復方分子探針及其顯像

唐剛華

(中山大學附屬第一醫院 廣東省醫用放射性藥物轉化應用工程技術研究中心和核醫學科，廣東 廣州 510080)

高度特異和靈敏度的分子影像學技術，特別是正電子發射斷層(PET)顯像是實現精準診療的基礎，但其離不開精準分子探針的研發。[18F]氟代脫氧葡萄糖([18F]FDG)已廣泛應用于腫瘤早期診斷和指導治療，屬于非特異性PET藥物，亦稱顯像劑或分子探針，在某些腫瘤中攝取較低，而在炎癥組織和某些良性組織中攝取較高，容易造成假陽性和假陰性的PET檢查結果[1]。聯合用多種分子探針顯像和多靶向偶合分子探針顯像，可彌補[18F]FDG的不足，顯著提高顯像的靈敏度、特異性和準確性[2]。但在探針制備、輻射安全和偶合配體特異性結合方面存在諸多不利因素。復方中藥制劑和西藥制劑可克服單體制劑的某些缺陷，已在臨床中得到廣泛應用，是研發新藥的重要發展方向[3-4]。目前有關復方分子探針的概念和構建尚無文獻報道，特別是尚無復方放射核素治療藥物的研究報道。“復方分子探針及其顯像”具有廣泛適用性和實用性，可克服[18F]FDG PET、聯合用分子探針顯像和多靶向偶合分子探針顯像存在的弊端，解決現有分子顯像靈敏性和特異性方面關鍵性科學問題。因此，本文作者首次提出了“復方分子探針及其顯像”的概念模式[5]，并對復方分子探針制備以及復方分子探針顯像潛在應用價值進行闡述，為進一步開展腫瘤精準診療奠定基礎。

1 “復方分子探針”概念的理論依據

新藥研發的長周期、高成本、高風險和低成功率一直困擾著制藥工業的發展，以單靶點直接對抗治療為代表的新藥研發模式面臨著嚴峻的挑戰。涉及多靶點、 多機制的聯合用藥干預治療已在治療領域中成為公認的治療方案， 是固定劑量復方藥物的重要前提和必要條件[3-4]。復方藥物是指為了實現整體最佳的療效目標，綜合多種治療原則和作用機理所開發的由多個化合物或化合物群配伍組成的治療藥物[3]。中藥就是由小分子化合物群(配伍的藥材或組分、成分)組成的復方藥物。近年來，很多西方研究者和國際制藥公司借鑒中藥的優勢和特點，研發西藥復方藥物。以雞尾酒療法為代表的多聯藥物治療所取得的重要成果也激勵研究者對西藥復方藥物的強烈興趣[3]。目前，復方藥物包括中藥復方藥物、西藥復方藥物(化學藥復方藥物)和中西藥結合復方藥物。復方藥物一般具有以下特點：(1) 復方藥物是由多個成分或多個組分或多個化合物組成的化合物群；(2) 組成復方藥物的多個成分或化合物具有一定的配伍作用和配比關系；(3) 復方藥物涉及多種治療原則和作用機理的整體療效最佳方案[3]。可見，復方藥物并不是多種成分或者多種組分的簡單組合，而是能夠體現多成分或多化合物配伍之后協同/相加(增效)性、互補性、減毒性方面的綜合優勢，且其質控標準應能夠保證藥物質量的穩定性和均一性[3-4]。近年來，復方藥物已得到歐美國家批準上市，國際上對復方藥物的廣泛認同已是大勢所趨，復方藥物必將在藥物創新過程占據越來越重要的地位。鑒于復方藥物的重要性，研發復方分子探針迫在眉睫。復方藥物研發思維體系為“復方分子探針”概念奠定了理論基礎。

2 復方分子探針概念及其顯像的原理

復方藥品(藥物)制劑已廣泛用于疾病治療，但復方分子探針尚無文獻報道。聯合用分子探針顯像和多靶向偶合分子探針顯像，能夠克服單一分子探針(如[18F]FDG)的局限性，是當前分子影像學重要發展方向。但是，聯合用多種分子探針顯像需要分次制備不同分子探針，需要多次顯像，不僅操作繁瑣、耗時、耗資，而且會增加患者和工作人員放射性照射的風險；多靶向偶合分子探針顯像是使用修飾多個配體的單分子探針成像技術，可克服多種分子探針聯合應用的某些缺陷，但需要采用較復雜的化學修飾法制備偶合含多個配體的分子探針[2]，且偶合分子探針中各配體不能自由結合其相應特異性靶點。因此，首次提出了“復方分子探針及其顯像”的新概念模式[5]。

代表性復方分子探針顯像與單分子探針顯像基本原理比較示于圖1。根據病變組織存在不同靶點，設計構建具有功能互補配伍作用和合適配比的兩種及以上單分子探針(如探針1、探針2和探針3)，經不同合成方法制備含多種單分子探針的單一制劑，即復方分子探針(如探針1+探針2+探針3)。用復方分子探針對病變組織不同靶點行同時分子顯像，以提高診療準確性的分子影像學技術，稱為復方分子探針顯像。復方分子探針顯像是復方分子探針(如探針1+探針2+探針3)中各探針分別與其相應靶點協同/相加配伍作用的綜合結果，可顯著增加與靶分子結合位點總數，增加靶/非靶攝取比值，能顯示不同腫瘤和更多病灶(如1、2和3)，減少毒性，提高檢測的靈敏度和特異性；而單分子探針顯像是單分子探針(如探針1、探針2或探針3)與其相應靶點單一結合的簡單結果。

復方分子探針包括復方放射性探針和復方非放射性探針。復方放射性探針分為復方單模式放射性探針和復方多模式放射性探針；復方非放射性探針分為復方單模式非放射性探針和復方多模式非放射性探針。復方分子探針的制備方法分為分次合成配制法、一鍋單次合成法和同時平行合成法。分次合成配制法即將在不同時間內分別合成的多種單分子探針，按一定比例配制成復方分子探針。分次合成配制法目前已有文獻報道[6-7]，主要用于聯合用多分子探針的制備。一鍋單次合成法即在同一合成儀中將不同單分子探針前體原料放在同一反應瓶中，經一步或多步法制備復方分子探針，該法目前尚無文獻報道。同時平行合成法即在同一合成儀中將不同單分子探針前體原料放在不同反應器中，按照各自不同合成工藝同時制備相應單分子探針，最后將不同單分子探針按一定比例混合，制成復方分子探針。在同一合成儀中按照不同合成工藝同時制備兩種單分子探針，已有文獻報道[8]，但同時平行合成法制備復方分子探針尚無文獻報道。分次合成配制法和同時平行合成法可用于制備所有復方分子探針，但后者更為簡單，有利于產業化生產。而一鍋單次合成法最為簡便實用，是最具前景的方法。

圖1 復方分子探針顯像和單分子探針顯像基本原理比較Fig.1 Basic principles comparison of compound molecular probe imaging and single molecular probe imaging

3 復方分子探針顯像的重要性

3.1 復方分子探針制備的優勢

為克服[18F]FDG單分子探針顯像的局限性，國外研究者研發了多靶向多模式分子顯像方法，包括聯合用分子探針顯像和多靶向偶合分子探針顯像。聯合用分子探針顯像分為分次給藥多次顯像和單次給藥同時顯像，兩者都需要采用分次合成配制法制備不同單體分子探針。但是，分次給藥多次顯像需要在一天或多天內多次制備多種單分子探針，行多次分子顯像[9]。不僅操作繁瑣、耗時、耗資和增加患者就診費用，而且會增加患者和工作人員放射性照射的風險。研究者開發出單次給藥同時顯像方法，是構建“復方分子探針及其顯像”新概念模式的基礎。分次合成配制法、一鍋單次合成法和同時平行合成法，克服了聯合用分子探針顯像在制備分子探針方面的局限性，能夠在同一時間內同時制備含多種分子探針的復方分子探針；避免多靶向偶合分子探針顯像需要采用復雜化學方法修飾多個配體制備偶合分子探針的弊端。其中，一鍋單次合成法最為簡便實用，為制備多靶向分子探針提供新策略，可解決多靶向偶合分子探針制備的難題。

3.2 復方分子探針的創新性

復方分子探針制劑并非是多種單分子探針的簡單組合，而是將具有一定功能互補和配伍作用的多種單分子探針，經不同化學合成法配制，并按固定配方構建組合成復方分子探針，能對多種不同或異質性病變同時實現多靶向分子顯像。而聯合用分子探針是同時給予了無固定配比的多種單體分子探針混合物，如一次性注射雙示蹤劑[18F]F-和[18F]FDG 行同時PET 顯像檢查腫瘤患者，屬于同時注射或口服兩種(或多種)藥品的“聯合用藥”范疇，本質上不屬于復方分子探針制劑。聯合用分子探針具有無固定配比、需多次生產配制、藥效不穩定不可控、使用不方便等缺陷。復方分子探針是具有功能互補和配伍作用的含固定配比多種單分子探針的單一制劑(單劑)，相當于“復方藥品”。聯合用分子探針是復方分子探針研發的重要前提和必要條件。

目前，新型分子探針研發周期較長、成本較高、回報率低，難以有新的突破性分子探針在短期內上市。另外，原有的許多優良專利分子探針到期，市場競爭將更明顯。可考慮把專利失效或無專利保護的優良分子探針構建研發成復方分子探針，為創制下一代新型分子探針提供了簡單、實用和易推廣的新模式。

3.3 復方分子探針顯像的優勢

若將與[18F]FDG功能互補的PET藥物，或將功能顯像互補和配伍作用的PET藥物，設計構建為復方分子探針，能比[18F]FDG顯示出更多腫瘤和更多病灶，可解決[18F]FDG顯像假陰性問題；若將靶向功能顯像互補和配伍作用的特異性PET藥物，構建制備為特異性復方分子探針，能特異地顯示多種腫瘤和多種病灶，可解決[18F]FDG顯像假陽性問題。復方分子探針顯像有望優于并取代單體[18F]FDG顯像，為其他復方分子探針和復方靶向放射核素治療藥物的研制奠定了理論和實驗基礎，并將取得良好的經濟效益和社會效益。

3.4 多模式復方分子探針的研制與轉化應用

多模式顯像，如單光子發射計算機斷層顯像(SPECT)-CT、PET-x線計算機斷層(CT)、PET-磁共振顯像(MRI)等，將高度靈敏的核醫學顯像技術與具有高分辨率和較低靈敏度的其他影像技術結合起來，推動影像學進入多模式分子影像學時代。但是，使用核素和MRI信號基團(或其他信號基團)多標記同一單分子探針(多模式分子探針)，行多模式同時分子顯像，將面臨巨大挑戰。若將具有功能互補作用或不同靶向作用的放射性藥物和非放射性分子探針制成復方多模式分子探針制劑，實現復方分子探針多模式PET-MRI、SPECT-MRI、PET-SPECT-MRI、PET-超聲顯像、PET-光學顯像，可解決多模式分子探針同時顯像的難題。已報道的聯合用多種單模式分子探針行多模式顯像[10]，為進一步開展復方多模式分子探針顯像奠定了基礎。

4 復方分子探針的制備

4.1 分次合成配制法

設計自動化合成工藝，由不同合成儀(A、B或C)分別自動化生產分子探針1、2、3，將分子探針1、2、3按一定比例配制成復方分子探針，稱為分次合成配制法。由加速器生產18F-以及由FDG合成儀生產[18F]FDG后，配制聯合用雙示蹤劑18F-和[18F]FDG混合物，屬于分次合成配制法，已用于臨床研究[6-7]。分次合成配制法制備聯合用雙分子探針混合物的研究報道較多，主要集中于腦99mTc和123I雙示蹤劑SPECT技術研究[11-15]。Devous等[11]首先配制了99mTc和123I雙分子探針混合物，建立了腦SPECT模型技術，為進一步開展雙探針混合物SPECT奠定了基礎。國外多個研究者配制了不同類型99mTc和123I雙探針混合物，用于模型和猴腦功能SPECT顯像研究，顯示了較好的應用前景[11-15]。另外，國外研究者也配制了Gd-DTPA和[18F]FDG雙探針混合物，用于小動物PET-MRI雙模式顯像研究，為進一步臨床轉化提供了實驗基礎[16]。此外，配制[18F]FDG和Eu3+或氧化銪熒光納米雙探針混合物[10,17-18]以及配制Na131I和量子點納米雙探針混合物[19]也有報道。分次合成配制法已廣泛用于聯合用雙分子探針混合物的制備，為進一步轉化配制復方分子探針奠定了基礎。如果將具有不同靶向作用或具有較大結合容量靶分子的特異性放射性藥物和非放射性分子探針，制成復方分子探針制劑，可解決多模式同時顯像的難題。該法是制備復方分子探針最普遍的方法，但是操作較為復雜、費時。

4.2 一鍋單次合成法

代表性復方分子探針[18F]FDG+[18F]FPA+[18F]NFPGlu制劑的自動化合成工藝示于圖2。將具有類似合成路線的分子探針1、2、3，設計成一種共用合成工藝，其前體按一定質量比混合，經兩步或多步反應以及相同純化方法，在同一合成儀中實現復方分子探針的合成，稱為一鍋單次合成法(圖2)。一鍋單次合成法制備多種分子探針已有文獻報道[20]，但該法制備復方分子探針尚無文獻報道。本研究團隊以三氟甘露糖和2-溴代丙酸乙酯混合物為前體，經親核氟化和水解兩步反應獲得了含兩種PET藥物[18F]FDG和2-[18F]氟代丙酸([18F]FPA)復方分子探針；以三氟甘露糖、2-溴代丙酸乙酯和(N-2-溴代丙酰基)-L-α-谷氨酸二乙酯混合物為前體，經親核氟化和水解兩步反應獲得了含三種PET藥物[18F]FDG、[18F]FPA、(N-2-[18F]氟丙酰基)-L-α-谷氨酸([18F]NFPGlu)復方分子探針[5]；以1,4,7,10-四氮雜環十二烷-1,4,7,10-四乙酸-1-萘丙氨酸-奧曲肽(DOTA-NOC)和三氮雜環九烷基二乙酸基乙酰基-三聚乙醇胺基-β-谷氨酸基-環狀二價精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(NOTA-PEG3-β-Glu-RGD2)混合物為前體，與68GaCl3發生螯合反應，制成了含兩種PET藥物[68Ga]DOTA-NOC和[68Ga]NOTA-PEG3-β-Glu-RGD2復方分子探針；以2β-甲基酯-3β-(4-氟-苯基)去甲基托烷(nor-β-CFT)和6-羥基-2-(4’-氨基苯基)苯并噻唑混合物為前體，與[11C]三氟甲基磺酰甲烷(Triflate-甲烷)反應，制成了含[11C]甲基-N-2β-甲基酯-3β-(4-氟-苯基)托烷([11C]β-CFT)和(4’-N-[11C]甲胺基苯)-6-羥基苯并噻唑([11C]PIB)復方分子探針。該法制備復方分子探針操作簡單。

圖2 一鍋單次合成法制備復方分子探針[18F]FDG+[18F]FPA+[18F]NFPGlu制劑Fig.2 Preparation of compound molecular probe [18F]FDG+[18F]FPA+[18F]NFPGlu by one-pot single synthesis

4.3 同時平行合成法

設計分子探針1、2、3的合成工藝，在同一合成儀中將不同單分子探針前體原料放在不同反應器中，按照各自不同合成工藝同時制備相應單分子探針，最后將不同單分子探針收集在同一產品瓶中，得到復方分子探針，稱為同時平行合成法(圖3a)。同時平行合成法制備兩種單分子探針[11C]膽堿和[11C]蛋氨酸(圖3b)，已有文獻報道[8]，但如何配制其復方分子探針以及行分子顯像尚沒有報道。該法可用多功能合成儀完成多數放射性復方分子探針的自動化合成，比分次合成配制法相對簡單，但比單次合成法更為復雜。

圖3 同時平行合成法(a)在同一合成儀中制備兩種分子探針[11C]膽堿和[11C]蛋氨酸(b)Fig.3 Schematic diagram of the automated system for the simultaneous parallel production of [11C]MET and [11C]Choline (a) by simultaneous parallel synthesis (b)

5 復方分子探針顯像的應用前景

復方分子探針及其顯像應用目前尚無文獻報道。但是，聯合用探針單次給藥同時顯像已有較多文獻報道，主要包括聯合雙探針單次給藥同時顯像[6-7]、聯合雙探針雙模式顯像[11-15]以及聯合雙探針顯像導向治療[21]。聯合用探針單次給藥同時顯像為進一步開展復方分子探針顯像奠定了理論和實驗基礎。

聯合雙探針單次給藥同時SPECT顯像有較多報道。Devous等[11]建立了聯合用雙探針99mTc、123I單次給藥同時顯像技術，用于腦模型SPECT顯像；Brinkmann等[12]進一步證實了該法可靠，為開展聯合用雙探針混合物轉化應用奠定了基礎。在上述基礎上，國外研究者在帕金森病(PD)猴模型體內單次注射雙示蹤劑[99mTc]TRODAT-1(一種多巴胺轉運蛋白顯像劑)和[123I]碘代苯甲酰胺([123I]IBZM)或[123I]碘代苯并呋喃 (多巴胺D2/D3受體顯像劑)同時行SPECT顯像，結果發現，雙示蹤劑與單示蹤劑一樣能觀察多巴胺能突觸前和突觸后結合位點，為評估多巴胺能突觸前和突觸后功能提供了一種簡單可靠方法[13]。Ma等[14]進一步證實了雙示蹤劑[99mTc]TRODAT-1、[123I]IBZM)顯像的可靠性和實用性。另外，研究者也對PD猴模型單次注射了雙示蹤劑[99mTc]TRODAT-1和[123I]ADAM (5-羥色胺轉運蛋白顯像劑)同時行SPECT顯像，結果發現，雙示蹤劑能區分紋狀體多巴胺轉運蛋白和5-羥色胺轉運蛋白，為同時評估 PD猴模型腦內多巴胺能系統和5-羥色胺能系統變化提供了可靠方法[15]。此外，研究者報道了雙探針單次給藥同時PET顯像，對惡性腫瘤患單次注射雙示蹤劑18F-和[18F]FDG 行同時PET-CT 掃描，可同時對腫瘤患者進行骨代謝和葡萄糖代謝顯像，能減少檢查時間和次數，改善患者護理[6-7]。

聯合雙探針雙模式顯像也有研究報道。Liu等[19]配制了Na131I和量子點(QD)納米粒雙探針混合物，以發射β和γ射線的131I為供體和QD為受體,用131I誘發QD發光，首先建立了聯合雙探針混合物的內照射共振能量轉移顯像模式，實現了對活體動物多種放射性誘發量子點光學成像。Sun等[17]制備了[18F]FDG和聚乙二醇化Eu3+熒光納米粒雙探針混合物，建立了[18F]FDG激發稀土Eu3+納米粒的輻照致發光顯像方法，實現了荷瘤模型內照射共振能量轉移PET和熒光雙模式顯像。Hu等[18]在此基礎上設計和構建了放射性藥物激發氧化銪納米粒的熒光顯像方法，成功完成了荷瘤模型PET和熒光雙模式顯像，進一步擴大了放射共振能量轉移顯像研究范圍。國外研究者也配制了Gd-DTPA和[18F]FDG雙探針混合物，用于小動物PET-MRI雙模式顯像研究，明顯優于單模式分子顯像，具有較大應用前景[16]。

術中聯合用多探針顯像導向治療也有研究報道。Tsopelas等[22]研制了與伊文氏藍(EB)具有相同生物學功能的[99mTc]EB，初步臨床研究表明，[99mTc]EB是一種快速鑒別前哨淋巴結(LN)的SPECT顯像劑，聯合使用雙探針[99mTc]EB和EB優于[99mTc]三硫化二銻膠體，并可用于術中導向SLN手術治療。van Leeuwen等[23]配制了由吲哚菁綠(ICG)、專利藍和[99mTc]白蛋白組成的混合物以及由ICG、專利藍和[99mTc]白蛋白膠體組成的混合物，對LN實現了SPECT/光學雙模式顯像，并利用ICG發出熒光和專利藍發出可視化藍光，指導術中LN治療，明顯優于ICG和專利藍混合物光學顯像。Wang等[21]由[18F]AlF-1,4,7-三氮雜環壬烷基三乙酸基(NOTA)-截短型EB([18F]NEB)和伊文氏藍(EB)，構建雙小分子探針混合物，實現了PET/光學雙模式顯像，EB發出可視化藍光可用于術中影像導向LN治療，顯示較好應用前景。

本研究團隊以三氟甘露糖和2-溴代丙酸乙酯混合物為前體，經一鍋親核氟化和在柱水解法獲得了復方分子探針[18F]FDG聯合[18F]FPA，首先利用前列腺癌模型PET顯像驗證了[18F]FDG聯合[18F]FPA明顯優于[18F]FDG和[18F]FPA，并賦予了更優藥代動力學特性[5]。目前，正在特異性復方分子探針顯像方面進行初步嘗試。

6 結語

復方藥品制劑已廣泛用于疾病治療，但復方分子探針尚未開發應用。復方分子探針顯像具有廣泛適用性、實用性、創新性，是分子影像學的重要發展方向。復方分子探針顯像克服了[18F]FDG PET的缺陷，能顯著提高顯像的靈敏度、特異性和準確性；與聯合用分子探針相比[24]，復方分子探針是創新性分子探針，具有固定配比、可單次生產配制、藥效穩定可控以及改善用藥依從性和使用方便等優勢；復方分子探針的研發為創制下一代新型分子探針提供了簡單、實用和易推廣新模式；解決了多靶向偶合分子探針顯像[24]需要采用復雜化學方法修飾多個配體制備偶合分子探針的難題；解決了多模式分子探針同時顯像的難題。

復方分子探針制備方法包括分次合成配制法、一鍋單次合成法和同時平行合成法，目前聯合用分子探針一般使用分次合成配制法制備。分次合成配制法和同時平行合成法可用于各種復方分子探針的制備，但操作相對復雜；一鍋單次合成法相對簡單，但只能用于部分復方分子探針的制備。如何構建功能互補和配伍作用的復方分子探針，以及如何實現復方分子探針一鍋單次合成將面對巨大挑戰。聯合用探針單次給藥同時顯像已用于聯合雙探針單次給藥同時顯像、聯合雙探針雙模式顯像和術中聯合用多探針顯像導向治療，為進一步轉化應用復方分子探針顯像鋪平了道路。然而，實現復方分子探針多模式顯像導向精準治療仍有較大困難，研制新型特異性復方分子探針和治療用復方放射性藥物將具有廣闊應用前景。

[1] 聶大紅,唐剛華. 腫瘤氨基酸代謝PET顯像研究進展[J]. 同位素,2015,28(4):215-224.

Nie Dahong, Tang Ganghua. Research progress of amino acid metabolism PET imaging in tumor[J]. J Isot, 2015, 28(4): 215-224(in Chinese).

[2] 唐剛華. 多靶分子影像學及其研究進展[J]. 核技術,2011,34(10):765-771.

Tang Ganghua. Multi-target molecular imaging and its progress in research and application[J]. Nucl Tech, 2011, 34(10): 765-771(in Chinese).

[3] 羅國安,梁瓊麟,王義明,等. 復方藥物研發創新體系展望[J]. 世界科學技術-中醫藥現代化,2009,11(1):3-10.

Luo Guoan, Liang Qionglin, Wang Yiming, et al. Prospect on the composite drugs innovation system[J]. World Science and Technology/Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica, 2009, 11(1): 3-10(in Chinese).

[4] 錢思源,康彩練. 關于復方藥物開發的臨床考慮[J]. 中國臨床藥理學雜志,2015,31(13):1 335-1 337.

Qian Siyuan, Kang Cai lian. Consideration about compound medicine[J]. Chin J Clin Pharmacol, 2015, 31(13): 1 335-1 337(in Chinese).

[5] 唐剛華. 放射性組合物、其單次放射合成方法及其用途:中國，申請國家發明專利號：201710106158.0[P]. 2017-02-27.

[6] Hoegerle S, Juengling F, Otte A, et al. Combined FDG and [F-18]fluoride whole-body PET: A feasible two-in-one approach to cancer imaging[J]. Radiology, 1998, 209: 253-258.

[7] Iagaru A, Mittra E, Yaghoubi S S, et al. Novel strategy for a cocktail18F-fluorideand18F-FDG PET/CT scan for evaluation of malignancy: Results of the pilot-phase study[J]. J Nucl Med, 2009, 50: 501-505.

[8] Quincoces G, Penuelas I, Valero M, et al. Simple automated system for simultaneous production of11C-labeled tracers by solid supported methylation[J]. Appl Radiat Isot, 2006, 64: 808-811.

[9] Deng H, Tang X, Wang H, et al. S-[11C]methyl-L-cysteine, [11C]MCYS: A new amino acid PET tracer for cancer imagimg[J]. J Nucl Med, 2011, 52: 287-293.

[10] 聶大紅,唐剛華. 共振能量轉移分子顯像在生物醫學中的應用[J]. 同位素,2016,29(4):248-256.

Nie Dahong, Tang Ganghua. Resonance energy transfer molecular imaging application in biomedicine[J]. J Isot, 2016, 29(4): 248-256(in Chinese).

[11] Devous M D, Lowe J L, Payne J K. Dual-isotope brain SPECT imaging with Technetium and Iodine-123: Validation by phantom studies[J]. J NucI Med, 1992, 33: 2 030-2 035.

[12] Brinkmann B H, O’Connor M K, O’Brien T J, et al. Dual-isotope SPECT using simultaneous acquisition of99mTc and123I radioisotopes: A double-injection technique for Peri-Ictal functional neuroimaging[J]. J NucI Med, 1999, 40: 677-684.

[13] Dresel S H J, Kung M P, Huang X F, et al. Simultaneous SPECT studies of pre- and postsynaptic dopamine binding sites in baboons[J]. J Nucl Med, 1999, 40: 660-666.

[14] Ma K H, Huang W S, Chen C H, et al. Dual SPECT of dopamine system using [99mTc]TRODAT-1 and [123I]IBZM in normal and 6-OHDA-lesioned formosan rock monkeys[J]. Nucl Med Biol, 2002, 29: 561-567.

[15] Li I H, Huang W S, Yeh C B, et al. Dual-isotope single-photon emission computed tomography for dopamine and serotonin transporters in normal and parkinsonian monkey brains[J]. Nucl Med Biol, 2009, 36: 605-611.

[16] Poulin E, Lebel R, Croteau E, et al. Conversion of arterial input functions for dual pharmacokinetic modeling using Gd-DTPA/MRI and18F-FDG/PET[J]. Magn Reson Med, 2013, 69: 781-792.

[17] Sun C, Pratx G, Carpenter C M, et al. Synthesis and radioluminescence of PEGylated Eu3+-doped nanophosphors as bioimagingprobes[J]. Adv Mater, 2011, 23: H195-H199.

[18] Hu Z, Qu Y, Wang K, et al. In vivo nanoparticle-mediated radiopharmaceutical excited fluorescence molecular imaging[J]. Nat Commun, 2015, 6: 7 560.

[19] Liu H, Zhang X, Xing B, et al. Radiation-luminescence-excited quantum dots for invivo multiplexed optical imaging[J]. Small, 2010, 6(10): 1 087-1 091.

[20] Haslop A, Wells L, Gee A, et al. One-pot multi-tracer synthesis of novel18F-labeled PET imaging agents[J]. Mol Pharmaceutics, 2014, 11: 3 818-3 822.

[21] Wang Y, Lang L, Huang P, et al. In vivo albumin labeling and lymphatic imaging[J]. PNAS, 2015, 112(1): 208-213.

[22] Tsopelas C, Bellon M, Bevington E, et al. Lymphatic mapping with99mTc-Evans blue dye in sheep[J]. Ann Nucl Med, 2008, 22: 777-785.

[23] van Leeuwen A C, Buckle T, Bendle G, et al. Tracer-cocktail injections for combined pre- and intraoperative multimodal imaging of lymph nodes in aspontaneous mouse prostate tumor model[J]. J Biomed Optics, 2011: 16(1): 0160041-01600411.

[24] Reubi J C, Maecke H R. Approaches to multireceptor targeting: Hybrid radioligands, radioligand cocktails, and sequential radiolig and applications[J]. J Nucl Med, 2017, 58:10S-16S.