辛凌翔 常迪

摘要:作為運載工具,慢病毒載體將插入的目的基因導入至宿主細胞內,目的基因由此可于宿主細胞內進行復制或表達,因其具有廣闊的宿主范圍且能更加有效地引起細胞感染而被視為常用的基因導入方式之一。本文圍繞慢病毒載體的構成、慢病毒載體表達系統的優勢及演變等,開展相關研究狀況的系統綜述。
關鍵詞:慢病毒載體;病毒包裝;基因表達
慢病毒(Lentivirus)為二倍體RNA病毒,屬逆轉錄病毒科(Retrovidae),其感染特征為經顯性或隱性感染后,潛伏期較長,感染動物發病緩,常見的有:HIV(人類免疫缺陷病毒)、FIV(貓免疫缺陷病毒)以及EIAV(馬傳染性貧血病毒)等。慢病毒于宿主細胞中第一步會通過自身反轉錄酶作用,結合病毒RNA產生eDNA;第二步是將上一步驟所得eDNA當做模板,由此產生雙鏈DNA;第三步,經過雙鏈DNA環化反應,同時通過病毒整合酶作用,在宿主細胞染色體上依次進行整合與表達翻。
1慢病毒載體的結構
慢病毒載體作為重組逆轉錄病毒載體的一類,其基礎為慢病毒,其病毒基因組內含有關系到病毒活性以及病毒復制的重要序列,去掉此類序列,再根據試驗需要,在其基因組骨架中插入目的基因的序列,這樣既可以保證其生物安全性,又能達到基因轉移的目的。就整個慢病毒載體系統而言,應用率最高的為HIV載體系統,且所獲研究成果最多的為HIV-1型載體系統。以HIV-1的基因結構為例,HIV-1屬雙鏈RNA病毒,共含9個基因(如圖1所示)。
編碼病毒結構蛋白的基因主要有gag、pol和env?!?br>