貴州省水城某肉牛場支原體肺炎診治

張濤劉鏡楊莉余波,徐景峨陳堯貴吳位珩*

（1，貴州宏宇畜牧技術發展有限公司 550005；2，貴州省畜牧獸醫研究所 550005；3，貴州省六盤水市水城鐘山區生態文明建設局 553000）

隨著扶貧攻堅的開展，貴州畜牧業得到有效發展，貴州省肉牛引進量不斷增大，但也帶來了一系列流行病感染問題，極大的影響和威脅著我省牛養殖業的健康發展。牛支原體 （Mycoplasma bovis） 屬軟皮綱 （Mollicutes）， 支原體目（Mycoplasmatles），是一類沒有細胞壁、介于細菌和病毒之間的最小原核微生物，主要引起牛的肺炎、關節炎、角膜結膜炎等疾病，同時也是引起牛運輸綜合癥的主要病因之一[1]。牛支原體病的發生和流行在我國各地區均有報道，貴州省水城某肉牛場2017年就發生了一起牛支原體病，在項目組的指導下，該場牛支原體病得到了有效的防治，取得了較好的效果，現將具體情況匯報如下。

1 發病情況

2017年6月，貴州省水城的某肉牛場因從云南某地引進的能繁育母牛發生疾病，該場共有牛116頭，其中發病24頭，發病嚴重的牛表現食欲廢絕，反芻遲緩，倒地不起，畜主根據臨床癥狀和養殖經驗，采用解磷定進行中毒的治療，結果未見好轉，死亡6頭。故畜主報告當地前獸防站工作人員，并無菌采集的死亡牛組織樣本 （肺、心、肝、脾、腎、淋巴結等）到貴州省畜牧獸醫研究所求診，根據到牛場進行實地病牛臨床癥狀觀察，結合實驗室診斷，確診為牛支原體病，并指導該場進行了牛支原體的治療與預防，使該場的疾病發生和流行得到有效控制。

2 臨床解剖癥狀

對發病肉牛進行臨床癥狀觀察，病牛體溫在39～41℃，精神不振，食欲減退，呼吸急促，伴有氣喘、咳嗽，夜間咳嗽加重，流涕；感染病嚴重肉牛食欲廢絕，明顯消瘦，毛被粗亂無光澤，最后倒地不起，引起死亡。死亡牛關節腫大，眼結膜明顯發炎，并有膿液或分泌物，病死牛肺樣進行病理解剖觀察，肺間質增生，肺尖葉、心葉積膿，有干酪樣壞死樣。根據臨床癥狀和病理解剖觀察，初步診斷為牛支原體病。

3 實驗室診斷

3.1 試劑

10%精氨酸溶液：將10g精氨酸粉劑榮樂80ml無菌水中，完全溶解后加水定容至100ml，0.22μm濾膜過濾后，4℃保存備用。

PPLO液體培養基：葡萄糖2.5g，PPLO肉湯粉10.5g，酵母粉2.5g，蒸餾水445ml，116℃滅菌20min，冷卻后加馬血清 50ml， 10%精氨酸 5ml， 10×MEM 5ml， 8萬單位/ml青霉素溶液5ml，1%酚紅溶液500μl，4℃保存備用。

PPLO固體培養基：葡萄糖2.5g，PPLO肉湯粉10.5g，酵母粉2.5g，蒸餾水440ml，116℃滅菌20min，冷卻后加馬血清 50ml， 10%精氨酸 5ml， 10×MEM 5ml， 8萬單位/ml青霉素溶液5ml，鋪置平板，4℃保存備用。

3.2 病原學分離培養與鑒定

將采集的感病肉牛肺樣于無菌環境下接種于PPLO液體培養基，置于37℃，5%的CO2的細胞培養箱中，恒溫培養3～4d，選取培養基由紅色變為澄清、透亮的淡黃色培養菌株，用接種針在PPLO固體平板上劃線培養。3～4d后于顯微鏡下觀察可見菌落呈 “煎雞蛋”特征，表面光滑，邊緣整齊。通過實驗室診斷，結合臨床癥狀和病理解剖，可以確診為牛支原體肺炎。

4 防治

4.1 預防措施

預防和控制牛支原體病有一些操作規則，每個牧場應嚴格遵循。

4.1.1 嚴格引進新牛

要挑選皮毛富有光澤，體溫正常，精神狀態良好，食欲旺盛，活動靈活的牛。引進的犢牛，除具有上述條件，最好挑選體重超過150kg，犢牛斷奶至少超過60d，符合以上標準的犢牛才能夠引進。起運前，要嚴格控制水和草料飼喂適量，或在飼喂30min后按每千克體重給每頭犢牛注射1mg氟苯尼考注射液。在運輸過程，避免牛畜過于擁擠，同時可飼喂適量清水。牛達到目的地后須進行充分休息，可先飼喂適量玉米粥 （即按1kg玉米面添加4kg溫開水，再添加少量的鹽分），接著飼喂足夠的青綠飼草。對新進來的牛進行監控和隔離，并且檢測其是否感染支原體。

4.1.2 加強飼養管理

保證良好的衛生環境非常重要，牛舍保持干燥、清潔、通風良好，注意防寒保暖。特別是墊料的衛生應該非常注意，定期對肉牛場的設施及設備進行清潔[2]。定期進行消毒，圈舍可定期噴灑10～20%的石灰乳或者20～25%的草木灰進行消毒，也可以撒布適量的干石灰粉或者草木灰。控制飼養密度適宜，防止過于擁擠。不同來源及不同年齡的肉牛要采取分欄飼養。飼喂品質優良的飼料，補充適量的精料、微量元素和維生素，確保日糧含有全面、均衡的營養，增強機體抵抗力。

4.2 治療

由于支原體沒有細胞壁，支原體對磺胺類和β-內酰胺類藥物不敏感，賀晨飛等[3]通過牛支原體體外藥物敏感性分析篩選到臨床上對該病的治療藥物為達氟沙星、林可霉素和阿奇霉素。此外，可選擇使用牛支原體呈高敏的抗菌藥，如泰妙菌素、泰樂菌素、氟苯尼考等，同時可補充多種維生素，口服或肌肉注射或輸液，補充10%葡萄糖。由于大多數的肉牛支原體病伴有多病原混合感染現象出現，治療時可以采用四環素、慶大霉素、地塞米松合并用藥，同時補充10%葡萄糖和VC，用藥5～7d一個療程。

5 討論

據報道，牛支原體已在多個國家引起牛呼吸道疾病并造成了一系列的經濟損失。我國于2008年首次從患肺炎的犢牛肺臟中分離并鑒定得到牛支原體[4]。通常檢測牛支原體主要結合形態觀察、分子生物學方法 （PCR、熒光定量PCR技術等）、血清學方法 （ELISA、IHA等）[5]。近年來，隨著畜牧業的發展，地方養殖場對優質品種肉牛的引進，牛支原體報道也逐漸增多，由該病帶來的經濟損失也是巨大的[7]。牛支原體是牛呼吸疾病綜合征 （Bovine respiratory disease complex,BRD）的主要病因之一，部分病牛伴有關節炎、結膜炎、生殖道炎等多種疾病[7]。任何年齡階段的牛均可感染牛支原體病，2～6月齡的犢牛最易感染。牛支原體主要通過直接接觸或經呼吸道、生殖道、泌乳等途徑進行傳播。運輸應激是牛支原體肺炎的重要誘導因素，可引發一系列非特異性病理反應，造成較大的發病率和死亡率，給養殖戶造成嚴重的經濟損失[8]。

貴州省具有發展養牛業的豐富資源及養殖環境，牛支原體病勢必威脅養牛業健康快速發展，對該病的控制遵循 “早診斷，早治療”原則；在條件允許下，減少牛種引進，堅持“自繁自養原則”，避免應激反應或引入病原；加強飼養管理，保證圈舍具有干燥、清潔和良好的通風條件，并定期對圈舍進行消毒和殺菌。同時，研制并開發有效的診斷試劑盒和獸用中藥來防控牛支原體病，使養牛業健康和穩定的發展。

參考文獻：

[1]石磊,牛支原體肺炎病原的鑒定、診斷和疫苗的初步研究[D].華中農業大學,2010.

[2]郭雨絲,陳穎鈺,趙剛,郭愛珍.牛支原體病研究進展[J].中國奶牛,2015(14):36-40.

[3]賀晨飛,Riaz Mustafa,陳穎鈺,等.牛支原體體外藥物敏感性分析[J].中國奶牛,2015(16):32-35.

[4]幸九慶,李月媛,郭丹,等.國內首次從患肺炎的犢牛肺臟中分離到牛支原體[J].中國預防獸醫學報,2008,30(9):661-664.

[5]莊金秋,梅建國,劉吉山,姚春陽.牛支原體實驗室檢測方法研究進展[J].中國草食動物科學,2016,36(5):58-61.

[6]石磊,龔瑞,尹爭艷,等.肉牛傳染性牛支原體肺炎流行的診斷[J].華中農業大學學報,2008,27(5):629-633.

[7]Tony J,Vanden Bush,Ricardo F,et al.Characterization of the immune response to Mycoplasma bovies lung infection[J].Veterinary Innunology and Immunopathology,2003,94:23-33.

[8]韓瑾瑾,賀從,呂國棟,等.肉牛運輸應激綜合征的診治[J].畜牧與飼料科學,2010,31(5):179-180.