽。A組（對照組）飼喂基礎日糧，B、C、D組為試驗組，分別在基礎日糧中添加0.05%、0.10%、0.15%的枯草芽孢桿菌制劑（活菌數為1010 CFU/g）。試驗期為42 d。試驗結果顯示：（1）各試驗組小腸的黏膜結構都比對照組完整；（2）各試驗組的小腸各段絨毛高度、絨毛高度與隱窩深度比值 （the Ratio of Villus Height to Crypt Depth，V/C值）、黏膜厚度及肌層厚度均高于對照組；（3）對照組V/C值由十二指腸向回腸逐漸減小，而各試驗組V/C值，十二指腸的最大，其次是空腸，回腸的最小。以上結果表明：添加劑枯草芽孢桿菌均可不同程度地改善肉雞小腸的黏膜結構，并且枯草芽孢桿菌添加量為0.15%時效果較好。

關鍵詞：枯草芽孢桿菌；肉雞；小腸；黏膜形態

中圖分類號：S816.79 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2017）08-0075-03

本試驗通過研究在肉雞的飼料中添加不同劑量的枯草芽孢桿菌，采用組織學技術研究枯草芽孢桿菌對肉雞小腸黏膜結構的影響，為枯草芽孢桿菌在飼料中的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料

禽用枯草芽孢桿菌制劑由新疆石河子大學雙富畜牧有限公司提供，制劑中含有枯草芽孢桿菌活菌數為不少于108 CFU/g。

1.2 試驗設計與日糧

試驗在甘州區某雞場，選取200羽1日齡健康的AA肉雞，隨機分為4個處理組，每組5個重復，每個重復10羽。A組（對照組）飼喂基礎日糧，B、C、D為試驗組，分別在基礎日糧中添加0.05%、0.10%、0.15%的枯草芽孢桿菌制劑。

1.3 試驗用肉雞飼養管理

本實驗按照平時飼養管理技術操作，時間為42 d，試驗雞采用網上平養，飼養管理和疫病防控均按照該場制度規定，按育雛正常溫度進行。

1.4 樣本采集

42 d時，隨機抽取各組體重相近的肉雞5羽，放血致死，用手術器械按照解剖程序剖開腹腔，分別采集十二指腸、空腸和回腸中段各5 cm，用生理鹽水沖洗，置入4%多聚甲醛磷酸緩沖液（0.1 mol/L，pH 7.4）中固定48 h。

1.5 組織切片

將上述處理好的樣本組織切片，然后將固定好的切片水洗 、脫水、透明（二甲苯處理）、浸蠟（讓石蠟滲透到組織中）、包埋、切片、HE染色、封固等步驟，制成染色的組織切片，切片厚7 μm。

1.6測定指標

每羽AA肉雞的十二指腸、空腸和回腸各腸段選取5張切片（每隔5張切片取1張，HE染色，應用Moditec照相處理軟件），每張切片選取5個完整走向平直的最長腸絨毛，測量絨毛高度和隱窩深度，然后計算絨毛高度與隱窩深度的比值（the Ratio of Villus Height to Crypt Depth，V/C值），各指標取平均數作為測定數據。

1.7 數據處理與分析

采用SPSS 15.0數據統計軟件進行方差分析，采用LSD法進行各組之間的多重比較。本實驗結果以平均值±標準差表示。

2 結果

2.1 枯草芽孢桿菌制劑對十二指腸形態的影響

由表1可以看出，D組的十二指腸絨毛高度顯著高于A組（P<0.05），而B、C組與A組差異不顯著（P>0.05），D組顯著高于B組和C組（P<0.05）。

D組的十二指腸V/C值顯著高于A組（P<0.05），B、C組與A組差異不顯著（P>0.05），D組顯著高于B組和C組（P<0.05）。D組的十二指腸黏膜厚度和肌層厚度都顯著高于A組（P<0.05），B、C組與A組差異不顯著（P>0.05），D組顯著高于B組和C組（P<0.05）。

2.2 枯草芽孢桿菌制劑對空腸形態的影響

由表2可以看出，所有試驗組的空腸絨毛高度均顯著高于A組（P<0.05），其中D組的值最大。

所有試驗組的空腸V/C值均顯著高于A組（P<0.05），其中D組的V/C值最大。所有試驗組的空腸黏膜厚度均顯著高于A組（P<0.05），其中D組的值最大。所有試驗組的空腸肌層厚度均顯著高于A組（P<0.05），其中D組的值最大。

2.3 枯草芽孢桿菌制劑對回腸形態的影響

由表3可以看出，D組的回腸絨毛高度顯著高于A組（P<0.05），B組和C組與A組差異不顯著（P>0.05），D組顯著高于B組和C組（P<0.05）。

B、C、D組的回腸V/C值均顯著高于A組（P<0.05），其中D組的V/C值最大。D組的回腸黏膜厚度顯著高于A組（P<0.05），B組和C組與A組差異不顯著（P>0.05），D組顯著高于B組和C組（P<0.05）。B、C、D組的回腸肌層厚度均顯著高于A組（P<0.05），其中D組的值最大。

3 討論

動物小腸黏膜組織結構與功能狀態是決定營養物質消化吸收的關鍵，肉雞也是如此。小腸黏膜絨毛高度與成熟細胞數量呈正相關，當黏膜絨毛較短時，成熟細胞一般會減少，營養物質吸收能力低。而小腸絨毛基部的隱窩深度與細胞的生成率相關，當黏膜隱窩深度較淺時，腸上皮細胞成熟率增加，各種消化液的分泌會上升。V/C值能夠反映小腸黏膜消化吸收功能是否良好。V/C值下降，表示黏膜機能狀況受損或衰弱，消化吸收功能下降，雞會出現生長發育不良，抗病能力差，甚至影響養殖效益；V/C值升高，則表示黏膜機能改善，消化吸收功能增強，生長發育加快，這將帶來事半功倍的好結果。B、C和D組與A組相比，小腸黏膜絨毛高度增加顯著，腸黏膜隱窩深度變淺。實驗證明，枯草芽孢桿菌有益于保護和提高腸絨毛高度，顯著提高V/C值，這樣可以增加腸黏膜與食糜接觸面積，加強養分的吸收利用效率。

4 結論

該實驗證明，枯草芽孢桿菌可明顯促進各段小腸黏膜絨毛的生長發育，改善消化道黏膜形態與結構，進而增加肉雞消化吸收能力，促進生長發育，為養殖戶帶來良好的經濟效益。本試驗研究表明枯草芽孢桿菌在肉雞日糧中的適宜添加劑量為0.15%。