乙肝病毒血清學檢測采用化學發光法和酶聯免疫法效果比較分析

張琰 戴彰 朱建輝

[摘要] 目的 分析乙肝病毒血清學檢測采用化學發光法與酶聯免疫方法檢驗效果。方法 方便選取2017年2月—2018年5月該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對象，對患者采血之后血清標本采用化學發光法與酶聯免疫吸附法進行檢測，觀察兩種檢測方式的檢驗效果。 結果 化學發光法檢出乙肝病毒陽性的患者有320例，占比64.0%，酶聯免疫吸附試驗法檢出乙肝病毒陽性患者有200例，占比40.0%，酶聯免疫吸附法檢出乙肝病毒陽性率要明顯低于化學發光檢查方法，兩組數據差異有統計意義（χ2=57.69，P<0.05）。兩種檢查方式的重復性結果比較，化學發光檢測法重復性高60例（12.0%）、中70例（14.0%）、低100例（20.0%），顯著優于酶聯吸附實驗法，且差異有統計學意義（χ2=24.39、22.50、18.71，P<0.05）。 結論 化學發光法和酶聯免疫吸附試驗法檢驗方式相比，化學發光法對乙肝病毒陽性檢出率要明顯高于酶聯免疫吸附試驗法，對其進行定性定量檢測，能夠提高檢測準確度。

[關鍵詞] 乙肝病毒；血清學檢測；化學發光法；酶聯免疫吸附試驗法；臨床價值

[中圖分類號] R512.6；R446.6 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2018）09（b）-0193-03

[Abstract] Objective To analyze the serological detection of hepatitis B virus by chemiluminescence method and enzyme-linked immunosorbent assay. Methods A total of 500 suspected hepatitis B patients admitted to the hospital from February 2017 to May 2018 were selected as subjects. The blood samples were convenient collected by chemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay after blood collection. Results There were 320 cases of hepatitis B virus positive by chemiluminescence method， accounting for 64.0%. 200 cases of hepatitis B virus positive patients were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， accounting for 40.0%， and HBV was detected by enzyme-linked immunosorbent assay. The positive rate was significantly lower than that of chemiluminescence. The difference between the two groups was statistically significant （χ2=57.69， P<0.05）. The reproducibility results of the two examination methods were 60 case（12.0%）， 70 case（14.0%）， and 100 case（20.0%）， which were significantly better than the enzyme-linked adsorption method. The difference was statistically significant （χ2=24.39， 22.50， 18.71， P<0.05）. Conclusion Compared with the enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， the positive detection rate of hepatitis B virus by chemiluminescence method is significantly higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） qualitative and quantitative detection can improve the detection accuracy.

[Key words] Hepatitis B virus； Serological detection； Chemiluminescence method； Enzyme-linked immunosorbent assay； Clinical value

乙型肝炎病毒在我國的發病率相對較高，目前沒有針對乙型肝炎疾病特效治療方式，針對乙型肝炎病毒實施早期診斷治療至關重要。對乙型肝炎病毒檢測的手段主要是化學發光法和酶聯免疫吸附試驗法兩種檢測方式，這兩種檢測方式在臨床上均具有重要應用價值[1]。現就2017年2月—2018年5月該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對象，分析乙肝病毒血清學檢測采用化學發光法與酶聯免疫方法檢驗效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收治的500例疑似乙肝患者作為觀察對象，500例患者中男性患者有260例，女性患者有240例，年齡均在20～60歲之間，平均年齡為（42.8±5.8）歲。500例患者診斷標準均根據《乙型病毒性肝炎診斷標準》進行檢查診斷，且所選病例均通過倫理委員會的批準，患者及家屬均知情同意。

1.2 方法

對所有患者分別實施化學發光法和酶聯免疫吸附試驗法。500例患者均在檢驗當天清晨采集患者空腹靜脈肘靜脈血10 mL，將采集的血液標本進行離心，離心的速度設置為3 000 r/min，離心的時間設置為10 min，將分離的血清標本進行保存待檢。每次根據定值參比血清作為質量控制，操作方式均嚴格根據試劑盒說明書實施。化學發光法檢測：采用化學發光儀器：全自動免疫分析儀ZH6000，使用雙抗體夾心方法、實施檢驗，把配套反應白色不透明條板微孔（固相有鏈霉親和素SA）、吸頭與洗液放置在預定的位置。把鼠抗HbsAg單克隆抗體-生物素和待測樣品共同進行培育。通過洗滌，洗掉游離成分，然后加入鼠抗HbsAg單克隆-堿性磷酸酶，再次洗滌，洗掉游離成分，最后加入發光底物液，通過測定各孔的發光值RLU，換算出相應濃度。酶聯免疫吸附試驗法檢測，采用廈門新創酶聯方法，TECAN酶標儀。使用雙抗原夾心法（只檢測表面抗原用雙抗體夾心法）實施測定，采用去離子水稀釋，將50 mL濃縮洗滌液到1 000 mL放置在專門洗液瓶當中，把酶標試劑放置在試劑預定位置讀取吸光度值，通過陰性對照根據平均吸光度作為臨界值。若OD值大于1則為陽性，反之則為陰性。

1.3 觀察指標

觀察500例患者乙肝病毒采用化學發光法與酶聯免疫吸附試驗法檢測的結果，對兩組檢查結果進行比較。對兩種檢測方式重復性結果比較，重復性可分為高、中、低3個指標層次[2]。

1.4 統計方法

采用SPSS 17.0統計學軟件處理數據，計數資料以[n（%）]表示，行χ2檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

化學發光法檢出乙肝病毒陽性的患者有320例，酶聯免疫吸附試驗法檢出乙肝病毒陽性患者有200例，酶聯免疫吸附法檢出乙肝病毒陽性率要明顯低于化學發光檢查方法，兩組數據差異有統計意義（P<0.05）。見表1。

觀察兩種檢查方式的重復性結果，化學發光法與酶聯免疫吸附實驗法重復性對比，除了高濃度乙肝病毒含量之外，其余的指標結果相比，均顯示出化學發光檢測法重復性要顯著優于酶聯吸附實驗法，且兩組之間數據差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

3 討論

乙型肝炎病毒屬于全球性傳染性疾病，在我國，乙型肝炎病毒表面抗原攜帶者高達百分之十[3]。乙肝病毒表面抗體屬于人體感染乙肝病毒之后針對乙肝病毒所產生特異性抗體，因為目前對于乙型肝炎病毒沒有特效的治療方法，因此，早期對乙肝病毒進行診斷至關重要[4]。

張英霞[5]的研究顯示，針對乙肝病毒血清學檢驗分別采用化學發光法檢測與美聯免疫吸附實驗法進行檢測，研究結果顯示，化學發光檢測方法檢測乙肝病毒陽性率為54.8%，要顯著高于酶聯免疫吸附實驗法。該文研究結果顯示，化學發光法檢出乙肝病毒陽性的患者有320例，占比64.0%，明顯優于酶聯免疫吸附法檢出乙肝病毒陽性率，兩組數據差異有統計意義，與張英霞的研究結果相近。原因在于兩種不同檢驗方式具體方法差異，酶聯免疫吸附試驗法屬于臨床診斷乙肝疾病較為傳統檢測方法，酶聯免疫吸附試驗法操作簡便、快捷、費用較低特征，逐漸廣泛被應用于乙肝病毒抗體檢測當中，但是這種靜靜能夠實施定性分析，不能夠實施定量分析[6-7]。化學發光分析檢測技術屬于生物素-親和素技術，在電極的表面能夠通過電化學引發特異性化學發光反應，屬于目前較為先進化學發光免疫測定系統。

化學發光免疫分析技術采用載體朱啊喲是受到電磁鐵控制影響，全面實現檢測自動化與標準化，減少因為人工操作所帶來的誤差，并且能夠精準實施定性與定量分析，能夠大幅度減少誤差。化學發光法與酶聯免疫吸附實驗法重復性對比，除了高濃度乙肝病毒含量之外，其余的指標結果相比，均顯示出化學發光檢測法重復性要顯著優于酶聯吸附實驗法。化學發光分析檢測技術高、中、低重復率分別為12.0%、14.0%、20.0%，低濃度重復率相對較高。且化學發光分析檢測技術重復率要低于酶聯免疫吸附試驗方法。說明化學發光分析技術在乙肝病毒檢測當中占有重要價值。

以上結果表明，隨著臨床檢驗技術發展與進步，對乙型肝炎病毒的檢測，除了采用傳統酶聯免疫吸附試驗方法，化學發光分析檢測技術逐漸應用于臨床，并且獲得較好的檢測效果。化學發光分析檢測技術經生物素-親和素技術在電極表面引發特異性發光反應，屬于臨床較為先進化學發光測定性系統。化學發光分析檢測技術屬于新一代免疫標記測定技術，能夠有效提高檢測方法靈敏度，精準實施定量檢測，能夠精準檢出低濃度乙肝病毒在病程觀察當中絕大程度縮短窗口期。化學發光分析檢測技術與傳統的酶聯免疫吸附試驗法比較，化學發光免疫吸附法試劑消耗量相對較小、試劑容易得到保存、試劑穩定性能先谷底較高，適用于健康人群。并且化學發光分析檢測技術特異度較高，重復性相對較好，試劑相對穩定，沒有污染，且有效期較長。操作程序相對簡單，且容易自動化與標準化等。因而，針對乙肝病毒檢測，在檢測方式方面比較，化學發光分析檢測技術應當作為臨床首選檢測方式。以達到早期發現乙肝疾病，早期預防疾病，控制病情的繼續發展，也能夠為后期診斷治療乙肝疾病提供參考依據，有助于患者治療效果的提高，降低誤診與漏診的現象，提高臨床診斷治療效率。

綜上所述，化學發光法和酶聯免疫吸附試驗法檢驗方式相比，化學發光法對乙肝病毒陽性檢出率要明顯高于酶聯免疫吸附試驗法，對其進行定性定量檢測，能夠提高檢測準確度。酶聯免疫吸附試驗檢測技術簡便快捷、成本較低，靈敏度相對較低，只能進行定性檢測。化學發光檢測方式具備較高靈敏度，能夠實施定性與定量檢測，有助于對乙肝疾病患者的診斷，可以為臨床醫生判斷與治療疾病提供重要臨床應用價值，值得臨床推廣與應用。

[參考文獻]

[1] 趙曉芬.乙肝病毒血清學檢驗采用化學發光法與酶聯免疫法的效果對比[J].臨床醫藥文獻電子雜志，2016，3（4）：605-605，607.

[2] 李蘭英.乙肝病毒血清學檢驗采用化學發光法和酶聯免疫法的效果對比分析[J].中國保健營養，2016，26（9）：349.

[3] 雷秀麗.化學發光法與酶聯免疫法應用于乙肝病毒血清學檢驗中的效果[J].臨床醫學研究與實踐，2018，3（6）：100-101.

[4] 張英霞.乙肝病毒血清學檢驗采用化學發光法與酶聯免疫法的效果對比[J].中外醫療，2017，36（20）：35-37.

[5] 傅學文.乙肝病毒血清學檢驗采用化學發光法與酶聯免疫法的效果對比[J].心理醫生，2017，23（27）：69.

[6] 宋劍.化學發光法與酶聯免疫法檢驗乙肝病毒血清的效果對比[J].世界臨床醫學，2016，10（20）：234-235.

[7] 于鋒.化學發光法和酶聯免疫法對乙肝病毒血清學的檢驗效果[J].世界臨床醫學，2017，11（18）：213.

[8] 吳淑霞，范軍，張儉，等.兩種方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物結果分析[J].寧夏醫科大學學報，2015，37（3）：344-346.

（收稿日期：2018-06-15）