肉蓯蓉中活性物質體外抗氧化活性研究進展

張 青，夏美茹，孫志惠

（內蒙古河套學院農學系，內蒙古臨河 015000）

肉蓯蓉始載于《神農本草經》，享有“沙漠人參”之美譽，為列當科肉蓯蓉屬多年生草本植物，多寄生于藜科梭梭屬植物的根部，主要分布于歐洲、亞洲溫暖的干燥地區，我國的肉蓯蓉主要分布于內蒙古（阿拉善盟、巴彥淖爾市）、新疆、甘肅等地。從20世紀80年代至今，國內外學者對肉蓯蓉的化學成分及生物活性進行了深入研究并取得較大的成績，已從中分離到苯苷類、環烯醚萜類及其苷類、木質素、黃酮類等活性成分，其具有益腎壯陽[1]、通便潤腸[2]、保護肝臟[3]、免疫調節[4]、抗衰老[5]、抗腫瘤、提高學習記憶力[6]、抗骨質疏松[7]、促進創傷愈合、保護缺血心肌、改善微循環等作用。從肉蓯蓉活性物質、體外抗氧化活性評價方法及抗氧劑的應用等方面介紹了近年來肉蓯蓉活性物質的研究進展。

1 肉蓯蓉抗氧化活性物質

1.1 苯乙醇苷類

苯乙醇苷化合物具有較強的生物活性和顯著的藥理活性特性[8]。從肉蓯蓉中共分離鑒定出苯乙醇苷類61個[9]，包括肉蓯蓉苷、松果菊苷、毛蕊花糖苷、類葉升麻苷、異類葉升麻苷、紅景天苷等。屠鵬飛等人[10]研究肉蓯蓉成分，結果表明其主要的活性成分是苯乙醇總苷（主要指標性成分是松果菊苷和毛蕊花糖苷），苯乙醇總苷是肉蓯蓉質量控制的主要檢測指標。曾克武等人[11]利用線栓法制備大鼠大腦中動脈阻斷模型，考查肉蓯蓉苯乙醇苷的腦保護作用，結果表明，從靶點源頭上解釋了肉蓯蓉苯乙醇苷發揮抗癡呆、緩解疲勞、抗腫瘤、免疫調節等諸多作用的潛在藥理機制。

1.2 環烯醚萜及其苷類

環烯醚萜類化合物具有多種生物活性[12]，從肉蓯蓉中共分離鑒定出環烯醚萜及其苷類25個[9]。京尼平苷酸又稱梔子苷酸，是一種環稀醚萜葡萄糖苷，具有消炎利膽等功效成分，因此在臨床上用于降血壓、止痛、鎮靜等。李莉等人[13]采用高效液相色譜法對肉蓯蓉中京尼平苷酸的含量進行測定，結果表明在5.0～100.0 μg/mL 范圍內線性關系良好 （R=0.999 9），平均回收率在95%～101%，RSD為0.55%～1.95%。

1.3 黃酮類

黃酮類化合物具有重要的生物活性，王慧[14]研究發現黃酮類化合物具有抗腫瘤、抗心血管疾病、抗氧化、抗衰老、抗菌、抗病毒、免疫調節等作用，徐常永等人[15]采用大孔吸附樹脂對肉蓯蓉總黃酮的吸附作用，通過吸附試驗和正交試驗得到肉蓯蓉總黃酮分離純化較佳的工藝條件，分離純化前后總黃酮的質量分數由6.63%提高到72.35%。

1.4 其他

目前，國內外的專家和學者已從肉蓯蓉中已分離并鑒定出100種以上化學成分和微量元素，除上述成分外，還有木脂素及其苷類、多糖、生物堿、烴類、氨基酸類、菇類、揮發性成分、無機微量元素等成分。

2 肉蓯蓉活性物質體外抗氧化活性的評價方法

2.1 肉蓯蓉活性物質對DPPH·清除率評價方法的研究

DPPH·（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）在517 nm處有最大吸收峰，是一種較為穩定的自由基，因其穩定性好、靈敏度高、設備要求不高而成為檢測抗氧化能力首選。DPPH·的醇溶液呈深紫色，當自由基清除劑存在時，其吸收逐漸消失即顏色變淺，它的褪色程度與自由基清除劑接受的電子數成定量關系。DPPH·清除率最常用的檢測方法是分光光度計法，還可用高效液相色譜、電子核磁共振、薄層層析等技術進行檢測。肖星輝等人[16]采用乙醇-鹽雙水相萃取法對荒漠肉蓯蓉總黃酮的體外抗氧化性進行研究。結果表明，荒漠肉蓯蓉總黃酮對DPPH·具有有效的清除作用，其對DPPH·清除率最高可達91.8%，具有較好的抗氧化活性。王國衛等人[17]通過試驗表明肉蓯蓉多糖對DPPH·的清除能力與其濃度呈正相關,且清除能力大于抗壞血酸。

2.2 肉蓯蓉活性物質對羥基自由基清除率評價方法的研究

羥基自由基（·OH） 在510 nm處有最大吸收峰，是氧化能力較強的自由基，可與體內的脂肪等有機物大分子發生連續反應，引起機體損傷。抗氧化劑用量與·OH清除能力成正比，一般以水楊酸作為捕捉劑?！H清除率最常用的檢測方法是紫外可見分光光度法，目前還可用熒光法、電子自旋共振法、化學發光法、高效液相色譜法等方法。肉蓯蓉活性成分具有清除·OH的能力，肖星輝等人[16]研究荒漠肉蓯蓉總黃酮對·OH的體外抗氧化性，結果表明，荒漠肉蓯蓉總黃酮可以有效清除·OH，其對·OH清除率最高可達35.9%。宋陽[18]采用熒光法對肉蓯蓉中黃酮類化合物抗氧化性進行測定，其對·OH清除率為91.5%，結果表明肉蓯蓉中黃酮類化合物具有很強的抗氧化性。王國衛等人[17]通過試驗表明肉蓯蓉多糖對·OH有良好的清除作用，且隨濃度增大而增大。

2.3 肉蓯蓉活性物質對ABTS+·清除率評價方法的研究

ABTS[2,2′-聯氮雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二銨鹽]在414 nm或734 nm處有最大吸收峰，具有還原性，易被氧化成相對穩定的藍綠色水溶性ABTS+·，ABTS+·與抗氧化劑反應后溶液褪色，褪色越強，吸光度越低。溶液退色程度與溶液的抗氧化能力成正比。黃靖等人[19]采用超聲酶法對肉蓯蓉多糖ABTS+·的清除能力的測定，通過試驗表明在50～1 000 mg/L范圍內，肉蓯蓉多糖鋅配合物對ABTS+·的清除能力高于肉蓯蓉精制多糖；當質量濃度為1 000 mg/L時，肉蓯蓉多糖鋅配合物對ABTS+·清除率達到36.83%。

2.4 肉蓯蓉活性物質其他體外抗氧化活性的研究方法

肉蓯蓉活性成分除了以上體外抗氧化研究方法外，還常用到總還原力測定（鐵氰化鉀法）、氧自由基吸收量的測定、抗氧化當量的測定、超氧自由基（O-2·） 清除能力的試驗等體外抗氧化研究方法。

3 結語

近年來，專家學者們對肉蓯蓉抗氧化活性進行了大量的研究，結果表明肉蓯蓉在體內外可清除各種自由基，提高機體內抗氧化酶的活性[20]，體外抗氧化活性是用以評價抗氧化劑抗氧化活性的一種快速、簡便、靈敏可行的方法[21]。肉蓯蓉作為一種傳統中藥材，多年來的試驗研究表明，肉蓯蓉有重要的藥用價值和經濟價值，根據肉蓯蓉所具有的藥理作用等已研制出肉蓯蓉產品有蓯蓉總苷膠囊、蓯蓉四倍丸[22]、復方蓯蓉益智膠囊[23]等用于臨床應用。

據阿拉善盟科技技術局獲悉，從2014年正式啟動了荒漠肉蓯蓉申報新食品原料項目工作；2018年1月，國家衛計委下發通知公開征求意見，將肉蓯蓉（荒漠）、黨參等9種物質增補一批既是食品又是中藥的物質進入食藥物質目錄，阿拉善荒漠肉蓯蓉被列入擬重點研究的物質名單要求荒漠肉蓯蓉試生產2年。未來可以通過一定的加工技術、微生物技術等來實現肉蓯蓉有效成分的工業化生產，滿足實際需要，解決資源破壞和浪費問題。因此肉蓯蓉可以借鑒之前藥品的開發經驗發展保健類食品，其開發方面具有著廣闊的前景。