RP—HPLC測定注射用前列地爾有關物質的含量

安娜

摘要：目的：建立注射用前列地爾有關物質含量的RP-HPLC檢測方法。方法：采用高效液相色譜儀，C18柱（150×4.6mm，5μ m，AgilentZORBAX SB），流動相為pH6.0磷酸緩沖液：乙腈（65：35），流速為1ml/min，檢測波長為210nm，柱溫為30℃進行測定。結果：前列腺素E1對照品濃度的線性范圍為0.12～0.38mg/ml（r=0.9999），15-酮基-前列腺素對照品濃度的線性范圍為0.03～0.25mg/ml（r=0.9998），前列腺素A1對照品濃度的線性范圍為0.05～0.33mg/ml（r=0.9999）。結論：用該方法檢測注射用前列地爾有關物質含量結果準確，操作簡單易行。

關鍵詞：RP-HPLC；注射用前列地爾：有關物質：含量

前列地爾，別名又叫做列腺素El，化學名為（1R，2R 3R）-3-羥基-2（E）-（3S）-3-羥基-1-辛烯基-5-氧代環戊烷庚酸。前列地爾注射液主要用于重度肝炎、腦血管疾病和勃起功能障礙等疾病的治療，但前列地爾注射液中除了有列腺素E1外，在制備時還會引入前列腺素A1和15一酮基一前列腺素等有關物質，因此對于注射用前列地爾有關物質含量的測定是保證藥品安全的關鍵。反相高效液相色譜法（rerse phase high-performance liquid chromatography＼RP-HPLC）具有高靈敏度、分析速度快等優點。本研究采用RP-HPLC法對注射用前列地爾有關物質的含量進行測定。

1.儀器與試劑

1.1儀器

高效液相色譜儀（1200 Agilent）：電子天平（BS0231C賽多利斯）；C18柱（ZORBAX SB 150×4.6 mm，5μm Agilent）；pH計（IP67 METTLER）；紫外分光光度計（UV5 METTLER）。

1.2試劑

前列地爾對照品（中國藥品生物制品檢定所批號：140659-201404，純度：99.6%），前列腺素A1對照品（中國藥品生物制品檢定所批號：140790-201001，純度：99.2%），15-酮基-前列腺素對照品（中國藥品生物制品檢定所批號：140826-201307，純度：99.5%），前列地爾注射液（凱時北京泰德制藥股份有限公司國藥準字H10980024），磷酸（分析純）；乙腈（色譜純）；水（注射水）。

2.方法與結果

2.1色譜條件

C18柱（Agilent ZORBAX SB 150×4.6mm 5μm）；以pH6.0磷酸緩沖液：乙腈（65：35）為流動相；檢測波長為210nm；柱溫：30℃；流速：1ml/min：進樣量：10μl。

2.2樣品配制

對照品溶液的配制：分別精確稱取適量前列腺素E1、15-酮基-前列腺素和前列腺素A1對照品，分別用流動相配制成濃度為10.0、6.0和4.0mg/L的對照品溶液。

供試品溶液的配制：精密量取前列地爾注射液，加流動相稀釋制成前列地爾濃度為100p g/ml的溶液，作為供試品溶液。

2.3線性關系測定

精密量取適量的三種對照品溶液，用流動相稀釋成濃度為0.5mg/ml，作為對照品溶液；然后精密量取0.25，0.5，1，2，4，6 ml加入10ml容量瓶中，加流動相至刻度線，混勻。再各取上述溶液10μl上樣，最后按照藥物峰面積Y對濃度X（mg/ml）進行線性回歸，詳細結果見表1。

2.4精密度測定

精密量取三種對照品溶液10μl，按照設定色譜程序重復進樣6次，計算主峰面積。結果為：前列腺素EIRSD%=0.41%，15-酮基-前列腺素RSD%=0.74%，前列腺素A RSD%=0.88%。

2.5回收率測定

精密稱取注射用前列地爾樣品（其中的15-酮基-前列腺素和前列腺素A1的含量已確定），分別加入相應物質的對照品比例為80%、100%、120%，用流動相稀釋，10μl上樣，重復進樣6次，采用外標法對注射用前列地爾有關物質含量進行測定，計算結果為5-酮基一前列腺素的回收率為99.7%，前列腺素A1的回收率為105.2%。

3.討論

前列地爾注射液是供臨床使用的輸液型藥品，該藥品的應用避免了輸液使用時帶來的如PH變化、微粒、熱原等醫療安全隱患；靜點更為安全、簡單，并能夠極大地降低二次交叉污染的概率。本研究為了確保前列地爾注射液臨床用藥的安全性，采用RP-HPLC測定注射用前列地爾有關物質含量。本研究參考了前列地爾注射液的進口藥品注冊標準和《歐洲藥典》，對前列地爾注射液中已知的兩種雜質（15-酮基-前列腺素和前列腺素A1）進行定量檢測，同時考慮到在前列地爾注射液的制備過程中有引入其他未知雜質的可能，因此對這兩種已知的雜質選取相應的對照品進行比對檢測。

本文中通過對注射用前列地爾有關物質含量的測定，考察并建立該藥品的RP-HPLC檢測方法，檢測結果表明該方法具有良好的線性關系、較高的精密度及回收率，適用性較強。