探究膠體金免疫層析技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

□ 鄭 韻 李建美 重慶輕工職業(yè)學(xué)院食品藥品系

1 膠體金免疫層析技術(shù)概述

膠體金免疫層析技術(shù)是一種有效結(jié)合膠體金標(biāo)記、免疫檢測(cè)和層析分析等技術(shù)為一體的免疫檢測(cè)固相標(biāo)記技術(shù)，在20世紀(jì)80年代得到發(fā)展。膠體金免疫層析技術(shù)作為一種應(yīng)用形式，是利用抗原抗體反應(yīng)和免疫金標(biāo)記技術(shù)的相互結(jié)合，它是以條帶狀在膜上固定特異性的抗體或抗原，使在層析條上的樣品溶液依靠毛細(xì)作用產(chǎn)生泳動(dòng)，使樣品中的待測(cè)物和待測(cè)物在層析材料上的抗原或抗體等受體發(fā)生親和性與特性較高的免疫反應(yīng)，在層析的過程中材料的檢測(cè)帶通過截留或富集免疫復(fù)合物，通過直接使用或酶促顯色反應(yīng)可對(duì)著色標(biāo)記物進(jìn)行目測(cè)，在5～10 min內(nèi)可直接獲取試驗(yàn)結(jié)果[1]。所以在檢測(cè)激素、核酸、蛋白質(zhì)、藥物、毒素及殺蟲劑等時(shí)都對(duì)膠體金的成本和交叉反應(yīng)較低，靈敏、快速等的特征進(jìn)行了廣泛的應(yīng)用。

2 膠體金免疫層析技術(shù)的特點(diǎn)

2.1 具有較廣的檢測(cè)范圍

該技術(shù)既可以對(duì)食品中的農(nóng)藥、獸藥殘留及微生物和真菌毒素進(jìn)行檢測(cè)，還可快速診斷動(dòng)物的疫病，在許多領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用。

2.2 操作過程相對(duì)簡(jiǎn)單

該技術(shù)操作比較簡(jiǎn)單，不涉及大型的設(shè)備儀器，只用簡(jiǎn)單地對(duì)檢測(cè)樣品進(jìn)行處理，便可直接觀察到檢測(cè)結(jié)果，不用具備較強(qiáng)的專業(yè)知識(shí)也可操作。

2.3 具有較高的檢測(cè)靈敏度

該技術(shù)大部分使用單克隆抗體進(jìn)行標(biāo)記，只對(duì)抗原決定簇有親和性和特異性，靈敏度較高，當(dāng)前市面上的檢測(cè)膠體金的卡已經(jīng)達(dá)到1.0 ng/mL的靈敏度。

2.4 便于現(xiàn)場(chǎng)攜帶

使用膠體金對(duì)蛋白進(jìn)行標(biāo)記在物理上是一種吸附過程，基本上不會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)的活性造成破壞，因此膠體金試紙條具有良好的穩(wěn)定性。另外，膠體金檢測(cè)卡質(zhì)量和體積都較小，在現(xiàn)場(chǎng)便于攜帶和檢測(cè)。

2.5 可以安全的使用

相比于酶的標(biāo)記、放射性同位素和熒光素等技術(shù)，環(huán)保膠體金技術(shù)所用的試劑有較低的毒性，不會(huì)傷害操作者和對(duì)環(huán)境造成污染，具有其他檢測(cè)技術(shù)無可比擬的安全性能。

3 膠體金免疫層析技術(shù)在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用

3.1 在食品有害微生物中的檢測(cè)

食品安全質(zhì)量不過關(guān)，主要是由于食品中有害微生物出現(xiàn)超標(biāo)的情況，食品中常見的致病菌主要包括布氏桿菌、大腸桿菌、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌等。在檢測(cè)食品中的致病微生物時(shí)，最常使用的方法是生物鑒定分離法，但這種方法操作過程繁雜，其靈敏度和特異性也相對(duì)較差，并且在提前預(yù)防和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)中也只發(fā)揮有限的作用。膠體金免疫層析技術(shù)可以解決這些問題，達(dá)到快速檢測(cè)食品中的致病微生物的目的。

3.2 食品中生物毒素、農(nóng)藥獸藥殘留物的檢測(cè)

許多食品中都含有農(nóng)藥、生物毒素等威脅人類健康的殘留，食品中的獸藥和農(nóng)藥等殘留物通常屬于半抗原體的一種小分子物質(zhì)，在制備抗體中的人工抗原時(shí)需要偶聯(lián)其和大分子蛋白。如作為黃曲霉菌和寄生曲霉菌二次代謝的產(chǎn)物，黃曲霉毒素B1是一種致癌物，具有非常強(qiáng)的毒性，其理化性質(zhì)比較穩(wěn)定，會(huì)嚴(yán)重污染食品，在較大程度上威脅人體健康。相關(guān)專家在2005年在檢測(cè)食品中黃曲霉毒素B1時(shí)就是采用的競(jìng)爭(zhēng)免疫層析技術(shù)，把抗AFB1單克隆抗體當(dāng)作金標(biāo)抗體，檢測(cè)帶和質(zhì)控帶分別為黃曲霉毒素B1-牛血清蛋白和羊抗鼠IgG，最終獲得試紙條[2]。

3.3 食品中違禁藥物的檢測(cè)

部分食品經(jīng)營者為了獲得最大的利益，不顧國家相關(guān)法律法規(guī)，為了達(dá)到成功吸引食用者購買的目的，在湯料、調(diào)料等食品中加入一些違禁藥物（如罌粟殼等），極大地危害了食用者的身體健康。罌粟殼的成分主要包括罌粟堿、嗎啡、可卡因等，在判斷食品中是否有罌粟殼等時(shí)，可以通過對(duì)罌粟堿、嗎啡等含量的檢測(cè)確定。組成罌粟殼的成分大多屬于一種小分子物質(zhì)，所以可采取類似于農(nóng)藥的檢測(cè)方法進(jìn)行檢測(cè)。制備膠體金時(shí)采用檸檬酸三鈉還原法，并對(duì)使用膠體金標(biāo)記方法對(duì)牛肉和豬肉中進(jìn)行檢測(cè)時(shí)其中的磺胺二甲嘧啶檢測(cè)上限控制為20 μg/kg，在對(duì)牛奶和豬肉樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)有效的運(yùn)用該方法和高效液相色譜法，在試條檢測(cè)范圍內(nèi)可獲得和HPLC相一致的結(jié)果，在10 min內(nèi)便可完成這一檢測(cè)。

4 結(jié)語

免疫膠體金技術(shù)作為一種新型的標(biāo)記技術(shù)，簡(jiǎn)單、快速、無污染，具有良好的檢測(cè)效果，運(yùn)用該技術(shù)可以快速的檢測(cè)食品的衛(wèi)生和質(zhì)量安全，為人民群眾的食品安全提供良好的保障。