一株鏈球菌的分離鑒定及藥敏試驗

張穎

2016年11月山東省某豬場發生了一種以出血性敗血癥、心包積液為主要特征的傳染病。該病發病突然，病程急，發病豬出現體溫升高、精神沉郁、呼吸困難、結膜發紺，口鼻有泡沫狀液體流出及病豬倒地不起等癥狀，發病急，來不及用藥就出現死亡，給發病的豬場造成嚴重的經濟損失。采集死亡病豬肝脾及心包積液等病料經實驗室進行細菌分離培養、革蘭氏染色、生化特性鑒定、玻片凝聚試驗、藥敏試驗及動物回歸試驗，并經PCR檢測確定為豬鏈球菌感染。現報告如下：

1材料與方法

1.1主要試驗材料

病料為從山東省幾個豬場采集的疑似豬鏈球菌感染的病豬病料，體重為18～20g的健康小鼠購自河南大學實驗動物中心。

1.2主要試劑

TaqDNA聚合酶、dNTPs及DNA Marker DL2000等購自大連寶生物工程有限公司；膠回收試劑盒購自上海生工生物工程技術服務有限公司。改良馬丁肉湯培養基、瓊脂粉等試劑購自北京索萊寶科技有限公司；豬鏈球菌的標準陽性血清、藥敏紙片購自北京天壇生物公司；細菌生化反應管購自杭州天和微生物試劑有限公司；其他化學試劑如氯仿、異丙醇和乙醇等，均為國產分析純產品。

1.3細菌的分離培養

無菌取發病豬的肝臟及心包積液用接種環劃線接種于含5%綿羊血的馬丁肉湯瓊脂平板上，放置于37℃的C02培養箱中培養24～48h，觀察生長情況及菌落特征。挑取疑似菌落涂片并進行革蘭氏染色，鏡檢。觀察細菌形態及溶血情況。

1.4細菌的生化鑒定

將所分離細菌純化培養后接種于馬丁肉湯瓊脂平板上，放置于37℃的C02培養箱培養36h，觀察是否有溶血現象。……