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傳統煎煮與機器煎煮橫向比較

2018-01-03 09:45:56滕建良潘懿
醫藥前沿 2018年1期
關鍵詞:實驗

滕建良 潘懿

(1上海市寶山區中西醫結合醫院 上海 201999)

(2上海市寶山區華山北院寶山分院藥劑科 上海 200431)

前言

中藥湯劑在中醫藥領域是應用最早、最廣泛的一種制劑,其操作簡單、藥效顯著、起效迅速,尤其是其在臨床應用中可以辯證實施,隨癥加減配伍藥物的特點受到廣大醫患的信賴。

隨著社會不斷向現代化發展,現代化技術也不斷融入到傳統中醫藥領域,中藥飲片煎煮機是上世紀80年代初由韓國研制成功,于90年代中期進入中國市場[1],至此傳統煎煮與機器煎煮就產生了諸多分歧,一部分學者認為傳統煎煮優于機器煎煮[2-3],另外一部分學者則持相反態度[4-5]。傳統方法用砂鍋煎煮,講究文火、武火調度,武火,又稱烈火、大火等,其火勢急,火力猛,溫度上升快,水分蒸發快;文火,又稱微火、小火等,其火勢緩,火力弱,溫度變化不大,水分蒸發慢[6]。現代研究表明文火所屬溫度范圍為:120~150℃,武火所屬溫度范圍為:180~200℃。

表1 傳統煎煮和機器煎煮的對比

目前國內在煎出率研究上,大多都是以著名方劑為代表,對比傳統煎煮與機器煎煮飲片煎出藥液的比例,從而確定兩種方法的優劣。首先在四君子湯煎出率方面的研究中一部分研究結果證明飲片傳統煎煮與機器煎煮并無區別,傳統煎煮與機器煎煮在結果上無明顯差異,不具備統計學意義,因而四君子湯的機器煎煮與傳統煎煮在煎出率上沒有區別[7];而另外一部分在實驗中得出了傳統煎煮優于機器煎煮的結論,傳統組不僅在水溶性煎出物含量上高于機器組,而且在煎出率上依然高于機器組,結果具有統計學意義[8]。

在對四君子湯的療效研究中以方劑香砂養胃丸為陽性對照組,將四君子湯分為傳統煎煮湯劑、常壓煎煮湯劑、高壓煎煮湯劑三組進行實驗,得出三種煎方法得到的四君子湯對動物脾虛的療效無顯著性差異[9]。將大鼠分為空白組、傳統高、中、低組、煎藥機高、中、低組七組,療效定量實驗傳統煎煮高組優于機器煎煮高組;傳統煎煮中、低組與機器煎煮中、低組無療效上的明顯區別[10]。

在其他湯劑的研究上以麻黃湯、生脈飲、大承氣湯的研究較為系統。實驗得出在煎出率比較中生脈飲傳統煎煮優于機器煎煮,麻黃湯、大承氣傳統煎藥與機器煎煮區別不大[11]。在相同條件下煎煮當歸補血湯,傳統煎煮和機器煎煮得到的當歸補血湯阿魏酸和黃芪甲苷含量無明顯差異性,證明當歸補血湯傳統煎煮與機器煎煮在有效成分溶出率上相當[12]。上述研究結果有明顯不同,但總體上說明了傳統煎煮在煎出率上優于機器煎煮的事實。

本實驗以麻黃湯、生脈飲、四君子湯、四物湯、白虎湯五個經典方劑為代表,考察其煎出物重量、煎出率、主要有效成分含量,以證實以上文獻研究所得結論是否真實可靠。

1.實驗材料

1.1 方劑

麻黃湯:麻黃9g、桂枝6g、杏仁6g、甘草3g(均取自同仁堂),共24g。(出自《傷寒論》)

生脈飲:人參10g、麥冬15g、五味子6g,共31g。(出自《內外傷辨惑論》)

四君子湯:人參10g、白術、茯苓各9g、炙甘草6g,共34g。(出自《太平惠民和劑局方》)

動員各方面力量搞好村莊環境宣傳,把全體村民發動起來,讓他們都真正理解支持,是每個村民都能做到愛村、護村,并行動起來,投入到美麗村莊建設上來,形成合力勢頭和建設發展力。

四物湯:酒當歸10g、川芎8g、白芍12g、酒炙熟地黃12g,共42g。(出自《太平惠民和劑局方》)

白虎湯:石膏30g(先煎30min)、知母9g、炙甘草3g、粳米9g,共51g。(出自《傷寒論》)

1.2 儀器試劑

砂鍋、ZK-JC2+1型煎藥機(西安至康制藥機械有限公司)、電子天平(型號:格萊瑞BSA124S)、Agilent 1100 HPLC(自動進樣器、柱溫箱、脫氣機、紫外檢測器)及其配套色譜工作站、Waters–Xbridge C18 (5μm,4.6×250mm)、超純水、甲醇(美國天地4L)、苦杏仁苷對照品、阿魏酸、人參皂苷Rg1對照品(江萊生物20mg)等。

2.煎出物重量及煎出率測定方法

2.1 砂鍋組煎煮方法

將藥物浸泡30min后加足量水,一煎水沒過藥面1~3cm,大火沸騰后小火保持25~30分鐘,二煎水沒過藥面即可,武火沸騰后文火保持20~25分鐘。合并兩次煎液,濃縮至500ml即得[12](白虎湯中石膏應先煎半小時,然后按照上述步驟實驗)。

2.2 機器組煎煮方法

將藥物浸泡30min,120℃加足量水煎40min,過濾,第二煎120℃煎20min,合并兩次濾液,取藥液濃縮至500ml。

2.3 測定煎出物重量及煎出率

分別取上述五方砂鍋組和機器組煎煮濾液各100ml,置于干燥蒸發皿中恒溫水浴揮干水分,稱重所得固體量,計算煎出率,每方重復三次取平均值得到以下結果。

表2 傳統組與機器組煎出物重量(三次實驗均值)

表3 傳統組與機器組煎出率(三次實驗均值)

3.含量測定

3.1 方法

麻黃湯內主要有效成份為苦杏仁苷,四物湯內主要成分為阿魏酸,因此分別以苦杏仁苷和阿魏酸含量評價傳統煎煮與機器煎煮在有效成分煎出上的區別。四君子湯和生脈飲則均以人參皂苷Rg1作為含量對比成分。白虎湯內石膏主要成分為CaSO4。

3.2 樣品制備

從麻黃湯、四物湯、四君子湯和生脈飲浸膏中分別取出1ml加入甲醇稀釋至10ml,用0.45μm微孔濾膜過濾,濾液取1ml于25ml容量瓶中,甲醇定容,標準曲線法測定主要有效成分含量。

3.3 色譜條件

色譜柱:Waters–Xbridge C18 (5μm,4.6×250mm),流動相:甲醇-水梯度洗脫(苦杏仁苷),甲醇-水-0.05%磷酸(40:50:10)洗脫(阿魏酸),乙腈-水梯度洗脫(人參皂苷Rg1),流速:1.0ml·min-1,檢測波長:苦杏仁苷:210nm;阿魏酸:325nm;人參皂苷Rg1:205nm,柱溫:30℃。

3.4 標準曲線繪制

天平精密秤取對照品3.2mg,加入甲醇制成0.50mg·ml-1對照品溶液,按照上述3.2色譜條件梯度體積進樣,以峰面積y為縱坐標,進樣量x為橫坐標得到以下回歸方程:

苦杏仁苷:y=13.514x-7.9469(n=6) R2=0.9995

阿魏酸:y=81.5x+0.8895(n=6) R2=0.9990

四君子人參皂苷Rg1:y=0.9346x-0.0284 R2=0.9993

生脈飲人參皂苷Rg1:y=0.9792x+0.4482 R2=0.9992

3.5 白虎湯

取5ml浸膏,加5ml鹽酸水,攪拌,0.45μm微孔濾膜過濾,保留濾液于燒杯中,加20ml10%BaCl2,加熱反應12h,AgNO3滴定至再無cl-1。無灰濾紙過濾,濾物及濾紙干燥后稱取BaSO4結晶,計算得到無水硫酸鈣含量。

CaSO4+BaCl2==BaSO4↓+CaCl2

3.6 樣品含量測定結果

表4 傳統組與機器組有效成分含量(三次實驗均值)

4.臨床檢測

將上述五種方劑分別按照傳統煎煮與機器煎煮方法用于治療臨床病患。共選定100名患者,符合每種湯劑治療要求的20人。傳統組與機器組每種方劑各10人一組。實驗得到治愈率如下:

方劑名 傳統組(10人) 機器組(10人)麻黃湯 8 7生脈飲 9 7四君子湯 5 3四物湯 7 4白虎湯 6 2

5.實驗結果

五組方劑的煎出物重量、煎出率、主要有效成分含量,實際治愈率結果均表明,傳統組均明顯高于機器組,經統計分析,P<0.5,結果具有顯著差異,就上述五種方劑表明傳統煎煮方法優于機器煎煮方法。

6.結論及討論

綜上所述,不同方劑的傳統煎煮方法均明顯優于機器煎煮,無論是煎出率還是主要有效成分含量,傳統組均高于機器組,也從側面證實傳統煎煮法的療效優于機器煎煮法。

傳統煎煮講究文火慢熬,需要的時間更久,藥物有效成分滲出的更為充分,因而煎出率較高[13];而機器煎煮體現節省成本方便快捷,在短時間內將藥物有效成分煎出,雖然藥物有效成分含量不及傳統煎煮高,但煎藥機很符當今社會快速的生活節奏[14],因此當前社會機器煎煮法應用也較為廣泛。目前國內各大醫院機器煎煮時長普遍為40~60min,煎煮時間較短,更無法達到本實驗中的煎煮時長,故而有效成分煎出率更低,含量更低,由此藥效也更低,藥物的利用率同樣不高,造成了中藥材資源的極大浪費。這提醒我們在面對外來引進事物的時候應當保持足夠的警惕,不能一味的夸贊先進科技,應當在結合傳統優秀工藝的基礎上利用科學技術,把兩者相結合,與時俱進。期望后期機器煎煮法能與傳統工藝相結合,不斷提升,逐漸達到甚至超過傳統煎煮法。

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