信陽毛尖中總黃酮的提取工藝

□ 林銀鳳 泉州市食品藥品檢驗所 陳曉文 牛昌存 黃河水利職業技術學院

信陽毛尖是河南省著名茶葉，又叫做豫毛峰，也是我國十大名茶之一。信陽毛尖具有：細、圓、光、直、多白毫、香高、味濃、湯色綠的獨特風格。信陽毛尖的營養價值也很高，能夠生津解渴、提神醒腦、清心明目和去膩消食等。信陽毛尖被譽為“綠茶之王”。信陽毛尖含有豐富的蛋白質、氨基酸、生物堿、茶多酚、黃酮類化合物、糖尖、有機酸、芳香物質和維生物等以及水溶性礦物質，具有抑制動脈粥樣硬化以及防癌、防治壞血病和護御放射性元素等多種功能。茶葉中含有豐富的黃酮類化合物，它除具有抗菌、消炎、降壓等作用外，在抗氧化、抗癌等方面也較顯著。

本文采用超聲波法提取黃酮，在單因素基礎上，采用正交實驗設計優化提取工藝，運用有機溶劑提取法探討信陽毛尖中黃酮的提取工藝。

1 實驗部分

1.1 材料與儀器

所用原材料為信陽毛尖茶葉，產自河南信陽。所用試劑包含中國食品藥品檢定研究院的蘆丁對照品，級別是色譜純，還有天津市德恩化學試劑有限公司的無水C2H5OH，天津登科化學試劑有限公司的亞硝酸鈉，天津市德恩化學試劑有限公司的氫氧化鈉，天津恒興化學試劑制造有限公司的硝酸鋁，級別都是分析純。

1.2 儀器與設備

本實驗所用儀器：昆山市超聲儀器有限公司的超聲波清洗器KQ-100E，上海精密儀器有限公司的電子分析天平FA2004N，上海美譜達儀器有限公司的可見分光光度計V-1200，江蘇姜堰市儀器分析廠的生化培養箱TF-1A。

1.3 方法

1.3.1 樣品處理方法

將信陽毛尖茶葉，粉碎，過200目篩，裝于棕色瓶，為待測樣。

1.3.2 標準曲線繪制

先進行蘆丁標準液調制，用30%C2H5OH對恒重蘆丁標準品0.002 0 g進行溶解，定容到100 mL，其溶液濃度是0.20 mg/mL。

接下來是曲線的繪制。首先是吸管 吸 取 0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mL蘆丁標準液，然后放進10 mL的比色管，再加入0.40 mL 5%亞硝酸鈉溶液，0.40 mL 10% Al（NO3）3，并分別搖勻，等待五分鐘后，再加入2.00 mL 4% NaOH，并使用30%C2H5OH濃度定容。在波長是505 nm環境下，再使用30% C2H5OH濃度作空白，測定吸光度。以蘆丁標準品質量濃度C（mg/mL）和吸光度A為橫、縱坐標繪制標準曲線，得到回歸方程：A=7.3214C+0.0006，R2=0.9993（n=6）。

1.3.3 黃酮類成分的提取

準確稱取1.000 0 g待測樣，按料液比35∶1（ mL∶g）加入濃度90%乙醇，在70 ℃時浸泡15 min。過濾，激昂濾液轉移定容至50m L，得到黃酮提取液，測定黃酮類化合物含量，計算提取率。

總黃酮提取率：Y(%)=[(C×V×D/W)×1000]×100%

式中：C一提取液中蘆丁的濃度（g/mL）；V一抽濾后獲得的各浸提樣本的總體積（mL）；D一稀釋倍數；W一稱取的茶葉粉末質量（g）；1000一濃度單位換算（g→mg）。

2 結果與分析

結果顯示，不同因素對黃酮成分提取率的影響次序不同，可依次排為：提取溫度C＞液料比A＞超聲時間D＞C2H5OH濃度B。最佳方案為：A4B3C1D3，即液料比50∶1（mL∶ g），C2H5OH濃 度 80%，提取溫度60 ℃，超聲時間25 min。因該實驗在前面從未做過，需進一步對此進行驗證，結果如下：提取率分別 是 18.65%、18.67%、18.70%、18.75%、18.78%，得到信陽毛尖茶葉中黃酮提取率平均值為18.71%，相對標準偏差為0.05%。

3 結論

通過對信陽毛尖茶葉采取正交試驗方法，以獲取信陽毛尖中黃酮類成分的含量，目的是達到確定最優提取條件。通過實驗獲得：選取因素的主次關系分別是提取溫度＞液料比＞超聲時間＞C2H5OH，最佳條件：提取溫度60 ℃、C2H5OH濃度80%、液料比50∶1（mL ∶ g）超聲時間25 min，諾麗果中黃酮提取率為20.75 mg/g。結果證明信陽毛尖茶葉中黃酮類成分含量豐富。