《中華人民共和國藥典》收錄毒性中藥材生殖毒性研究進展

楊 威，肖百全，喻 祥，韓 玲

（1.廣東省生物資源應用研究所，廣東省動物保護與資源利用重點實驗室，廣東省野生動物保護與利用公共實驗室，廣東廣州 510260；2.國家食品藥品監督管理總局藥品審評中心，北京 1000381；3.廣東萊恩醫藥研究院有限公司，廣東廣州 510990）

毒性中藥材在我國有著廣泛的應用基礎，臨床應用時間久遠，在多個疾病領域（如風濕性關節炎）發揮著至關重要的作用。長期以來，中藥毒性研究一直未受到應有的重視，生殖毒性作為中藥毒性研究的重要組成部分也未受到應有的重視，毒性中藥材及其飲片生殖毒性的研究較少，這給臨床用藥帶來較大的安全隱患。隨著國家對藥品質量要求的不斷提高，人們對中藥材的安全性特別是毒性中藥材的安全性有了新的要求，這必將推動中藥安全性研究的全面提高。本文就《中華人民共和國藥典》（2015）（以下簡稱《藥典》）記載的83種毒性中藥材及其飲片的生殖毒性研究進展進行綜述。

1 《藥典》中標注的毒性中藥材

《藥典》中共收載83種毒性中藥材［1］，其中10種標注為“大毒”，42 種“有毒”，31 種“小毒”。“大毒”藥材與飲片有川烏、馬錢子、馬錢子粉、天仙子、巴豆、巴豆霜、紅粉、鬧羊花、草烏和斑蝥。“有毒”藥材與飲片有干漆、土荊皮、山豆根、千金子、千金子霜、制川烏、天南星、制天南星、木鱉子、甘遂、仙茅、白附子、白果、半夏、朱砂、華山參、全蝎、芫花、蒼耳子、兩頭尖、附子、苦楝皮、金錢白花蛇、京大戟、制草烏、牽牛子、輕粉、香加皮、洋金花、常山、商陸、硫黃、雄黃、蓖麻子、蜈蚣、罌粟殼、蘄蛇、蟾酥、三棵針、白屈菜、臭靈丹草和狼毒。“小毒”藥材與飲片有丁公藤、九里香、土鱉蟲、川楝子、小葉蓮、水蛭、艾葉、北豆根、地楓皮、紅大戟，兩面針、吳茱萸、苦木、苦杏仁、草烏葉、南鶴虱、鴉膽子、重樓、急性子、蛇床子、豬牙皂、綿馬貫眾、綿馬貫眾炭、蒺藜、鶴虱、大皂角、飛揚草、金鐵鎖、紫萁貫眾、榼藤子和翼首草。

2 毒性中藥材按功能主治的分類

在上述83種毒性中藥材中，“祛風除濕，溫經止痛”類藥物有19種：川烏、草烏、鬧羊花、制川烏、兩頭尖、金錢白花蛇、制草烏、蜈蚣、全蝎、蘄蛇、丁公藤、金鐵鎖、翼首草、蛇床子、香加皮、仙茅、蒼耳子、蒺藜和榼藤子。“峻下逐水，消腫散結通便”類藥物有14種：巴豆、巴豆霜、馬錢子、馬錢子粉、千金子、千金子霜、甘遂、芫花、京大戟、商陸、紅大戟、牽牛子、輕粉和蓖麻子。“活血破血、逐瘀散結”類藥物有12種：斑蝥、干漆、木鱉子、狼毒、水蛭、急性子、土鱉蟲、九里香、小葉蓮、兩面針、天南星和制天南星。“解痙，平喘，安神”類藥物有7種：天仙子、朱砂、白果、華山參、洋金花、白屈菜和苦杏仁。“殺蟲消積”類藥物有9種：土荊皮、苦楝皮、硫黃、雄黃、川楝子、南鶴虱、綿馬貫眾、鶴虱和紫萁貫眾。“祛痰”類藥物有6種：白附子、半夏、常山、臭靈丹草、豬牙皂和大皂角。“清熱解毒”類藥物有10種：山豆根、蟾酥、北豆根、地楓皮、苦木、草烏葉、鴉膽子、重樓、飛揚草和臭靈丹草。“溫經散寒”類藥物有3種：附子、艾葉和吳茱萸。其他功能藥物有3種：罌粟殼、綿馬貫眾炭和紅粉。從上述功能主治分類可見，毒性中藥材的分布相對比較集中，主要集中在祛風濕藥、峻下逐水藥、活血破血藥、殺蟲消積藥、祛痰藥和清熱解毒藥。

3 “大毒”中藥材與飲片的生殖毒性研究

毒性中藥材及飲片生殖毒性研究最常用的方法是生育力與早期胚胎發育毒性試驗（Ⅰ段）和胚胎-胎仔發育毒性試驗（Ⅱ段）［2］，未見圍生期毒性試驗（Ⅲ段）相關報道。但隨著研究手段的進步，也有部分學者使用斑馬魚、胚胎組織和細胞等手段開展毒性中藥材的生殖毒性研究。已報道的開展過生殖毒性研究的“大毒”類中藥材及其飲片主要有川烏、草烏、馬錢子和斑蝥，其他藥物關于生殖毒性的研究報道較少。為便于闡述和理解，以下總結毒性研究結果時，將具有相似藥理作用和具有相似臨床適應證的藥物合并敘述。

3.1 川烏和草烏

3.1.1生殖系統毒性研究

川烏和草烏同屬烏頭類中藥，主要化學成分有烏頭堿和烏頭次堿等，具有溫經散寒止痛、祛風除濕等功效。關于川烏和草烏生殖毒性研究內容較少，僅有關于雄性大鼠生殖系統毒性研究報道。張建軍［3］研究發現，2～4周齡雄性SD大鼠ig給予生川烏3.3，6.5和13.0 g生藥·kg-1或生草烏2.1，4.2和8.3 g生藥·kg-1，連續3個月，停藥恢復觀察1個月。給藥結束時生草烏13.0 g生藥·kg-1組能顯著降低睪丸和附睪臟器系數，其他各組對睪丸和附睪臟器系數無明顯影響；停藥恢復1個月后，各組睪丸和附睪臟器系數未見明顯差異，提示烏頭類中藥對大鼠睪丸和附睪臟器系數的影響是可逆的。給藥結束和恢復期結束時，各劑量組睪丸和附睪組織未發現病理改變，提示生川烏和生草烏的主要毒性靶器官不是生殖器官。體外研究結果表明，烏頭堿0.05，0.5，5和50 g·L-1均可促進支持細胞（sertoli）分泌乳酸，且5 g·L-1作用最強；5和50 g·L-1可抑制大鼠睪丸支持細胞增殖。但烏頭堿0.05，0.5，5和50 g·L-1對大鼠睪丸間充質（leydig）細胞活力、脂質過氧化水平以及睪酮分泌功能均未見明顯影響［3］。該研究的不足之處在于未進行雄性大鼠生育力和精子功能檢測，也未對雌性大鼠的生育力和早期胚胎發育毒性進行研究，不能明確說明生草烏和生川烏對大鼠生育力和早期胚胎發育是否具有毒性作用。

3.1.2胚胎-胎仔發育毒性研究

肖凱［4］研究發現，生川烏和生草烏分別以8.3和13.0 g生藥·kg-1（最大給藥量）于妊娠期7～16 d（gestation day 7～16，GD7～16）給予雌性SD大鼠，未觀察到生川烏對大鼠母體毒性、胚胎和胎仔毒性。生草烏給藥后胎鼠身長縮短，胸骨骨化數減少，但未見畸形，顯示出一定的胚胎毒性。但由于出現了母體毒性（體質量降低，攝食減少），且只設1個劑量組，無法判斷毒性反應是否具有劑量-毒性關系，而胎仔出現的毒性多與生長發育有關，未見明顯的畸形。因此，該文作者認為生草烏的致畸性尚待進一步研究證實。應用全胚胎培養技術的體外研究結果表明，生草烏在劑量＞1.25 g生藥·L-1、烏頭堿在劑量＞2.5 mg生藥·L-1時，對10.5日齡大鼠體外胚胎具有明顯毒性和致畸性；加入體外代謝活化系統可減輕其毒性［4］。該作者認為生草烏和烏頭堿引起體外胚胎發育毒性的重要機制之一可能與卵黃囊生長發育和血管分化的抑制有關。黃韌［5］研究發現，在器官形成期（GD6～17）給予生川烏13.0 g生藥·kg-1可降低孕小鼠子宮內膜厚度和子宮胎仔胎盤總重，減少活胎數，增加吸收胎數。由于該研究未進行劑量-毒性相關性研究，也未對胎仔的外觀、內臟和骨骼畸形方面進行研究，因此，尚不能較好地反映生川烏的致畸性。

上述3項研究通過體內和體外實驗觀察了生川烏和生草烏的致畸作用。研究結果發現，生川烏未見明顯的胚胎和胎仔發育毒性，但生草烏是否有胚胎和胎仔發育毒性尚未明確。

3.2 馬錢子

馬錢子主要化學成分有番木鱉堿（士的寧）和馬錢子堿等，具有消腫、止痛等作用，關于其生殖毒性研究報道較少，僅張啟春等［6］采用斑馬魚為實驗對象，考察了馬錢子主要成分馬錢子堿及其氮氧化物的胚胎發育毒性。研究結果表明，馬錢子堿0.1，0.2，0.5，1.0和2.0 mmol·L-1、馬錢子堿氮氧化物0.5，1.0和2.0 mmol·L-1均可明顯降低斑馬魚的孵化率；同時發現，馬錢子堿0.2 mmol·L-1處理過的魚卵有脊柱側彎、心包水腫和黑色素少等現象，而馬錢子堿氮氧化物濃度增加到1.0 mmol·L-1時才有個別魚卵出現了脊柱側彎和心包水腫等現象。吖啶橙染色后發現，馬錢子堿熒光表達顯著，主要表現在頭部（大腦和小腦）、晶狀體、視網膜和腹部。該研究提示，馬錢子堿及其氮氧化物對斑馬魚具有一定的致畸性，但其氮氧化物的毒性明顯低于馬錢子堿。

該研究通過斑馬魚來考察藥物的致畸作用，是一種比較創新的方法，研究的結果也提示馬錢子具有致畸風險。不足之處在于未說明其使用的斑馬魚實驗系統是否已經過已知的、不同作用機制的陽性藥物驗證，實驗系統的可靠性尚需進一步論證。

3.3 斑蝥

斑蝥主要含有斑蝥素等化學成分，具有破血逐瘀、散結消瘸、攻毒蝕瘡等功效，目前對其胚胎和胎仔發育毒性研究報道較少。簫慶慈等［7］研究發現，交配前，雌性小鼠ig給予斑蝥水提物30和60 mg·kg-1連續5 d，交配后連續給藥19 d，可引起雌性小鼠妊娠率明顯降低，畸胎率明顯升高；此外，還可引起雄性小鼠睪丸系數明顯降低，精囊腺臟器系數明顯降低。該研究提示，斑蝥具有明顯的生殖毒性。該研究給藥期覆蓋了交配前雌性動物的一個動情周期和受孕后著床、胚胎發育的全過程，可比較明確地判斷斑蝥具有致畸作用。此外，該研究結果還提示，斑蝥可能對雄性動物的生育力也具有毒性作用。

4 “有毒”中藥材與飲片的生殖毒性研究

4.1 仙茅和蒼耳子

祛風濕類“有毒”中藥材及飲片中，進行了生殖毒性研究的主要有仙茅和蒼耳子。前者研究的內容為生殖器官毒性，后者為致畸性。鮑薈竹［8］研究發現，大鼠ig給予仙茅乙醇提取物30和120 g生藥·kg-1，連續30 d，血清卵泡刺激素顯著升高；120 g生藥·kg-1組睪丸和卵巢細胞發生損傷，胞漿和細胞核內線粒體腫脹，成空泡狀，染色質輕度聚集在細胞核內。陳錫強等［9］研究發現，蒼耳子提取物能夠顯著降低斑馬魚的胚胎孵化率，增加死亡率及心臟畸形等毒性體征，并隨濃度的增加毒性增強。由于未考察動物生育力和早期胚胎發育毒性、也未考察動物的胚胎-胎仔發育毒性和圍生期發育毒性，仙茅和蒼耳子的文獻研究結果僅能提示二者可能存在一定的生殖毒性風險，而不能明確判斷二者是否具有生殖毒性。

4.2 半夏

半夏具有良好的降逆止嘔作用，故常作為治療嘔吐的藥物，而妊娠嘔吐又是孕早期婦女易出現的臨床表現。金元時期易水學派創始人張元素關于孕期婦女服用半夏也有相關的臨床經驗總結，即“半夏動胎”，認為妊娠期婦女服用未炮制過的半夏后易引起胎動不安。現代關于半夏生殖毒性的研究內容主要涉及抗早孕和致畸性。

4.2.1抗早孕

從生殖毒性的角度，可認為抗早孕是早期胚胎發育毒性作用，主要表現在對胚胎著床前和著床的毒性作用。楊守業等［10］研究發現，生半夏粉9 g生藥·kg-1、生半夏湯劑和制半夏湯劑30 g生藥·kg-1ig給予大鼠，均引起妊娠大鼠陰道出血顯著增加，而制半夏粉和法半夏粉（9 g生藥·kg-1）未見該作用，說明炮制可降低生半夏抗早孕的毒性作用。陳蕙玲等［11］研究發現，半夏蛋白具有抗早孕的作用，兔宮內注射500 μg半夏蛋白抗著床率達100%，經半夏蛋白作用后的子宮內膜未能使移植的正常胚胎著床。有學者認為，半夏引起流產是由于降低卵巢黃體功能活性、內源性孕酮分泌功能減弱而造成的［12］。半夏生殖毒性的研究結果與“半夏動胎”的醫學理論相符，妊娠期婦女服用半夏易引起先兆流產和流產［13-14］。

4.2.2胚胎-胎仔發育毒性

楊守業等［10］研究發現，半夏各種飲片引起胎仔畸形較少見，但可引起胎兒發育不均衡以及胎仔骨骼發育遲緩；制半夏湯劑毒性作用與生半夏粉相似。楊守業等［13］還發現，生半夏粉末以9 g生藥·kg-1給藥、制半夏湯劑在劑量為15 g生藥·kg-1時對大鼠妊娠和胚胎有顯著的毒性，孕早期給藥毒性以死胎增加為主，孕中晚期給藥則以陰道出血和死胎增加為主。王浩等［14］研究發現，半夏茯苓湯中生半夏的致畸胎率為5.38%，致死胎率為4.30%，均高于姜半夏組（畸胎率4.13%，死胎率4.13%）和法半夏組（畸胎率3.03%，死胎率2.27%）。半夏茯苓湯中用法半夏入藥最為安全，孕婦需慎用未經炮制的生半夏復方。此外，還有研究表明，生半夏混懸液以6 g生藥·kg-1給藥時可出現孕小鼠死亡，體質量減輕，胎仔尾長變短［15-16］；而生半夏湯劑僅能縮短胎仔尾長，其結果與楊守業等［13］的研究結果相吻合。

上述研究結果表明，生半夏的抗早孕（早期胚胎發育毒性）和胚胎-胎仔發育毒性比較明確，在經過炮制后毒性可明顯降低，但生半夏對生育力和圍生期毒性研究尚未見相關報道。由于半夏在臨床上使用量比較大，而國內患者不良反應報告意識比較薄弱，其生殖毒性研究亟需補充。

4.3 朱砂和輕粉

4.3.1生育力和早期胚胎發育毒性

朱砂和輕粉的主要成分為可溶性汞和游離汞，前者主要用于安神，后者外用用于殺蟲斂瘡。谷穎敏等［17］和顧祖曦等［18］研究發現，朱砂0.1，0.3和1.0 g生藥·kg-1ig給予大鼠，雄性大鼠由交配前連續給藥6周，并持續至交配結束；雌性大鼠由交配前2周給藥并持續至GD6。研究結果發現，朱砂各劑量組雄性大鼠生育力未見明顯改變。但朱砂具有親本毒性作用，可引起雄性大鼠血紅蛋白、紅細胞壓積、總蛋白和白蛋白含量降低，肺和肝系數增大，睪丸和精囊腺減輕。組織病理學觀察顯示，朱砂1.0 g生藥·kg-1組雄性大鼠精囊腺和睪丸萎縮，曲細精管變細，管腔間排列疏松，管腔內基底膜破壞，其他臟器未見明顯病變；朱砂0.1和0.3 g生藥·kg-1組雄性大鼠精子功能降低，1.0 g生藥·kg-1組未見明顯改變。朱砂1.0 g生藥·kg-1組雌性大鼠著床前胚胎流失率升高，平均活胎數下降，未見明顯親本毒性，作者分析雌性大鼠未出現母體毒性的原因可能與雌性大鼠給藥時間較短有關，而非性別差異。該研究采用了典型的大鼠Ⅰ段生殖毒性實驗考察了朱砂對生育力和早期胚胎發育的影響，明確了朱砂對大鼠生育力和早期胚胎發育的未觀察到損害作用劑量（no observed adverse effect level，NOAEL），對朱砂的臨床應用具有指導意義。

李永剛等［19］研究發現，大鼠大劑量外用輕粉制劑“五五丹”后出現生殖器官組織結構改變，如子宮體積明顯減小，卵泡數明顯減少，黃體細胞變小且形態不規則；睪丸曲細精管縮小，生精細胞減少等。以上研究表明，含汞制劑特別是含氧化汞的制劑長期給藥可產生明顯的生殖毒性。

4.3.2胚胎-胎仔發育毒性研究

輕粉的胚胎-胎仔發育毒性作用未見相關報道，而朱砂則進行了比較全面的研究。如梁愛華等［20］研究發現，通過從D6～GD19和交配前14 d～GD192種給藥時間考察朱砂的大鼠胚胎毒性，朱砂劑量分別為0.08，0.4和4.0 g生藥·kg-1。結果顯示，朱砂各劑量在D6～GD19給藥時間內對母鼠未見母體毒性作用，對胎仔的活胎數、死胎數、吸收胎數、胎仔的外觀、內臟和骨骼均未見明顯毒性。而于交配前14 d～GD19給藥，朱砂各劑量組出現胸骨和肋股畸形，有明顯劑量依賴關系，但各劑量對母鼠、胎仔活胎率和死胎率均未見明顯影響。米金霞等［21］研究發現，朱砂以0.1，0.3和1.0 g生藥·kg-1于GD6～15ig給予大鼠，各劑量組未見明顯母體毒性，對胚胎和胎仔也未見明顯毒性。

上述2篇報道均對朱砂的胚胎和胎仔發育毒性進行了研究，差別在于梁愛華等［20］給藥期限覆蓋面更寬，給藥劑量更大，其給藥期限包括了雌性大鼠生育力期限的考察（交配前14 d開始給藥）。因此，該兩項報道結果也存在少許差異，但均得出胚胎和胎仔發育毒性的NOAEL劑量，對朱砂的臨床應用均具有明確的指導價值。

4.3 芫花和甘遂

巴豆、甘遂、大戟、芫花、商路和千金子等“峻下逐水”藥生殖毒性相關報道較少，僅芫花和甘遂有相關報道，具體研究內容為生殖器官毒性研究和利用斑馬魚進行致畸研究。如趙一等［22］研究發現，芫花酯甲和醋炙芫花酯甲在濃度為1 μg生藥·L-1時對妊娠和非妊娠子宮平滑肌均具有明顯的收縮作用，且對妊娠子宮平滑肌的作用強于非妊娠子宮。向麗華等［23］研究發現，芫花能增加雄性大鼠睪丸系數和雌性大鼠卵巢系數。文獻研究結果表明，芫花可能存在一定的生殖毒性風險，但芫花缺乏系統的生殖毒性研究，該結果對芫花臨床應用的指導作用比較有限。樓堅偉等［24］在醋甘遂活性部分各成分群對斑馬魚胚胎的急性毒性比較研究發現，成分群B（巨大戟烷型二萜類）能導致斑馬魚胚胎孵化過程中卵黃囊吸收延遲、脊柱彎曲、囊腔腫大、肝及胃腺腸道發育不良、心腔腫大和血液循環減緩等癥狀。該研究結果顯示，成分群B對于斑馬魚胚胎有明顯的發育毒性。該結果提示，甘遂可能存在生殖毒性風險。該研究存在的問題與前述使用斑馬魚進行致畸性研究存在的問題相似。

4.4 土荊皮、苦楝皮和雄黃

“殺蟲消積”類藥物進行過生殖毒性研究主要有土荊皮、苦楝皮和雄黃，主要研究內容有抗早孕和胚胎、胎仔發育毒性研究。

4.4.1抗早孕

有部分學者對土荊皮和苦楝皮進行了抗早孕（早期胚胎發育毒性）相關研究。王偉成等［25］研究發現，土荊皮的主要成分土荊皮甲酸在灌胃（大鼠30 mg·kg-1；犬0.1～0.2 mg·kg-1）、皮下注射（大鼠40 mg·kg-1）和陰道給藥（大鼠10～20 mg·kg-1）均發現了抗早孕和抗中孕作用，但對抗著床作用不明顯，對大鼠和犬的抗早孕作用強于倉鼠，抗早孕作用主要體現在死胎數增加。張建樓等［26］研究發現，ig給予苦楝皮水煎劑0.2～0.6 g生藥·kg-1時，可引起小鼠流產，吸收胎率增加，并呈劑量依賴性，其作用機制為苦楝皮引起孕鼠子宮的白細胞介素2增多，白細胞介素4減少，引起F4/80+巨噬細胞的活化，CD4+/CD8+T細胞比值上升，導致胚胎早期死亡。翟向和等［27］研究發現，小鼠于GD7ig給予苦楝皮水煎液，每只小鼠0.5 g生藥即可誘發小鼠流產。上述研究結果表明，土荊皮和苦楝皮均具有明顯的抗早孕作用（早期胚胎發育毒性），但二者對大鼠的生育力、胚胎-胎仔發育毒性和圍生期毒性尚未可知，值得進一步研究。

4.4.2胚胎-胎仔發育毒性研究

有關雄黃生育力、早期胚胎毒性和圍生期毒性研究尚未見報道，但進行了胚胎-胎仔發育毒性相關研究。吳文斌等［28］研究發現，妊娠大鼠于GD6～15連續ig給予雄黃43，85和170 mg·kg-1（為臨床用量的25，50和100倍），對母鼠體質量和胚胎形成等均無明顯毒性，胎鼠外觀、內臟和骨骼也未見明顯毒性，表明雄黃并不引起妊娠大鼠及胚胎-胎仔發育毒性。谷穎敏等［29］研究發現，孕大鼠于GD6～15ig給予雄黃125，250和550 mg·kg-1均未見明顯的母體毒性反應，550 mg·kg-1組胎仔體質量、尾長和頂臀長減少，其他觀察指標未見明顯影響；孕兔于GD6～15ig給予雄黃31，63 和125 mg·kg-1，3個劑量組母體子宮連胎質量、子宮凈質量、胎仔總質量、胎盤總質量、活胎率、胎仔體質量、尾長和頂臀長均隨著雄黃劑量的增加而降低，63和125 mg·kg-1組活胎率明顯降低，但胎仔未見明顯畸形。上述研究結果均表明，雄黃未見明顯的致畸作用，但對胚胎的生長發育具有一定的毒性作用，且兔的敏感性高于大鼠。

上述3項研究為典型的大鼠和兔Ⅱ段生殖毒性研究，研究結果獲得了胚胎、胎仔發育毒性的NOAEL，對雄黃的臨床應用具有明確的指導價值。

5 “小毒”藥材與飲片的生殖毒性研究

5.1 川楝子

川楝子具有疏肝泄熱、行氣止痛、殺蟲等功效，化學成分主要有川楝素和阿魏酸等，其生殖毒性研究報道較少，僅部分學者對川楝素進行了抗早孕及其機制研究。張建樓等［26］研究發現，川楝素以小鼠LD50劑量的 1/60，1/30，1/20和1/15于GD5～7ip給予小鼠，各組流產率和吸收胎率均明顯升高。張先福［30］研究發現，川楝子的主要成分川楝素每只小鼠20 μg即可引起妊娠早期小鼠胚胎異常；川楝素每只小鼠30 μg可引起妊娠小鼠著床后全部流產、死亡或溶解。但對母體未見任何中毒癥狀，內臟器官病變輕微，呈可逆性變化，表明妊娠早期ip給予川楝素對孕鼠具有胚胎毒性。進一步研究表明，子宮局部CD4+和CD8+T細胞增多，Th1細胞因子TNF-α增多，Th2細胞因子白細胞介素10減少，這可能與其致小鼠早期胚胎死亡毒性有關。

5.2 水蛭

水蛭，俗名螞蟥，具有活血、散瘀、通經等功效，僅沈康等［31］對其進行了胚胎-胎仔發育毒性研究。研究發現，小鼠于GD7～11ig給予水蛭0.5和1.0 g生藥·kg-1，胎鼠體質量下降，死胎、吸收胎和畸胎數明顯升高。

5.3 飛揚草

飛揚草具有清熱解毒、利濕止癢、通乳等功效，臨床主要用于肺癰、乳癰、疔瘡腫毒等疾病。文獻檢索發現，僅Adedapo等［32］對其進行了雄性小鼠生殖器官毒性研究。發現飛揚草水提物在劑量為0.4 g生藥·kg-1時連續給藥14 d對小鼠睪丸及附屬器官具有毒性作用，提示其可能具有生殖毒性。

5.4 艾葉

艾葉具有溫經止血、散寒止痛等功效，臨床主要用于吐血、衄血、崩漏、月經過多和胎漏下血等病癥。僅蘭美兵等［33］對其進行了胚胎-胎仔發育毒性研究，發現于GD12～16ig給予艾葉揮發油（0.5，1.0和2.0 mL·kg-1），對胎仔均未見明顯致畸作用。

5.5 鴉膽子

鴉膽子具有清熱解毒、截瘧、止痢等功效，化學成分主要有鴉膽子苦醇和鴉膽子素等，臨床主要用于抗瘧疾和抗阿米巴原蟲，近年來也有用于抗腫瘤的報道。林瑩等［34］通過體外胚胎的方法觀察了鴉膽子苦醇對胚胎發育的影響。研究發現，鴉膽子的主要成分鴉膽子苦醇0.104，0.260，0.520和1.040 g·L-1添加到體外胚胎，觀察對胚胎形成的2-細胞期、4-細胞期、桑葚胚期和囊胚期4個時期的作用。結果表明，在4-細胞期，鴉膽子苦醇0.104，0.260和0.520 g·L-1組發育率顯著降低。0.104 g·L-1組囊胚發育率未見明顯變化，0.260 g·L-1組囊胚發育率顯著降低，1.040 g·L-1組無胚胎發育到4-細胞期和囊葚胚期，表明鴉膽子苦醇具有抑制胚胎早期發育的毒性作用。

5.6 重樓

重樓具有清熱解毒、消腫止痛等功效，化學成分主要有偏諾皂苷和薯蕷皂苷等，臨床常用于疔瘡癰腫、咽喉腫痛、蛇蟲咬傷和跌撲傷痛等病癥。沈放等［35］通過體外孵育的精子考察了其對精子活力的影響。研究發現，重樓分離純化獲得的偏諾皂苷和薯蕷皂苷在體外均能明顯降低小鼠精子的活力，薯蕷皂苷在終濃度為40 mg·L-1時可殺滅全部精子，而偏諾皂苷在同樣濃度下還有部分精子存活。表明云南重樓對雄性動物的生育力可能具有毒性作用。

已報道的“小毒”類中藥材均未按照國際國內相關指導原則進行系統的生殖毒性研究，多數研究結果為生殖器官毒性研究，僅能提示其可能具有生殖毒性的風險，未能準確區分生殖毒性的種類和強度（如生育力毒性、早期胚胎發育毒性、胎仔發育毒性、圍生期毒性和母體毒性等），對該類藥物臨床應用的指導作用有限，尚需進一步研究。

7 結語與展望

受限于“中藥無毒”的理念，多數患者在服用中藥制劑后只有在毒性反應很嚴重時才會就診就醫，對于輕微的毒性反應患者往往容易忽視。因此，很多中藥的毒性反應未能很好地記錄。明太醫劉純在《藥治通法補遺》中寫到“是藥三分毒”，可見古代醫家也并非認為所有的中藥均是無毒的。如金元大家張元素認為“半夏動胎”，即半夏可引發先兆流產或流產，現代研究也證明了半夏在這方面的作用。然而，目前中藥安全性的數據特別是毒性中藥材的生殖毒性數據還非常匱乏，《藥典》中記載的毒性中藥材僅20種進行了部分生殖毒性研究，在該方面研究多數尚屬空白，這給臨床患者用藥帶來潛在的風險。

通過對毒性中藥材生殖毒性研究文獻的總結和分析，發現已有的毒性中藥材的生殖毒性研究還存在較多問題。主要是缺乏系統性，多數生殖毒性研究不完整，僅通過體內和（或）體外試驗進行了某一部分的生殖毒性研究，未進行系統研究，如基本無圍生期毒性研究，對生育力毒性的研究報道也較少。其次，是使用未進行系統驗證的生殖毒性替代方法進行相關研究，研究結果的可重復性可能會受到一定的影響。

由于中國已經正式加入人用藥品注冊技術要求國際協調會（International Council for Harmoniza?tion，ICH），毒性中藥材生殖毒性的研究除遵守我國相關的法律法規之外，還應遵循ICH生殖毒性相關的指導原則（M3和S5）。在進行毒性中藥材生殖毒性研究時，根據中藥材的臨床適應證、擬用人群、已知的毒性靶器官或毒理學參數等特點，可采用全段式或分段組合式（Ⅰ和Ⅱ段組合或Ⅱ和Ⅲ段組合）生殖毒性設計進行試驗，當研究結果為陰性時，可免做分段試驗。該設計可降低多數無生殖毒性和（或）生殖毒性較低中藥材的研發成本，并縮短研發時間。而對于已有文獻報道可能具有生殖毒性的中藥材或前述全段式和（或）分段組合式生殖毒性試驗出現陽性結果時，則需采用分段式生殖毒性設計，詳細考察其生殖毒性，必要時進行生殖毒性伴隨毒代動力學研究。

此外，經過驗證的體外生殖毒性替代試驗系統是國外興起的一種新的生殖毒性評價系統，如體外全胚胎培養試驗、胚胎細胞微團培養試驗和胚胎干細胞試驗。該系統雖然不能完全代替體內生殖毒性試驗，但可起到早期預警作用，且研發投入相對較小，研發時間較短。進行毒性中藥材生殖毒性研究的機構或個人，可根據中藥材的實際情況，在進行全面的生殖毒性研究之前先通過體外生殖毒性替代方法進行預研究，為后續的生殖毒性研究設計提供更多的信息。