不同義齒清潔劑對(duì)義齒表面上白色念珠菌生物膜清潔效果的比較

劉淵君，劉 偉，張海兵，孫 潔，李學(xué)寬

（1．內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)第四附屬醫(yī)院口腔科，內(nèi)蒙古 包頭 014032；2．包頭市第四醫(yī)院口腔科，內(nèi)蒙古 包頭 014032）

本次研究的主要目的是比較不同義齒清潔劑對(duì)白色念珠菌生物膜的清潔效果，選取了2015年6月～2017年4月來我院口腔科就診的62例義齒戴用者，采用五種不同的義齒清潔劑來清潔白色念珠菌生物膜，具體情況如下。

1 材料與方法

1.1 材料

微生物：白色念珠菌SC5314；5種義齒清潔劑和其他資料與設(shè)備。

1.2 方法

（1）培養(yǎng)白色念珠菌生物膜：解凍凍存得白色念珠菌并在沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基中接種，在37攝氏度二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行為期24小時(shí)的復(fù)蘇培養(yǎng)；將單菌挑取出來并在10ml的酵母浸出粉胨葡糖糖培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)種，在30攝氏度溫控培養(yǎng)搖床中放置并進(jìn)行過夜培養(yǎng)；將菌體收集起來 ，利用磷酸鹽緩沖液進(jìn)行兩次離心洗滌，最后在改良型RPMI1640培養(yǎng)基的幫助下進(jìn)行重懸，利用倒置顯微鏡和血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行計(jì)數(shù)并將菌液濃度調(diào)整到1×106/mL個(gè)菌體；取上述溶液200 μL在96孔微量培養(yǎng)板和27攝氏度二氧化碳培養(yǎng)箱中，從而有助于白色念珠生物膜的形成。培養(yǎng)24小時(shí)候 ，隨機(jī)選取3個(gè)已經(jīng)接種的并將培養(yǎng)基棄去，利用200 μL磷酸鹽緩沖液進(jìn)行3次清洗，在空氣中充分干燥以后將加入結(jié)晶紫溶液100 μL0.5%（w/v），作用5分鐘后將該溶液棄并洗滌3次；然后利用倒置顯微鏡對(duì)染色后的微孔進(jìn)行仔細(xì)的觀察和拍照[1]。

（2）義齒清潔劑的清潔處理：生物膜形成后便可以將培養(yǎng)基棄去，利用200 μL磷酸鹽緩沖液分別清洗每個(gè)孔三次，從而可以將未粘附菌除去。將保麗凈、澳多-C、protefix和雅克菱劑型分別在40攝氏度、150毫升的無菌蒸餾水中溶解，待完全溶解后取200 μL在生物膜中放置，將濃度為20%的葡萄糖酸氯已定稀釋到0.2%，同樣取200 μL在生物膜中放置。每種義齒清潔劑需要重復(fù)浸泡6個(gè)附著生物膜的孔，在此基礎(chǔ)上對(duì)陽性、陰性對(duì)照組進(jìn)行設(shè)置。待達(dá)到規(guī)定浸泡時(shí)間以后，將義齒清潔劑棄去，通過洗滌將殘余清潔劑除去。

（3）利用甲基四氮鹽減低法則和結(jié)晶紫含量分別對(duì)生物膜代謝活性的改變和定量生物量的生物量進(jìn)行科學(xué)測定。

1.3 觀察指標(biāo)

比較兩種時(shí)間浸泡后生物膜活性減少率和生物量減少率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 22.0來完成本次研究的數(shù)據(jù)分析。兩組患者的護(hù)理結(jié)果的等級(jí)資料采用t檢驗(yàn)，其他相關(guān)計(jì)數(shù)資料以相對(duì)數(shù)構(gòu)成比（%）或率（%）表示，當(dāng)P＜0.05時(shí)，兩組差異顯著，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

5中義齒清潔劑在兩組浸泡時(shí)間中的活性和生物量減率，差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0 .05）。見表1。

表1 不同義齒清潔劑兩種浸泡時(shí)間生物膜活性和生物量減少率的比較（±s）

表1 不同義齒清潔劑兩種浸泡時(shí)間生物膜活性和生物量減少率的比較（±s）

保麗凈 80.2±3.6 88.8±4.4 38.2±10.2 56.8±4.8澳多-C 23.4±3.3 83.2±1.6 8.7±6.2 34.7±3.2 prote fi x0.2%葡萄糖 81.3±1.0 82.9±1.2 22.0±2.6 29.2±5.7酸氯已定 65.5±1.8 58.8±3.3 34.2±3.0 36.3±1.8雅克菱 66.6±3.5 81.2±2.0 24.7±8.0 25.1±6.2

3 討 論

本次研究中，在兩種浸泡時(shí)間中，5中義齒清潔劑的活性減少率和生物量減少率之間差異顯著，其中保麗凈的分?jǐn)?shù)最高，減少率分別達(dá)到了80%以上，上升幅度最大的是澳多-C，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

綜上所述，利用保麗凈義齒清潔劑來清潔白色念珠菌可以取得較好的清潔效果。

[1] 陸美言,胡書海,陸春偉.不同處理方法對(duì)3種義齒材料表面白色念珠菌生物膜清除效果的比較研究[J].口腔醫(yī)學(xué)研究,2013,29(08):732-734.