芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響

陳蕊肖 王立新 王慶海

(河北省滄州中西醫結合醫院心內三科，河北 滄州 061001)

芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響

陳蕊肖 王立新1王慶海2

(河北省滄州中西醫結合醫院心內三科，河北 滄州 061001)

目的觀察芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響，探討其防治冠心病的相關機制。方法將60只健康雄性SD大鼠隨機分為2組，正常對照組15只，造模組45只。造模組采用喂食高脂飼料聯合垂體后葉注射液腹腔注射的方法制備冠心病大鼠模型，造模后造模組剩余40只大鼠隨機分為模型對照組，芪參還五膠囊低、中、高劑量組，每組各10只，另設正常對照組10只。芪參還五膠囊低、中、高劑量組分別予芪參還五膠囊0.125、0.25、0.5 g/(kg·d)灌胃給藥，正常對照組及模型對照組分別予0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg灌胃，均每日1次，共4周。采用全自動生化分析儀檢測5組大鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)及脂蛋白(a)[LP(a)]水平。結果與正常對照組相比，模型對照組及芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。與模型對照組相比，芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊低劑量組相比，芪參還五膠囊中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C、LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊中劑量組相比，芪參還五膠囊高劑量組TG水平降低(P<0.05)，TC、LDL-C、HDL-C、LP(a)水平均無明顯變化(P>0.05)。結論芪參還五膠囊可調節冠心病大鼠脂質代謝，有利于冠心病的防治。

冠心病；疾病模型，動物；動物，實驗；中藥療法；降血脂藥(中藥)

冠心病是指冠狀動脈粥樣硬化和(或)冠狀動脈功能性改變(痙攣)造成冠狀動脈管腔狹窄或阻塞，使心肌缺血、缺氧、壞死進而引發的心臟病。冠心病是多病因性疾病，其公認的危險因素有性別、年齡、心血管病早發家族史、吸煙、高血壓、血脂異常、糖尿病、肥胖、缺少體力活動等。脂質代謝異常是動脈粥樣硬化最重要的危險因素，大量臨床研究及動物實驗證實，總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平升高以及高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平降低是冠心病的主要危險因素，而包括甘油三酯(TG)、脂蛋白(a)[LP(a)]水平升高在內的其他類型血脂異常與冠心病的發生也有一定關聯[1-5]。芪參還五膠囊為河北省滄州中西醫結合醫院院內制劑，以傳統中藥方劑“補陽還五湯”為基礎方加減而成。臨床及基礎研究表明，芪參還五膠囊能夠改善非癡呆型血管性認知功能障礙患者的認知功能，并能調節脂質代謝；促進周圍神經修復和再生；有效抑制急性腦梗死患者病變區的炎癥反應，減輕神經細胞損傷，對神經功能的恢復有促進作用[6-8]。但對于芪參還五膠囊是否具有通過調節血脂代謝而防治冠心病的作用，目前尚未清楚。本實驗觀察芪參還五膠囊對冠心病大鼠血脂水平的影響，進一步探討芪參還五膠囊防治冠心病的相關機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 60只清潔級健康雄性SD大鼠，體質量(200±20)g，由斯貝福(北京)生物技術有限公司提供，動物合格證號11401500012397，許可證號：SCXK(京)2016-0002。

1.1.2 動物飼料 普通大鼠維持飼料，由北京安貞醫院實驗動物中心提供。高脂飼料，由北京華阜康生物科技股份有限公司調配，其中3%為膽固醇、0.5%為膽酸鈉、0.2%為丙基硫氧嘧啶、5%為白糖、10%為豬油、81.3%為基礎飼料。

1.1.3 實驗藥物 芪參還五膠囊：由黃芪、太子參、桃仁、紅花、當歸、赤芍、川芎、膽南星、清半夏、玄參、石決明、鉤藤、麥冬、牛膝、大黃、連翹、全蝎、地龍、水蛭共19味中藥組方而成。由河北省滄州中西醫結合醫院中藥制劑室配制，冀藥制字Z20050798，批號030310。垂體后葉注射液：南京新百藥業有限公司，國藥準字H32026638，批號160302，規格1 mL：6單位/支。

1.1.4 主要儀器 福州華志科學儀器有限公司電子天平PTZ-224，海爾(Haier)BCD-242BF冰箱，德國Hettich MIKRO220離心機，日本日立7600-010全自動生化分析儀，德國eppendorf移液器，日本奧林巴斯BX51T-PHD-J11光學顯微鏡及其照相裝置，常州市郝思琳醫用儀器有限公司TEC-2500病理組織漂烘儀，德國萊卡RM2015石蠟切片機。

1.1.5 實驗條件 本實驗于北京安貞醫院實驗動物中心進行，室溫23～27 ℃，濕度44%～51%，通風，分籠飼養(3～4只/籠)，動物飲水由北京安貞醫院實驗動物中心提供。

1.2 實驗方法

1.2.1 分組及造模方法 先將60只健康雄性SD大鼠隨機分為2個實驗組，正常對照組15只，造模組45只。造模組采取喂食高脂飼料聯合垂體后葉注射液腹腔注射的方法制備冠心病大鼠模型。即造模組大鼠每日喂食高脂飼料，自由飲水，共計8周，最后3 d予垂體后葉注射液30單位/(kg·d)腹腔注射。正常對照組大鼠喂食普通飼料，自由飲水。8周后，2組分別取5只大鼠，取其心臟及冠脈組織，觀察正常對照組與造模組大鼠冠脈及心肌病理變化，確認造模是否成功。造模成功的標準[9]：①一般情況：小鼠體質量減輕，活動和飲食減少，反應遲鈍，毛色暗淡無光澤，爪趾和口唇發紺。②冠脈及心肌病理改變：冠脈內膜損傷，內皮細胞排列紊亂，管壁脂質沉積，管腔縮窄；心肌細胞腫脹、排列紊亂，心肌間質纖維化，部分區域可見顯著的局灶性壞死，細胞核萎縮。結果造模組大鼠均造模成功(給藥結束后病理觀察均證實)。造模后將造模組剩余40只大鼠隨機分為4組，即模型對照組、芪參還五膠囊低劑量組、芪參還五膠囊中劑量組及芪參還五膠囊高劑量組，每組各10只。正常對照組5只大鼠冠脈及心肌病理正常，剩余10只進行下一步研究。

1.2.2 給藥方法 芪參還五膠囊成人給藥劑量為2.4 g/d，根據成人(60 kg)和大鼠按照體表面積折算的等效劑量比值換算出大鼠給藥劑量為0.25 g/(kg·d)，定為中劑量給藥量，按1∶2∶4比例計算出芪參還五膠囊低、中、高劑量組給藥量分別為0.125、0.25、0.5 g/(kg·d)。按照以上劑量，將藥物溶于0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg中按照分組分別對應灌胃給藥。正常對照組及模型對照組予0.9%氯化鈉注射液10 mL/kg灌胃。均每日1次，共4周。實驗期間各組大鼠自由飲水，普通飼料喂養，每周定時稱體質量，并依據體質量的變化調整用藥劑量。

1.2.3 觀察指標 各組大鼠末次灌胃后，禁食、水12 h，空腹測體質量，予水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔推注麻醉。麻醉成功后仰臥位固定，沿腹正中線剪開皮膚，暴露腹主動脈，取血4 mL，置于分離膠試管，3 500 r/min，離心15 min，取血清以全自動生化分析儀檢測TC、LDL-C、HDL-C、TG、LP(a)水平。

2 結 果

2.1 大鼠死亡情況 灌胃過程中，正常對照組及芪參還五膠囊高、低劑量組均無大鼠死亡，模型對照組及芪參還五膠囊中劑量組各死亡1只。

2.2 5組大鼠血脂水平比較 見表1。

表1 5組大鼠血脂水平比較

與正常對照組比較，*P<0.05；與模型對照組比較，△P<0.05；與芪參還五膠囊低劑量組比較，#P<0.05；與芪參還五膠囊中劑量組比較，☆P<0.05

由表1可見，與正常對照組相比，模型對照組及芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。與模型對照組相比，芪參還五膠囊低、中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊低劑量組相比，芪參還五膠囊中、高劑量組TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C、LP(a)水平無明顯變化(P>0.05)。與芪參還五膠囊中劑量組相比，芪參還五膠囊高劑量組TG水平降低(P<0.05)，TC、LDL-C、HDL-C、LP(a)水平均無明顯變化(P>0.05)。

3 討 論

近年來，我國心血管疾病的發病率和死亡率逐年增高，2013年較2009年我國冠心病死亡人數增加了90.9%[10-11]。近年來發現的冠心病新的危險因素包括超敏C反應蛋白、高同型半胱氨酸血癥、高尿酸、高內脂素及心理因素等[12]。血脂代謝紊亂是冠心病主要的危險因素[13]，與冠心病的發病關系密切。王薇等[1]通過前瞻性研究發現，在急性冠心病發病人群中，11.7%歸因于血清TC水平升高；TC≥7.28 mmol/L(280 mg/dL)的人群急性冠心病事件發病風險比TC<3.64 mmol/L(140 mg/dL)的人群增加1.63倍。Koba等[2]通過多元Logistic回歸分析顯示，小而密低密度脂蛋白膽固醇(sd-LDL-C)與嚴重冠心病密切相關，且這種相關性獨立于LDL-C水平，對嚴重穩定型冠心病的預測價值高于LDL-C水平。動脈粥樣硬化的形成起始于內皮損傷，而脂質代謝紊亂及其在血管內皮的沉積在動脈粥樣硬化的發生和發展中具有重要的作用。在長期高脂血癥的情況下，氧自由生成增多，使脂質過氧化進而促使氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)含量增多，一氧化氮(NO)合成受到抑制，內皮素-1(ET-1)分泌增加，血管內皮細胞功能受損。HDL能通過膽固醇逆向轉運，把外周組織及血管壁中的膽固醇轉移到肝臟，經肝臟分解代謝排出體外，使血管壁中聚積的膽固醇減少，從而抗動脈粥樣硬化的發生、進展。血清TG水平與冠心病發病有一定關聯，但是否為冠心病的獨立危險因素尚需進一步探討[14-16]。LP(a)水平升高使冠心病患病風險增加[17-19]。雖然LP(a)的生理功能目前尚不十分清楚，但目前一些研究表明LP(a)能夠促進急性炎癥的發生以及泡沫細胞的形成，這可能與其促進氧化修飾及抗纖維蛋白溶解的作用有關[20]。

本實驗采用喂食高脂飼料聯合腹腔注射垂體后葉注射液的方法制備冠心病大鼠模型。喂食高脂飼料使大鼠出現脂質代謝紊亂，進而出現動脈粥樣硬化，然后注射垂體后葉注射液誘發心肌缺血。該制備方法接近臨床上冠心病的病理生理學改變，造模成功率高，操作簡單，管理方便，大鼠創傷小、病死率低，但造模時間長、缺血程度難統一是其局限性。本研究顯示，與正常對照組相比，模型對照組大鼠TC、LDL-C、TG、LP(a)水平均升高(P<0.05)，HDL-C水平降低(P<0.05)。而采用芪參還五膠囊干預后，TC、LDL-C、TG水平降低(P<0.05)，HDL-C水平升高(P<0.05)，且芪參還五膠囊中、高劑量組的調脂效果優于芪參還五膠囊低劑量組(P<0.05)，芪參還五膠囊中劑量組與芪參還五膠囊高劑量組組間比較顯示，TC、LDL-C、HDL-C水平無明顯差異(P>0.05)，故臨床上推薦以中劑量作為治療劑量。芪參還五膠囊無明顯降低LP(a)的作用。

中醫學認為，冠心病屬于中醫學胸痹、心痛等范疇，其基本病理變化為本虛標實，本虛主要為氣血虧虛，標實主要為痰濁血瘀。芪參還五膠囊以“補陽還五湯”為基礎方加太子參、膽南星、清半夏、玄參、石決明、鉤藤、麥冬、牛膝、大黃、連翹、全蝎、水蛭而成，具有益氣活血、化瘀通絡、熄風化痰、清熱養陰之效，主要用于冠心病、腦梗死、高脂血癥等證屬氣虛血瘀、痰熱蘊結者，證見胸悶、胸痛、憋氣、頭暈、頭痛、半身不遂、氣短乏力等。其中黃芪、太子參為君藥，意在使氣推血行，化瘀通絡；當歸補血活血，通經活絡，為臣藥；桃仁、紅花、赤芍、川芎、牛膝協同當歸以活血祛瘀；膽南星、清半夏、石決明、鉤藤熄風化痰；玄參、麥冬、大黃、連翹合用可清熱養陰；全蝎、地龍、水蛭活血通絡，善行專走，通行全身，以助藥力，為佐藥。現代藥理研究表明，黃芪具有強心、改善心肌代謝的作用，亦可以擴張冠脈血管，增加心肌供血；緩解高游離脂肪酸對血管內皮功能的損傷，保護血管內皮細胞；調節小鼠血脂代謝，增強機體抗脂質過氧化的作用[21-22]。太子參含有皂甙、多糖、環肽、氨基酸、磷脂、微量元素等多種活性物質，能夠降低血脂、血糖，且具有清除氧自由基、保護細胞內膜、改善心肌代謝等作用[23]。當歸、川芎、赤芍、桃仁、紅花均具有擴張冠脈、抗凝、抗血小板聚集及降低心肌耗氧量的作用[24]。牛膝總皂苷對心肌缺血大鼠具有擴張血管、抗血小板聚集、抑制脂質過氧化反應、保護血管內皮的作用[25]。地龍含有蚓激酶、蚓膠原酶、地龍纖維蛋白溶解酶、地龍溶栓酶、游離氨基酸等活性成分，全蝎的活性成分包括蝎毒、三甲胺、核苷類等，水蛭含有水蛭素、肝素、組織胺、氨基酸、吻蛭素等成分，全蝎、地龍、水蛭三種藥物均具有抗凝、抗血小板聚集、溶栓的作用[26-28]。

綜上所述，芪參還五膠囊具有通過調節血脂代謝防治冠心病的作用。但由于冠心病是多病因性疾病，芪參還五膠囊的組成藥物較多，作用機制復雜，對于其防治冠心病的作用機制還需進一步研究。

[1] 王薇,趙冬,劉靜,等.中國35～64歲人群膽固醇水平與10年心血管病發病危險的前瞻性研究[J].中華心血管病雜志，2006,34(2)：169-173.

[2] Koba S,Yokota Y,Hirano T,et al.Small LDL-cholesterol is superior to LDL-cholesterol for determining severe coronary atherosclerosis[J].J Atheroscler Thromb，2008,15(5)：250-260.

[3] Woodward M，Barzi F， Feigin V，et al.Associations between high-density lipoprotein cholesterol and both stroke and coronary heart disease in the Asia Pacific region[J].European heart journal，2007，28(21)：2653-2660.

[4] Egeland GM，Igland J，Sulo G，et al.Non-fasting triglycerides predict incident acute myocardial infarction among those with favourable HDL-cholesterol:Cohort Norway[J].Eur J Prev Cardiol，2015，22(7)：872-881.

[5] Dubé JB，Boffa MB，Hegele RA，et al.Lipoprotein(a)：more interesting than ever after 50 years[J].Curr Opin Lipidol，2012，23(2)：133-140.

[6] 劉國華,單永琳,王傳尊,等.芪參還五膠囊對血管性癡呆患者脂代謝的影響觀察[J].現代中藥研究與實踐，2015，29(1)：75-76，81.

[7] 李寶祥.芪參還五膠囊對大鼠卡壓性坐骨神經損傷作用的實驗研究[D].石家莊：河北醫科大學，2015.

[8] 馬向陽,畢振云,何雪娟,等.芪參還五膠囊對腦梗死大鼠學習記憶能力及缺血側海馬區微血管密度的影響[J].中西醫結合心腦血管病雜志,2015,13(18):2070-2072.

[9] 郭慧芳.心痛泰調節冠心病大鼠腎素血管緊張素醛固酮系統實驗研究[D].長沙：湖南中醫藥大學，2015.

[10] 隋輝,陳偉偉,王文.《中國心血管病報告2015》要點解讀[J].中國心血管雜志,2016,21(4)：259-261.

[11] 陳偉偉,高潤霖,劉力生,等.《中國心血管病報告2015》概要[J].中國循環雜志,2016,31(6):521-528.

[12] 劉紀君，梅傳忠，李興武.冠心病新危險因素在預測冠狀動脈病變嚴重程度中的價值研究進展[J].蚌埠醫學院學報,2016,41(4)：558-561.

[13] Sugiyama D,Okamura T,Watanabe M,et al.Risk of hypercholesterolemia for cardiovascular disease and the population attributable fraction in a 24-year Japanese cohort study[J].J Atheroscler Thromb，2015，22(1)：95-107.

[14] Egeland GM，Igland J，Sulo G，et al.Non-fasting triglycerides predict incident acute myocardial infarction among those with favourable HDL-cholesterol:Cohort Norway[J].European journal of preventive cardiology,2015,22(7)：872-881.

[15] Bansal S,Buring JE,Rifai N,et al.Fasting compared with nonfasting triglycerides and risk of cardiovascular events in women[J].JAMA，2007，298(3)：309-316.

[16] Emerging Risk Factors Collaboration,Di Angelantonio E,Sarwar N,et al.Major lipids，apolipoproteins,and risk of vascular disease[J].JAMA，2009，302(18)：1993-2000.

[17] Yusuf J,Yadav N,Mukhopadhyay S,et al.Relook at lipoprotein(A)：independent risk factor of coronary artery disease in north Indian population[J].Indian heart journal,2014,66(3)：272-279.

[18] 戴研,于全俊,賈云香,等.絕經后女性冠心病患者血清脂蛋白(a)的研究[J].臨床心血管病雜志,2001,17(5)：211-213.

[19] 郝家明.血清TBIL、Lp(a)和CysC檢測在冠心病診斷中的臨床價值[J].中國熱帶醫學,2015,15(8)：977-980.

[20] Imes CC,Austin MA.Low-density lipoprotein cholesterol,apolipoprotein B,and risk of coronary heart disease:from familial hyperlipidemia to genomics[J].2013,15(3):292-308.

[21] 吳發寶,陳希元.黃芪藥理作用研究綜述[J].中藥材,2004,27(3)：232-234.

[22] 金光顯,張學武.黃芪對高脂血癥小鼠血脂及脂質過氧化的影響[J].延邊大學醫學學報,2006,18(3)：1648-1649.

[23] 汪劍飛.太子參藥理研究新進展[J].實用藥物與臨床,2013,16(4)：333-334.

[24] 朱智德.補陽還五湯治療冠心病心絞痛療效及對血脂、高敏C反應蛋白的影響[J].湖北中醫雜志,2011,33(10)：5-6.

[25] 余佳文.懷牛膝總皂苷抗大鼠急性心肌缺血作用的研究[D].杭州：浙江中醫藥大學，2010.

[26] 劉文雅,王曙東.地龍藥理作用研究進展[J].中國中西醫結合雜志,2013,33(2)：282-285.

[27] 史磊,張天錫,杜聰穎,等.中藥全蝎活性成分、藥理作用及臨床應用研究進展[J].遼寧中醫藥大學學報,2015,17(4)：89-91.

[28] 郭曉慶,孫佳明,張輝.水蛭的化學成分與藥理作用[J].吉林中醫藥,2015，35(1)：47-50.

EffectofQishen-huanwucapsuleonserumlipidlevelinratswithcoronaryheartdisease

CHENRuixiao*,WANGLixin,WANGQinghai.*

ThirdDepartmentofCardiology,CangzhouHospitalofIntegrativeChineseandWesternMedicineinHebeiprovince,Hebei,Cangzhou061001

ObjectiveTo observe the effects of Qishen-huanwu capsule on the level of serum lipid in rats with coronary heart disease (CHD), and explore its mechanism of prevention and treatment of CHD.Methods60 healthy male Sprague-Dawley rats were randomly divided into two groups, 15 rats in the normal control group and 45 ratsin the model group.The model group was treated by high fat diet and intraperitoneal injection of Pituitrin to establish the rat model of CHD, and then the model rats were randomly divided into model control group, the low, middle and high dose of Qishen-huanwu capsule groups,10 rats in each group，another 10 rats were selected as the normal control group.The low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group were respectively given Qishen-huanwu capsule by 0.125 g/(kg·d), 0.25 g/(kg·d) and 0.5 g/(kg·d). The normal control group and model control group were given 0.9% sodium chloride injection gavage by 10 mL/kg, once a day for 4 weeks. The levels of total cholesterol (TC), triglyceride (TG), low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C), high-density lipoprotein cholesterol (HDL-C) and Lipoprotein alpha [LP(a)] were detected by the automatic biochemical analyzer.ResultsCompared with the normal control group, the levels of TC, LDL-C, TG and LP(a) increased in the model control group, the low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the level of HDL-C reduced (P<0.05). Compared with the model control group, the levels of TC, LDL-C and TG decreased in the low, middle, and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the level of HDL-C increased (P<0.05), the LP(a) had no obvious changes (P>0.05). Compared with the low dose of Qishen-huanwu capsule group, the levels of TC, LDL-C and TG decreased in the middle and high dose of Qishen-huanwu capsule group (P<0.05), and the levels of HDL-C and LP(a) had no obvious changes (P>0.05). Compared with the middle dose of Qishen-huanwu capsule group, the level of TG reduced (P<0.05), the levels of TC, LDL-C, HDL-C and LP(a) had no obvious changes (P<0.05).ConclusionQishen- huanwu capsule can regulate lipid metabolism of rats, and it is conducive to the prevention and treatment of CHD.

Coronary heart disease; Disease models; Animal; Experiment; Traditional Chinese medicine therapy; Hypolipidemic drugs (traditional Chinese medicine)

10.3969/j.issn.1002-2619.2017.12.022

R541.4；R285.5；R972.6

A

1002-2619(2017)12-1857-05

1 河北省滄州中西醫結合醫院政務部，河北 滄州 061001

2 河北省滄州中西醫結合醫院科教部，河北 滄州 061001

陳蕊肖(1990—)，女，醫師，碩士。從事心內科臨床診療工作。研究方向：心血管病。

2017-09-04)

曹志娟)