一例水貂肺炎克雷伯氏菌與綠膿桿菌混合感染的確診

陳超陽　和彥良　占才超

摘要：水貂肺炎是影響水貂養殖業發展的一種主要疾病，主要由于感染克雷伯氏和綠膿桿菌所致。本文以某一感染水貂肺炎的水貂養殖場為例，來闡述此病的實驗室鑒定和預防措施。

關鍵詞：水貂肺炎；克雷伯氏；綠膿桿菌；實驗室鑒定；預防措施

山東省膠南地區某水貂養殖場所養水貂零散發生一種以敗血癥、高死亡率為癥狀的傳染病，病貂的主要臨床癥狀表現為精神沉郁、食欲廢絕，1～2日內突然死亡，個別死亡水貂出現口鼻出血，剖檢發現肺臟鮮紅。采集病料，經實驗室分離鑒定，確診為肺炎克雷伯氏菌與綠膿桿菌混合感染。現將結果報道如下。

1材料與方法

1.1樣品

患病死亡水貂肺臟，低溫運至實驗室，-20℃保存備用。

1.2主要試劑

TSA培養基、TSB培養基、細菌革蘭氏染色試劑、綠膿桿菌生化鑒定試劑盒、克雷伯氏菌生化鑒定試劑盒、rTaq酶及D12000 Marker等。

1.3病源分離培養

取病料肺臟，無菌條件下用手術刀剪開新鮮切口，用接種環沾取切面后劃線接種TSA平板，至37℃培養箱培養24～36h，觀察培養結果。從培養的平板上挑取單菌落接種TSB培養基，進行純化培養。

1.4涂片染色鏡檢

將純培養的細菌涂片，經革蘭氏染色，顯微鏡下觀察菌體形態。

1.5生化試驗

根據分離細菌的菌落形態和純培養結果，分別用綠膿桿菌生化鑒定試劑盒和克雷伯氏菌生化鑒定試劑盒進行生化試驗。

1.6PCR鑒定

取純培養菌液以12，000r/min離心5min，棄上清，用注射用水溶解菌泥，煮沸5min后作為DNA模板。采用本實驗室建立的綠膿桿菌和肺炎克雷伯氏菌的PCR方法進行鑒定。……