卵黃抗體的結構與功能其在人及動物疾病中應用進展

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卵黃抗體(Immunoglobulin of egg yolk/egg yolk antibody, IgY)是指特定抗原刺激禽類B淋巴細胞，由B細胞分化成漿細胞并由此分泌特異性抗體進入血液循環，當血液流經卵巢時在卵細胞中逐漸蓄積，形成卵黃抗體。卵黃抗體具有性質穩定、特異性強、制備成本低、口服安全等優點在家禽、家畜傳染病的防治中已得到廣泛的應用。產品的開發也在生態農業和食品安全方面產生了良好的經濟效益和社會效益。在診斷、預防和治療人類和動物各種疾病中具有良好的應用價值。IgY的產品在動物疾病防治應用報道較多，在醫學中產品研發與應用報道較少，本文就IgY產品研發及應用進行綜述。

1 卵黃抗體結構功能及研發進展

1.1IgY的分泌 禽類的免疫系統包括細胞和體液免疫系統，分別受法氏囊和胸腺的控制。當機體受到外來抗原刺激后，體內主要發生體液免疫，法氏囊內的B細胞活化、分化成為漿細胞，漿細胞分泌針對抗原的特異性抗體進入血液循環，特異性抗體(主要是IgG)隨著血液流經卵巢，并在卵細胞中逐漸蓄積，形成卵黃抗體。流經輸卵管的血液中的特異性抗體(主要是IgM)和IgA進入卵清中，形成卵清抗體。與卵黃抗體相比，卵細胞在輸卵管中移行的時間較短，因而卵清抗體含量極微。

1.2IgY的結構 IgY分子結構與哺乳動物的IgG相似。lgY是一種7S免疫球蛋白,總分子量約180 kD,由兩條輕鏈和兩重輕鏈組成，分子量分別是22-30 kD、67-70 kD。IgY具有典型的免疫球蛋白的空間構象,也可與抗原結合,但其重鏈上的氨基酸組成與lgG相差很大[1]。IgY的重鏈由4個恒定區(Cv1-Cv4)和1個可變區組成,沒有鉸鏈區, Cv 2、Cv 3之間存在兩個重鏈間二硫鍵。而哺乳動物IgG只有3個恒定區(Cγ1-Cγ3)。最近的研究表明：IgY的疏水基團多于IgG,這恰好使它更適于脂類含量豐富的卵黃環境。比較IgY和IgG的恒定區發現,IgY的Cv 3、Cv 4區與IgG的Cv 2、Cv 3區十分相似,而Cv 2區可能經“壓縮”形成IgG的鉸鏈結構。相對于重鏈而言,兩者輕鏈結構上差異較小,氨基酸組成的相似性較大。IgY由于結構中比IgG重鏈多了一個恒定區,但卻沒有IgG特有的鉸鏈區,所以IgY的分子量較大,擺動性、柔韌性下降,穩定性較高[2]。

1.3IgY的功能優勢 卵黃抗體與一般哺乳動物來源的抗體相比，具有以下優勢：①經濟易得：實驗動物來源廣泛，制備提取純化過程簡單，制備等量的抗體動物成本更低，產量高；②性質穩定：較強的耐酸、耐熱、耐高滲性能和一定的抗酶降解能力。當pH為3.5 ～11.0時，IgY 活性比較穩定，高于或低于這個范圍時IgY 活性會迅速下降。當溫度低于75 ℃條件下，IgY具有良好的熱穩定性。在室溫存放6個月或在4 ℃條件下存放5年對其活性無明顯影響。IgY對胃蛋白酶也有較好的耐受能力，但對胰蛋白酶十分敏感，IgY分別與胰凝乳酶和胰蛋白酶溫育8 h，仍能保持一定的活性[3]；③減少假陽性和假陰性：IgY 不與血清中的類風濕因子、人抗鼠抗體、抗-IgG抗體和抗體結合物發生交叉反應，不激活補體系統等，也不與葡萄球菌蛋白A(SPA) 和鏈狀球菌蛋白G 發生反應，可以明顯減少假陽性或假陰性的產生，增強檢測特異性[4]；④與血清不產生交叉反應：由于禽類和哺乳動物之間存在明顯的種系和基因學背景差異，IgY 能識別更多的哺乳動物抗原表位，從而增強免疫信號，提高了IgY靈敏度；⑤特殊抗體形成率高[5]；⑥有診斷、預防、治療的作用：可以做為食品或者食品添加劑以口服的方式達到防治疾病的作用，也可以做為診斷試劑檢測疾病。因此，IgY具有的檢測特異性強、靈敏度高、性質穩定、安全等優點使其廣泛地應用于食品、農業和人及動物疾病中。

1.4國內外已開發的IgY專利 從1893年Klemperer發現IgY，國外關于IgY的研究和應用較多。根據初步資料顯示IgY早期專利也集中在動物應用產品方面。國外由最開始禽病防治，到獸類、養殖類甚至人類疾病、食品工業及農業等各方面均有涉及。國外早期將IgY作為飼料添加劑用于動物生長繁殖及各種疾病的預防防治，后來研發出制成口服液、噴霧劑或作為食品添加劑等用于抗炎、抗感染、抗肥胖、抗胃腸道疾病等各個方面和領域的IgY，并申請相關專利[6-9]。國內IgY研發起步比較晚，近年來快速增長，國內很多生物技術公司也開始類似產品研發。如重慶和潤實業有限公司申請了制備抗禽類病毒性、細菌性疫病、抗仔豬黃痢、白痢病原菌、抗奶牛乳腺炎病原菌復合卵黃抗體的專利并應用于治療相關疾病藥物或飼料添加劑中。中國在抗寄生蟲、細菌、病毒或其他方面關于卵黃抗體的專利有300多篇，隨著科技的發展和進步會有更多的產品研發并投入實際應用中。

2 卵黃抗體在人及動物疾病診斷的應用

禽類與哺乳系動物種系關系較遠，卵黃抗體與人和哺乳動物免疫球蛋白有許多不同之處，IgY不與金色葡萄球菌A蛋白結合、哺乳動物Fc受體結合，對哺乳動物補體無固定作用等，這使得卵黃抗體在檢測診斷上具有更強的特異性和靈敏度，能避免試驗假陽性。IgY制備簡單、產量高，有望取代傳統的多克隆抗體的生產，獲取大量更有效的抗體。IgY可以應用于免疫熒光試驗、ELISA試驗、免疫擴散、免疫電泳等。

2.1IgY在病毒感染診斷中的應用 趙文思等用純化的HIV-1P15蛋白免疫產蛋雞制備雞卵黃抗體，通過優化組合獲得了高純度的IgY，純化的抗體能夠與HIV-1病毒蛋白P15特異性結合，為HIV感染患者的診斷提供了新思路[10]。嚴重急性呼吸綜合征冠狀病毒的核衣殼蛋白(SARS-CoV-NP)可用于判斷個體是否感染SARS，A. Palaniyappan等用SARS-CoV-NP免疫產蛋雞制備抗SARS-CoV-NP的多克隆抗體IgY，SARS-CoV-NP作為包被抗原，單克隆抗SARS-CoV-NP抗體作為捕獲抗體，IgY作為檢測抗體，采用ELISA雙抗體夾心法用于SARS疑似個體的早期診斷[11]。張小鶯等[12]用三種滅活的天花病毒(痘苗病毒，calpox病毒和牛痘病毒)免疫三組蛋雞，制備抗vaccinia virus IgY和抗calpox virus IgY，在高度稀釋的情況下，仍可在免疫熒光實驗中呈陽性反應，并且特異性卵黃抗體能夠與磁珠結合用于天花病毒的PCR檢測，研究表明抗痘病毒IgY有望成為一個痘病毒的檢測手段。狂犬病是一種由狂犬病病毒所致的人獸共患病，IgY可用于狂犬病病毒感染的診斷，用直接熒光抗體檢測方法檢測狂犬病毒抗原已經在世界范圍內得到廣泛應用。IgY作為替代抗體用于檢測冰凍肝臟中的甲型肝炎病毒[13]。豬圓環病毒2型(Porcine circovirus 2,PCV2)是斷奶仔豬多系統衰竭綜合征(PMWS)等相關疾病的主要病原體，建立豬圓環病毒2型捕獲ELISA抗體檢測方法檢測豬圓環病毒2型[14]。乙型腦炎是由日本乙型腦炎病毒引起的急性人獸共患傳染病，黃少梅[15]研制豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測試劑盒。

2.2IgY在細菌和寄生蟲感染診斷中的應用 產志賀毒素大腸桿菌能引起一系列疾病，包括腹瀉、出血性結腸炎和危及生命的溶血性尿毒綜合癥(HUS)等，將志賀毒素(STX)作為抗原，制備anti-stx2b IgY抗體，采用雙抗體夾心ELISA用于常規快速診斷產志賀毒素大腸桿菌檢測的方法[16]。鉤端螺旋體病是由鉤端螺旋體屬的致病性鉤端螺旋體引起的傳染病，抗鉤端螺旋體的單克隆抗體、生物素標記的抗鉤端螺旋體IgY抗體采用雙抗體夾心ELISA檢測待測血清(疑似含鉤端螺旋體)[17]。弓形蟲表面抗原(SAG1)可作為弓形蟲的檢測指標，制備出抗SAG1特異性IgY抗體，可用于弓形蟲的檢測[18]。IgY也為血吸蟲病的檢測也提供了一種便捷、無創傷的新方法[3]。

2.3在腫瘤標志物檢測中的應用 人乳頭瘤病毒( HPV) 16 是高危型HPV，與宮頸癌及宮頸上皮內高度病變有著密切的關系，對人乳頭瘤病毒(HPV)的基礎和臨床診斷研究有重要意義。楊軍等[19]用人乳頭瘤病毒16L1蛋白(HPV16L1)免疫蛋雞，制備出純度高、特異強的抗HPV16L1 IgY 抗體，用于檢測HPV16L1。乳腺癌的診斷中最常用的是腫瘤抗原15-3(CA15-3)，制備抗 CA15-3 IgY，建立雙抗體夾心法ELISA 檢測CA15-3[20]。HER2 和端粒酶是乳腺癌診斷的標志因子，Y Xiao等[21]制備抗人HER2和端粒酶單克隆抗體和IgY,采用一種新的量子成像系統，對特定的細胞和組織進行追蹤，與哺乳動物的IgG對比，前者表現出更高的親和性。Y Xiao等制備抗HER2 IgY結合納米技術可用于HER2的檢測和腫瘤的靶向治療[22]。前列腺特異性抗原(PSA)是一種重要的血清前列腺癌檢測、監測和分期的標記物，Agnieszkaupicka-Sowik等[23]用單克隆抗體夾心/IgY /PSA檢測ELISA試劑盒，研究結果表明其可能是一個替代哺乳動物抗體診斷前列腺癌的方法。卵黃抗體還可用于卵巢癌和非霍奇金淋巴瘤患者的檢測[24]。

2.4其他應用 P Jintaridth等[25]采用卵黃抗體技術是用來產生抗α血紅蛋白IgY抗體從而建立酶聯免疫吸附試驗診斷地中海貧血。轉鐵蛋白是血清中結合并轉運鐵的β球蛋白，血清轉鐵蛋白的含量變化可反映多種疾病，以雞卵黃抗體IgY 代替哺乳動物抗體IgG 用于表面等離子體共振技術對人血清中轉鐵蛋白的實時檢測[26]。

3 卵黃抗體在人及動物疾病防治中的應用

3.1在病毒性疾病治療預防方面的應用 輪狀病毒(RV)引起的人畜腹瀉在全世界范圍內是一個重要的公共衛生問題。且特異性IgY口服給藥已報道有利于抗輪狀病毒感染，實驗結果顯示口服抗RV IgY降低小鼠RV發病率，表明其在防治輪狀病毒相關疾病存在潛在意義[27]。HM Thu等[28]研究口服抗輪狀病毒IgY是治療新生兒輪狀病毒腹瀉一種安全有效的方法。甲型流感病毒感染人的呼吸系統，可引起急性和致命的肺部疾病，耐藥病毒株的出現凸顯替代治療方法的需要，研究顯示高滴度抗甲型H1N1流感病毒IgY抗體能特異性結合甲型H1N1流感病毒神經氨酸酶和血凝素，采用的模型小鼠肺組織保持正常。此外，相比神經氨酸酶抑制劑奧司他韋，該抗體還具有保護活性，因此IgY可以提供一個有效控制流感的替代方法[29]。IgY不僅應用于艾滋病病毒(HIV)的診斷，在治療上也有一定的應用，Sri Agus Sudjarwo等[30]通過模型小鼠研究口服抗HIV IgY對小鼠急性毒性的影響，總體結果表明口服抗HIV IgY對小鼠不會產生任何明顯的毒性作用，因此，抗HIV抗體可用于對艾滋病患者的輔助免疫治療。諾如病毒(NoVs)是影響全球數百萬患者患流行性急性胃腸炎的主要原因，目前，還沒有針對此病毒有效的疫苗或抗病毒藥物，Ying-Chun Dai等[31]研究中表示特異性抗NoVs IgY可用于可諾如病毒的診斷和治療。

3.2在寄生蟲、細菌性疾病治療預防方面的應用 隱孢子蟲可引起免疫功能低下的人和新生動物腹瀉，P23是一種屬于23蛋白家族的糖蛋白并表達于寄生蟲不同的生活階段，Zahra Omidian等[32]將小隱孢子蟲重組P23應用于本研究中，制備的抗重組P23特異性IgY對隱孢子蟲病有抑制作用，可以作為預防動物和免疫功能低下的人感染隱孢子蟲的被動疫苗。幽門螺旋桿菌(Hp)感染是胃十二指腸疾病包括急性胃、十二指腸潰瘍、慢性胃炎、慢性萎縮性胃炎的主要病原菌，Baoning Wang等[33]研究表明抗HP IgY對Hp生長、HP尿素酶活性具有抑制作用，口服抗HP IgY治療感染幽門螺桿菌模型小鼠，治愈率可達到83.3%，該抗體有望成為治療Hp感染有針對性的新藥物和治療方法。Yun-Hui Yang等[34]組合IgY和蘭索拉唑或者傳統藥物聯合給藥治療HP，其顯示了一定的優越性，此外IgY 克服了抗生素的耐藥性，IgY可能是代替抗生素治療HP引起的胃潰瘍的新選擇。牙齦卟啉單胞菌(GP)是引起牙周炎重要的原因之一，通過抑制GP而降低其致病性。Kyosuke Yokoyama等[35]研究抗牙齦卟啉單胞菌卵黃抗體(IgY-GP)、齦下刮治術、根面平整術(SRP)治療方法與齦下刮治術、根面平整術(SRP)治療方法的比較，證明IgY-GP對牙周炎患者菌群里的GP生長有抑制作用，臨床上使用含IgY-GP軟膏治療牙周炎進一步證明此結論，IgY-GP可作為一種有效的免疫治療牙周炎的藥物。IgY在艱難梭菌相關性腹瀉的診斷和治療也有應用。IgY口服已經證明是成功的用于各種消化道感染的治療，如魯氏耶爾森菌、產腸毒素大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、遲鈍愛德華菌等[36]。

3.3在腫瘤治療預防方面的應用 特異性IgY在腫瘤患者的應用還處于初步研究階段，但為腫瘤的治療和預防提供了一種新的思維。早期李慶昌等[37]從人胃低分化粘液腺癌細胞MGC-803中分離出一種癌蛋白P110，并用其免疫蛋雞，制備的抗體lgY再與蓖麻毒蛋白的A鏈偶聯成lgY-RicioA免疫毒(生物導彈)，結果表明生物導彈lgY-RicinA治療上消化道腫瘤有一定的作用。而且劉連瑞等研究顯示IgY-ricinA能夠選擇性的殺傷MGC-803腫瘤細胞且IgY只具有特異識別細胞、而無誘導細胞凋亡的作用，應用于消化系統腫瘤的靶向治療有一定的潛能。腦膠質瘤是最常見并且多發的中樞神經系統惡性腫瘤。膠質瘤 IgY 抗體能特異、選擇性的識別腦膠質瘤組織，因此它可以作為一種小型而高效的導向載體，把毒素有定向地運輸到腫瘤細胞上，當載體識別腫瘤細胞后，立即與腫瘤細胞結合而釋放毒素，從而達到殺死腫瘤細胞而不影響其它正常細胞的目的。通過對人腦膠質瘤細胞系 U251 IgY 抗體的基本特性分析、鑒定等研究，為腦腫瘤的診治提供新的思路[38]。

3.4在其他方面的應用 乳糜瀉(CD)是一種由麩質引起的小腸自身免疫性疾病，口服卵黃抗角蛋白抗體(AGY)是一種新中和麩質的治療CD的方法[39]。腫瘤壞死因子1(TNFR1)能調節細胞凋亡，制備的抗TNFR1 IgY純化后具有較高的特異性，可對某些生物靶標起到快速、直接的保護作用[40]。IgY還可應用于治療肥胖癥，抗脂肪酶IgY可抑制胰脂肪酶活性增加甘油三酯排泄量，達到抗肥胖的作用[41]。此外，IgY在抗蛇毒[42]和抗蝎子毒素[43]、抗生育制品方面都有應用。

IgY研究雖然早，應用廣泛，全球專利申請多，但仍存在很多亟待解決的問題，目前卵黃抗體在制備、提純和使用過程中沒有統一的質量標準，在實際應用過程中對卵黃抗體的使用也常停留在利用粗制品對相應病原進行防治，且IgY主要成熟產品是針對動物疾病的，針對人類疾病基本處于制劑研發、專利申報，而成熟產品不多。近年來IgY研發在腫瘤方面也有涉及，但在臨床應用上還存在一系列問題，如有效性、安全性以及機理研究都比較薄弱。這些均嚴重阻礙卵黃抗體的開發和利用，因此在如何提高抗體的防治效果、降低生產成本以及代替普通抗體發揮作用的問題有必要進一步探討和研究。由于IgY 具有性質穩定、低交叉反應性、無耐藥性、特異性高、可口服等優點，隨著對IgY機理深入研究和相關技術的發展，在診斷試劑開發、人及動物疾病防治、腫瘤靶向治療以及與食品安全的針對動物疾病的產品研發應用等方面有望取得新進展。

[1] Mine Y, Kovacsnolan J. Chicken egg yolk antibodies as therapeutics in enteric infectious disease: a review[J]. J Med Food, 2002, 5(3): 159-169. DOI: 10.1089/10966200260398198

[2] Zhen YH. Preparation and efficacy evaluation of egg yolk immunoglobulin(IgY) against dairy cow mastitis[D]. Dalian: Dalian University of Technology, 2008. (in Chinese)

甄宇紅. 抗奶牛乳腺炎特異性卵黃抗體的制備及活性研究[D]. 大連：大連理工大學, 2008.

[3] Zhang L, Liu ZZ, Ning CS, et al. Application progress of IgY in immunoassay and treatment[J]. Progr Vet Med, 2017, 38(1): 78-81. DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2017.01.016 (in Chinese)

張璐, 劉珍珍, 寧長申,等. IgY在免疫檢測及治療中的應用進展[J]. 動物醫學進展, 2017, 38(1): 78-81.

[4] Zhang JJ, Li MH. Research progress of IgY and its application in immunoassay[J]. J Anhui Agr Sci, 2014, 42(29): 10147-10149. DOI: 10.13989/j.cnki.0517-6611.2014.29.041 (in Chinese)

張靜靜, 李明輝. IgY抗體在免疫檢測中的應用進展[J]. 安徽農業科學, 2014,42(29):10147-10149.

[5] Zhou Y, Shen DW. The characteristics and purification of Chicken Egg Yolk antibodies (IgY) apply to parasitology[J]. Chin J Zoonoses, 2011, 27(5): 441-443. (in Chinese)

周彥, 沈定文. 雞卵黃抗體(IgY)的性質、提純及應用于寄生蟲學的研究[J]. 中國人獸共患病學報, 2011, 27(5):441-443.

[6] Pradip M, Hare J. Specific avian egg antibodies for disease prevention and improvement of growth performance: US, US7713527[P]. 2010.

[7] Wolfgang B, Hartmut K. New immunoconjugate comprising egg yolk immunoglobulin Y, useful for treating e.g. inflammation or infection, is derived from specific pathogen-free hens: DE10123505[P]. 2002.

[8] Jang SH, Choi SY, Lee YP, et al. Composition for repression of hyperlipidemia and obesity through suppression of intestinal cholesterol absorption: US, US 8609098 B2[P]. 2013.

[9] Kodama Y, Kimura N. Pharmaceutical composition comprising anti-H.pyloriurease IgY antibodies and an inhibitor of gastric acid secretion: EP, EP1172116[P]. 2009.

[10] Zhou WS, Zhou XH, Shen XL, et al. Preparation of anti-HIV-1 P 15(gag) IgY and detection of its biological activity[J]. Biotechnology, 2012, 22(4): 79-83. DOI: 10.3969/j.issml004-3lIX.2012.04.99 (in Chinese)

趙文思, 鄒曉華, 沈雪蓮,等. 抗HIV-1 p15(gag)IgY抗體的制備及活性檢測[J]. 生物技術, 2012, 22(4):79-83.

[11] Palaniyappan A, Das D, Kammila S, et al. Diagnostics of severe acute respiratory syndrome-associated coronavirus (SARS-CoV) nucleocapsid antigen using chicken immunoglobulin Y[J]. Poult Sci, 2012, 91(3): 636-642. DOI: 10.3382/ps.2011-01916

[12] Zhang XY, Andreas K, Diana P, et al. Application of high-titred IgY antibodies in orthopox virus diagnostics[J]. J Chin Pharmaceutical Sci, 2008, 17(3): 183-191. (in Chinese)

張小鶯, AndreasKurth, DianaPauly,等. 高滴度特異性卵黃抗體在天花病毒檢測中的研究(英文)[J]. 中國藥學, 2008, 17(3):183-191.

[13] Hadinedoushan H, Salmanroghani H, Amirbaigy MK, et al. Hepatitis C virus genotypes and association with viral load in yazd, central province of Iran[J]. Hepatitis Monthly, 2014, 14(3): e11705-e11709.

[14] Zhou SH. Development and clinical application of capture ELISA for detecting antibody against porcine circovirus type2[D]. Wuhan: Huazhong Agricultural University, 2013. (in Chinese)

周松海. 豬圓環病毒2型捕獲ELISA抗體檢測方法的建立與臨床應用[D]. 武漢：華中農業大學, 2013.

[15] Huang SM. Development of swine jev ELISA antibody detection kit and isolation and identification of jev from swine bacteria comes from pig related zoonosis[D]. Wuhan: HuaZhong Agricultural University, 2013. (in Chinese)

黃少梅. 豬乙型腦炎病毒ELISA抗體檢測試劑盒的研制及豬源乙型腦炎病毒的分離鑒定[D]. 武漢：華中農業大學, 2013.

[16] Parma YR, Chacana PA, Lucchesi PMA, et al. Detection ofShigatoxin-producingEscherichiacoliby sandwich enzyme-linked immunosorbent assay using chicken egg yolk IgY antibodies[J]. Front Cellular Infect Microbiol, 2012, 2(84): 1-8. DOI: 10.3389/fcimb.2012.00084

[17] Vasconcellos FA, Coutinho ML, éverton F, et al. Testing different antigen capture ELISA formats for detection ofLeptospira, spp. in human blood serum[J]. Transact Royal Soc Trop Med Hyg, 2009, 104(4): 259-264. DOI: 10.1016/j.trstmh.2009.10.005

[18] Cakir-Koc R. Production of anti-SAG1 IgY antibody againstToxoplasmagondii, parasites and evaluation of antibody activity by ELISA method[J]. Parasitol Res, 2016, 115(8): 1-6. DOI: 10.1007/s00436-016-5047-9

[19] Yang J, Zhang MJ, Qiang L, et al. Preparation and activity detection of chicken egg yolk IgY antibody against human papillomavirus 16 type L1 main capsid protein[J]. J Southern Med Univ, 2008, 28(28): 324-327. (in Chinese)

楊軍, 張明娟, 強磊,等. 抗HPV16L1IgY抗體的制備及活性檢測[J]. 南方醫科大學學報, 2008, 28(3):324-327.

[20] Grzywa R,upicka-Sowik A, Walczak M, et al. Highly sensitive detection of cancer antigen 15-3 using novel avian IgY antibodies[J]. ALTEX, 2014, 31(1): 43-52. DOI: 10.14573/altex.1309181

[21] Xiao Y, Gao X, Gannot G, et al. Quantitation of HER2 and telomerase biomarkers in solid tumors with IgY antibodies and nanocrystal detection[J]. Intl J Cancer, 2008, 122(10): 2178-2186. DOI: 10.1002/ijc.23320

[22] Xiao Y, Gao X, Taratula O, et al. Anti-HER2 IgY antibody-functionalized single-walled carbon nanotubes for detection and selective destruction of breast cancer cells[J]. BMC Cancer, 2009, 9(1): 1-11. DOI: 10.1186/1471-2407-9-351

[24] Kovacsnolan J, Mine Y, Immerseel FV, et al. Using egg IgY antibodies for health, diagnostic and other industrial applications[J]. Woodhead Publishing, 2011, 2(1): 346-373. DOI: 10.1533/9780857093929.3.346

[25] Jintaridth P, Srisomsap C, Vichittumaros K, et al. Chicken egg yolk antibodies specific for the γ chain of human hemoglobin for diagnosis of thalassemia[J]. Intl J Hematol, 2006, 83(5): 408-414. DOI: 10.1532/IJH97.A20515

[26] Wang CY, Feng F, Bai YF, et al. Determination of transferring in human serum samples using chicken egg yolk antibodies(IgY) by surface plasmon resonance[J]. Chemical J Chin Universities, 2012, 33(6): 1177-1181. DOI: 10.3969/ j.issn.0251-0790.2012.06.011

[27] Buragohain M, Dhale GS, Ghalsasi GR, et al. Evaluation of hyperimmune hen egg yolk derived anti-human rotavirus antibodies (anti-HRVIgY) against rotavirus infection[J]. World J Vaccines, 2012, 02(2): 73-84. DOI: 10.4236/wjv.2012.22010

[28] Thu HM, Myat TW, Win MM, et al. Chicken egg yolk antibodies (IgY) for prophylaxis and treatment of rotavirus diarrhea in human and animal neonates: a concise review[J]. Korean J Food Sci Anim Resources, 2017, 37(1): 1-9. DOI:10.5851/kosfa.2017.37.1.1

[29] Yang YE, Wen J, Zhao S, et al. Prophylaxis and therapy of pandemic H1N1 virus infection using egg yolk antibody[J]. J Virological Methods, 2014, 206(7): 19-26. DOI: 10.1016/j.jviro met.2014.05.016

[30] Sudjarwo S, Indriyani W, Nasronudin N, et al. Acute oral toxicity of immunoglobulin Y (IgY) anti HIV in mice[J]. J Appl Pharmaceutical Sci, 2015, 5(2): 123-126. DOI: 10.7324/JAPS.2015.50218

[31] Dai YC, Wang YY, Zhang XF, et al. Evaluation of anti-norovirus IgY from egg yolk of chickens immunized with norovirus P particles[J]. J Virological Methods, 2012, 186(1/2): 126-131. DOI: 10.1016/j.jviromet. 2012.07.002

[32] Omidian Z, Ebrahimzadeh E, Shahbazi P, et al. Application of recombinantCryptosporidiumparvumP23 for isolation and prevention[J]. Parasitol Res, 2014, 113(1): 229-237. DOI: 10.1007/s00436-013-3648-0

[33] Wang B, Yang J, Cao S, et al. Preparation of specific anti-Helicobacterpyloriyolk antibodies and their antibacterial effects[J]. Intl J Clin Exper Pathol, 2014, 7(10): 6430-6437.

[34] Yang YH, Park D, Yang G, et al. Anti-Helicobacterpylorieffects of IgY from egg york of immunized hens[J]. Lab Anim Res, 2012, 28(1): 55-60. DOI: 10.5625/lar.2012.28.1.55

[35] Yokoyama K, Sugano N, Shimada T, et al. Effects of egg yolk antibody against Porphyromonas gingivalis gingipains in periodontitis patients[J]. J Oral Sci, 2007, 49(3): 201-206. DOI: 10.2334/josnusd.49.201

[36] Mine Y, Kovacsnolan J. Chicken egg yolk antibodies as therapeutics in enteric infectious disease: a review[J]. J Med Food, 2002, 5(3): 159-169. DOI: 10.1089/10966200260398198

[37] Li QC, Liu CX, Yao XZ, et al. The treatment of patients with upper digestive tract malignant tumors of middle and late stage with Biological missile IgY-RiCin[J]. World Chin J Digestol, 2000, 8(8): 1-2. DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2000.z1.001 (in Chinese)

李慶昌, 劉朝興, 姚秀珍,等. 生物導彈IgY-RiCin治療上消化道中晚期惡性腫瘤[J]. 世界華人消化雜志, 2000, 8(8):1-2.

[38] Tian X. Preparation and characterization of IgY against human glioma[D]. Dalian: Dalian Medical University, 2007. (in Chinese)

田笑. 抗人腦膠質瘤IgY抗體的制備及其特性分析[D]. 大連：大連醫科大學, 2007.

[39] Sample DA, Sunwoo HH, Huynh HQ, et al. AGY, a novel egg yolk-derived anti-gliadin antibody, is safe for patients with celiac disease[J]. Digest Dis Sci, 2016, 62(5): 1277-1285. DOI 10.1007/s10620-016-4426-5

[40] Hashemi M, Amirijavid S, Entezari M, et al. Generation and characterization of chicken egg yolk antibodies (IgY) against TNFR1[J]. Bratisl Med J, 2015, 116(5): 316-320. DOI: 10.4149/BLL_2015_059

[41] Hirose M, Ando T, Shofiqur R, et al. Anti-obesity activity of hen egg anti-lipase immunoglobulin yolk, a novel pancreatic lipase inhibitor[J]. Nutrit Metabol, 2013, 10(1): 70-75. DOI: 10.1186/1743-7075-10-70

[42] Liu J, He Q, Wang W, et al. Preparation and neutralization efficacy of IgY antibodies raised againstDeinagkistrodonacutusvenom[J]. J Venomous Anim Toxins Including Trop Dis, 2017, 23(1): 22-30. DOI 10.1186/s40409-017-0112-0

[43] Alvarez A, Montero Y, Parrilla P, et al. Poultry IgY alternatives to antivenom production[J]. Toxinology, 2015, 4(7): 161-178. DOI: 10.1007/978-94-007-6404-0_1