新生兒支氣管肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1與支氣管肺發育的關系

程林 張應金 黃冠芬 張金風

BPD又稱慢性肺疾病(CLD), 是早產兒最常見的長期并發癥之一。BPD成為早產兒疾病和死亡的重要原因之一, 同時BPD還成為新生兒住院時間延長、再住院、神經發育障礙的重要病因, BPD越來越受到關注［1］。但BPD的發生機制尚不完全清楚, 影響該病的診治［2］。最新的研究顯示, 肺纖維化是BPD發生發展的重要病理表現, 理論上尋找肺組織纖維化的早期預測因子, 指導疾病的治療, 可以改善患兒的預后［3］。本次研究嘗試檢測新生兒支氣管肺泡灌洗液中VEGF、IL-8、TGF-β1水平, 探討其與支氣管肺發育之間的關系, 尋找支氣管肺發育不良的臨床預測因子, 為支氣管肺發育不良的早期干預及治療提供可靠的理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月～2018年1月收治的30例早產BPD新生兒作為BPD組, 另選同期30例早產非BPD新生兒作為對照組。支氣管發育不良診斷標準：于糾正胎齡36周或出院時有呼吸急促, 三凹征、啰音, 仍需氧療, 且有典型的胸部X線表現如網狀、囊泡狀及纖維化等情況。納入標準：①胎齡27～32周, 早產；②臨床資料完整；③家屬知情同意。排除標準：①患有先天性缺陷或遺傳代謝?。虎诩覍倬芙^參與研究；③出生后72 h內死亡；④接受過促胎肺成熟治療；⑤除BPD外無全身感染等嚴重并發癥(僅BPD組有BPD, 對照組亦無BPD)。BPD組中男16例、女14例,胎齡27～32周, 平均胎齡(30.1±1.6)周。對照組中男17例、女13例, 胎齡27～32周, 平均胎齡(30.4±1.6)周。兩組新生兒性別、胎齡等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法 留取標本：兩組新生兒出生后7、14、21、30 d采用非纖維支氣管鏡支氣管肺泡灌洗法(bronchoalveolar lavage,BAL)吸取肺泡灌洗液, 離心處理(4℃, 500 r/min, 10 min)取上清, 置-80℃冰箱備用。肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1測定： 取兩組肺泡灌洗液標本, 以ELISA進行肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1含量測定。

1.3 觀察指標 比較兩組出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1水平, 觀察BPD組不同時間的各指標水平變化情況。

1.4 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件進行數據分析。計量資料以均數±標準差()表示, 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 VEGF水平 BPD組出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中 VEGF水平分別為 (0.39±0.16)、(1.84±0.22)、(2.98±0.21)、(1.86±0.34)μg/L, 對照組則為 (0.32±0.15)、(0.63±0.21)、(0.50±0.17)、(0.46±0.15)μg/L。兩組出生后 7 d的 VEGF 水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)；BPD組出生后14、21、30 d的VEGF水平高于對照組(P＜0.05)；BPD組出生后VEGF水平呈先上升后下降趨勢, 相鄰時間指標水平比較差異具有統計學意義(P＜0.05)。

2.2 IL-8水平 BPD組出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中 IL-8水平分別為 (27.5±4.5)、(36.3±4.2)、(61.4±8.2)、(56.7±9.1)μg/ml, 對照組則為 (19.3±5.1)、(18.4±4.5)、(8.5±6.1)、(19.6±5.4)μg/ml。BPD 組 出 生 后 7、14、21、30 d 的IL-8水平高于對照組(P＜0.05)；BPD組出生后IL-8水平呈先上升后下降趨勢, 相鄰時間指標水平比較差異具有統計學意義 (P＜0.05)。

2.3 TGF-β1水平 BPD組出生后7、14、21、30 d肺泡灌洗液中 TGF-β1分別為 (36.1±4.2)、(44.2±9.1)、(54.4±10.2)、(43.1±9.5)μg/ml, 對照組則為 (30.6±4.0)、(32.3±3.6)、(32.3±3.5)、(31.6±5.1)μg/ml。BPD 組 出 生 后 7、14、21、30 d 的TGF-β1水平高于對照組(P＜0.05)；BPD組出生后TGF-β1水平呈先上升后下降趨勢, 相鄰時間指標水平比較差異具有統計學意義(P＜0.05)。

3 討論

VEGF是調節肺組織發育的關鍵因子, 具有調節肺血管發育、肺組織損傷修復。IL-8是一個重要的炎性介質和免疫調節因子, 其與肺損傷疾病、持續存在的炎癥反應關系密切。TGF-β1在細胞的生長、分化、免疫調節及細胞外基質合成調節中具有重要作用, 致纖維化作用最突出, 在肺纖維化的發生和持續過程中均發揮重要作用［4］。

本次研究顯示, 相較于未發生BPD的對照組, BPD組出生后 14、21、30 d的 VEGF、IL-8、TGF-β1均明顯偏高 , 三者的峰值分別達到 (2.98±0.21)μg/L、(61.4±8.2)μg/ml、(54.4±10.2)μg/ml, 提示BPD患兒存在明顯的纖維化、血管病變、炎癥反應。其他學者也得出類似的研究, BPD對象的相關指標與正常早產兒差異顯著, 指標惡化［5,6］。但需要注意的是, 指標與本次研究存在一定的差異, 這可能與納入標準、治療方式、疾病嚴重程度差異有關。如一項研究顯示, 急性期的BPD患兒肺泡灌洗液中的高遷移率族蛋白B1(HMGB1)水平為 (7.35±0.56)μg/ml［7］。一項因素分析顯示 , BPD 影響因素眾多, 與羊水污染、肺表面活性物質、機械通氣、胎齡關系密切, 治療方式對BPD發生、嚴重程度關系密切［8］。從本次組內對比來看, BPD組患者的指標呈快速上升趨勢,提示BPD一旦發生, 會出現持續進展情況, 通過監測指標的變化, 一定程度上可以判斷疾病發生進展的風險［9,10］。

需要注意的是, BPD組與對照組出生后7 d的VEGF水平差異無統計學意義(P＞0.05), 這可能與樣本例數較少有關,也可能與血管病變在BPD早期不顯著有關。BPD早期主要表現為肺泡數目減少、體積增大、結構簡單化。監測VEGF可能更有助于判斷疾病嚴重程度與進程。

總之, 新生兒支氣管肺泡灌洗液中VEGF、IL-8和TGF-β1水平與支氣管肺發育關系密切, 監測這些指標可用于疾病風險預測、診斷、嚴重程度判斷、疾病階段分析。今后需要進一步擴大樣本量, 明確指標變化范圍。