細(xì)菌性食物中毒病原學(xué)及微生物檢驗(yàn)分析

李曉燕

食品衛(wèi)生安全與國民生命健康息息相關(guān)[1-2]，食品中毒事件的發(fā)生會給社會帶來較多的負(fù)面影響，國家及社會需要不斷加強(qiáng)對食品衛(wèi)生安全問題的重視。食物中毒在急診科較為常見[3]，大腸桿菌感染、霍亂等均是臨床常見的細(xì)菌性食物中毒疾病，當(dāng)患者發(fā)病時(shí)，病情稍輕的患者以嘔吐、腹瀉為主要臨床表現(xiàn)，病情嚴(yán)重的患者甚至可能死亡[4]，因此盡早明確病原菌并予以對癥治療對于挽救患者的生命十分重要。選擇我院收治的細(xì)菌性食物中毒患者100例開展本次研究，正文詳細(xì)內(nèi)容如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

研究對象為我院收治的細(xì)菌性食物中毒患者100例（2016年5月1日—2017年5月2日）。男、女性患者分別為61、39例；年齡5～73歲，平均年齡（42.55±4.36）歲。將100例食物中毒事件中的剩余食物作為研究材料。

1.2 方法

根據(jù)《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)匯編GB4789系列》相關(guān)的細(xì)菌檢查方法進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，嚴(yán)格按照《霍亂防治》手冊第5版檢測霍亂弧菌。檢測100例患者食用過的食品以及患者的嘔吐物或者是糞便，對其中的廚師或食品銷售員進(jìn)行手拭子檢驗(yàn)，同時(shí)對細(xì)菌性食物中毒事件中的食品操作間進(jìn)行涂抹樣采集檢查。

本次檢驗(yàn)所使用的儀器包括冰箱、保溫箱、菌落計(jì)數(shù)器、電子天平、顯微鏡、熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）儀及配套的檢測試劑盒、亞硒酸鹽胱氨酸增菌液（SC）、甲基丙烯酸甲酯（MMA）平板、瓊脂（HE）平板、革蘭陰性（GNID）細(xì)菌生化平板、兔血漿平板等。主要使用的試劑為3%過氧化氫（H2O2）溶液、乳糖膽鹽發(fā)酵管、瓊脂培養(yǎng)基、動力硝酸鹽培養(yǎng)基、緩沖葡萄糖蛋白陳水以及肉湯培養(yǎng)基等。所有檢查均嚴(yán)格進(jìn)行質(zhì)量控制。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)每種菌類的檢出概率，觀察病毒血清型分布情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

應(yīng)用軟件SPSS 20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 病原菌檢出情況

通過微生物檢驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，嘔吐物中檢出菌株35株，肛拭子中檢出菌株985株，手拭子中檢出菌株32株，糞便中檢出菌株37株，食品中檢出菌株147株，廚具中檢出菌株270株，共計(jì)檢出1 506株，病原菌檢出388株，其中糞便中病原菌的檢出率62.16%（23/37）最高，其次為肛拭子35.43%（349/985），再次為嘔吐物14.29%（5/35）。其中根據(jù)病原菌分類情況發(fā)現(xiàn)，副溶血性孤菌的檢出率13.41%（202/1 506）最高，其次為變形桿菌3.12%（47/1 506）、沙門菌3.05%（46/1 506）、致瀉性大腸埃希菌2.99%（45/1 506）。詳細(xì)數(shù)據(jù)見表1。

2.2 病毒血清型分布情況

分離202株副溶血性孤菌后，經(jīng)血清學(xué)鑒定結(jié)果顯示，O3:K6血清型135株，O4:K8血清型26株，其他41株。另外45株致瀉性大腸埃希菌中包括致病性大腸細(xì)菌27株、侵襲性大腸細(xì)菌10例、產(chǎn)毒性大腸埃希菌8例。46株沙門菌中包括腸炎沙門菌株18例、鼠傷寒沙門菌7例、德爾卑沙門菌9例以及豬霍亂沙門菌12例。金黃色葡萄球菌8株中包括A型6株、A-C型1株、A-D型1株。

3 討論

臨床研究表明，通過微生物檢驗(yàn)?zāi)軌驅(qū)?xì)菌性食物中毒的菌屬等情況進(jìn)行明確[4-5]。采集足夠的、具有針對性的樣品是微生物檢驗(yàn)的關(guān)鍵，從細(xì)菌性食物中毒患者的嘔吐物、肛拭子、糞便以及食用過的食品、可疑廚具、手拭子等進(jìn)行取樣，存在代表性。在本次研究中，100例患者中共計(jì)檢出菌株1 506株，總的病原菌株檢出數(shù)為388株，且糞便中病原菌的檢出率為62.16%（23/37），為最高，因此在臨床取樣時(shí)可先采集糞便進(jìn)行微生物檢驗(yàn)。

表1 采集樣品的病原菌檢出情況（n，%）

另外研究表明，同一起食物中毒事件中不同類型樣品存在檢出病原菌不一致的情況，致瀉性大腸埃希菌、副溶血性孤菌多見，可能是與這兩種病原菌分布廣泛以及血清型較多有關(guān)[6-7]，另外本次檢測中，有一部分的病菌難以進(jìn)行準(zhǔn)確的檢測，故加強(qiáng)對少見病原菌的微生物檢驗(yàn)具有重要意義[8]。

較多種類的病原菌均可能會導(dǎo)致食物中毒的出現(xiàn)，在臨床致病菌的檢查工作中，需進(jìn)行普遍采樣，致力于研制少見病原菌的檢測技術(shù)，提高病原菌的檢出率。同時(shí)政府執(zhí)法部門的高度重視和有力監(jiān)管、廣大群眾的自發(fā)監(jiān)督也十分重要，有助于預(yù)防食物中毒。

總而言之，采集較多且存在針對性的樣品進(jìn)行微生物檢驗(yàn)有助于細(xì)菌性食物中毒病原菌種類的辨別，判斷血清型，對于臨床治療具有較好的指導(dǎo)作用。

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