薯莨塊莖不同溶劑提取液對桉樹青枯菌的抑菌活性

李曉菲，徐 政

(1.廣東省湛江市農業技術推廣中心，廣東湛江 524038；2.廣東省湛江市環境保護監測站，廣東湛江524022)

薯莨(DioscoreacirrhosaLour.)為薯蕷科植物，又名薯良、染布薯、紅藥子、長壽果等，是我國獨有的補益中草藥之一，主要分布于我國福建、臺灣、廣東、廣西、貴州、云南、西藏墨脫等地，其塊莖所含化學成分極其豐富，主要為鞣質及苷類[1]等，還含有酚類、蛋白質、糖類、黏液、淀粉及維生素C等成分[2]。目前，人們已從薯莨中分離得到酚性糖苷、鞣質右旋兒茶精、左旋表兒茶精及原花青色素[3]。薯莨鞣質能與蛋白質作用，凝固微生物體內的原生質，因此，其又具有抑菌作用[4]。據報道，薯莨酊劑或煎劑在試管內對金黃色葡萄球菌有抑制作用，對皮膚淺部真菌也有較好的治療效果[5]，也有報道薯莨對病毒性乙型肝炎具有一定療效[6]。中醫認為薯莨能活血補血，可以用于治療出血癥[7-8]，并具有理氣止痛、清熱解毒的功效[9]。筆者采用系統溶劑提取法，用不同極性的溶劑提取了薯莨塊莖中的有效成分并測定了其抑菌活性，以期為進一步研究薯莨在植物源殺菌劑方面的應用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1材料試驗材料：薯莨塊莖采集于廣東省順德市。樣品經清洗，陰干，粉碎備用。供試菌株桉樹青枯菌[Ralstoniasolanacearum(Smith)Yabuuchi]由廣東海洋大學農學院生物技術實驗室提供。

1.2方法

1.2.1薯莨塊莖提取液的制備。采用系統提取法，稱取100.0 g粉碎過篩的薯莨塊莖樣品，置于250 mL標本缸中，加入 100 mL石油醚，蓋嚴磨口蓋，浸漬過夜后將其放入預先準備好的超聲波儀中，采用相同用量溶劑，按30、30、15 min的時間順序分3次進行間歇式超聲提取，收集提取液，在50 ℃、0.08 MPa條件下進行旋轉蒸發濃縮至浸膏狀，轉入100 mL容量瓶中，用0.05%吐溫-80定容至濃度為1 g/mL(即1 mL提取液相當于1 g薯莨塊莖樣品)，即得石油醚提取物。

采用相同方法，用乙醚對上述殘渣進行浸提，得到乙醚提取物。方法同上，依次得到乙酸乙酯、丙酮、乙醇提取物。所有提取物均置于0～4 ℃冰箱中備用。

1.2.2薯莨塊莖不同溶劑提取液抑菌活性的測定。將牛津杯垂直放置在含有致病菌的NA平板上，在杯中加入提取液，置于37 ℃下培養48 h，采用十字交叉法測量抑菌圈直徑，每個處理3次重復。

2 結果與分析

2.1薯莨塊莖提取液的制備按照“1.2.1”方法進行提取液的制備，依次得到石油醚提取液、乙醚提取液、乙酸乙酯提取液、丙酮提取液、乙醇提取液，各部分得率見圖1。乙醇提取部分提取率最高，為36.36%。

圖1 薯莨塊莖提取液制備流程及得率Fig.1 Extraction scheme and yield of Dioscorea cirrhosa Lour.’s tubers

2.2薯莨塊莖不同極性溶劑提取液的抑菌活性薯莨塊莖提取液各有機提取部分均有一定的抑菌活性，且不同極性的組分抑菌效果有所差別。由圖2和表1可知，乙酸乙酯提取物的抑菌活性最好，濃度為1.00 g/mL時抑菌圈直徑達21.3 mm，濃度為0.10 g/mL時抑菌圈直徑為12.3 mm。乙醚提取物的抑菌效果較乙酸乙酯提取物弱，濃度為1.00 g/mL時抑菌圈直徑為19.1 mm，石油醚提取物的抑菌效果甚微。

3 結論與討論

薯莨塊莖各有機溶劑提取得到的不同極性組分均有一定的抑菌作用。提取溶劑極性從小到大依次為石油醚、乙醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇，其中采用乙酸乙酯提取的部分抑菌效果最佳，其提取率為1.28%，乙醚提取部分的抑菌效果次之。

采用不同極性的溶劑對薯莨塊莖活性成分進行提取，由于其中的成分不同，從而得到顏色各異的提取液。薯莨塊莖的不同化學組分在不同極性溶劑中的分散度不同，水提法得到的提取液易酶解甙類成分，且易霉壞變質[10]，又如薯莨塊莖中含有皂苷等黏液質類成分，不僅過濾困難，而且在減壓濃縮時會產生大量泡沫，又造成濃縮的困難，因此，排除了采用該方法。選用低沸點的有機溶劑提取能夠得到薯莨塊莖的不同極性組分，可以在不損壞有效活性成分的情況下得到相應濃縮液，并具有較好的抑菌效果，所以該試驗采用系統提取法，利用不同極性溶劑進行提取，最后得出乙酸乙酯提取物的抑菌效果較理想。當濃度為1.00 g/mL時，乙酸乙酯提取物對桉樹青枯菌的抑菌圈直徑可達21.3 mm，按照相似相溶的原理，薯莨塊莖提取的有效抑菌成分的極性更可能和乙酸乙酯比較接近，因此，有效抑菌成分更易分散在乙酸乙酯溶劑中。

注：a.乙酸乙酯提取物;b.乙醚提取物;c.丙酮提取物;d.乙醇提取物;e.石油醚提取物Note：a.Ethyl acetate extract；b.Ether extract；c.Acetone extract；d.Ethanol extract；e.Petroleum ether extract圖2 薯莨塊莖不同溶劑提取物對桉樹青枯菌的抑菌效果Fig.2 Inhibitory effects of different polar solvents extracts of Dioscorea cirrhosa Lour.’s tubers on Ralstonia solanacearum (Smith)Yabuuchi

表1 薯莨塊莖不同溶劑提取液的抑菌活性

注：“—”表示抑菌圈直徑小于8 mm

Note：“—” represented that the diameter of inhibitory ring was less than 8 mm

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