答:電鏡生物樣品的取材,正確與否決定著實驗結果的準確性,電鏡要求樣品必須忠實地反映其生活時的狀態,應盡量避免“死后改變”和人為假象的發生,現將電鏡取材注意事項總結如下:
(1)取材部位要準確:器官、部位要準確,如觀察腎小球需取腎皮質而不要取到腎髓質。
(2)動作迅速:活體(血供未斷)取材,材料離體后需在1 min內放入固定液(戊二醛),使組織盡可能保持原來的生活狀態。
(3)材料體積要小:一般不超過1 mm3,使組織得到均勻而充分的固定,需要定向包埋的樣品(如皮膚、肌肉、血管等)應切成1×3 mm2的長條。
(4)機械損傷要小:取材應用鋒利、清潔的雙面刀片(新刀片應用酒精去除刀鋒上的油脂),盡量避免牽拉和擠壓。
(5)低溫:固定液4℃保存,取材所需器械應進行預冷,取材過程在冰盒上進行,取好的樣品放在含固定液的小瓶中4℃保存,盡量降低酶的活性,減少細胞的損傷。