云南產辣木葉揮發油化學成分的GC-MS分析

梁文娟，王 獅，夏越欣，錢自欣，王洪玲

(1.云南農業大學食品科技學院，云南昆明 650201;2.江西中醫藥大學中藥資源與民族藥研究中心，江西南昌 330004)

辣木(Moringaoleifera)為辣木科(Moringaceae)辣木屬(Moringa)熱帶落葉喬木，原產印度，目前在亞洲和非洲熱帶和亞熱帶等地廣泛種植；20世紀初，我國云南已從緬甸引種，并在云南多地種植[1]。2012年，我國衛生部批準辣木葉作為新資源食品。因此，作為一種新型的保健食品，辣木的營養成分、化學成分、藥理和安全性等方面是國內外學者研究的重點。近年來，針對辣木營養成分研究結果顯示其葉、種子和花中均富含蛋白質，且氨基酸組成豐富[2]，同時各部位均富含礦物質，包括鈣、鉀、硫、鎂、鐵和多種微量元素[3]。云南農業大學食品科技學院前期對云南不同產地辣木葉營養成分的研究發現，采自云南麗江、西雙版納、德宏、普洱和楚雄等地的辣木葉在營養成分上也存在差異[4]，這一發現與2015年Asghari等[5]對伊朗東南部野生辣木(Moringaperegrina)干葉及種子營養成分含量隨季節和產地變化的研究結果相似。值得注意的是，人們針對辣木的化學成分和藥理活性的研究也展開了大量工作。迄今為止，從辣木的不同部位分離得到的小分子化學成分超過70個[1]，其類型豐富，主要包括黃酮類、三萜類、甾體類、生物堿類成分。藥理活性研究表明，辣木具有解痙、鎮痛、降壓、消炎、保肝、降血糖、降血脂、抑制腫瘤和拮抗阿爾茲海默癥中氧化應激等活性[6-9]。基于不同產地之間化學成分的類型和含量上的差異以及云南農業大學食品科技學院前期的研究結果，筆者首次對云南普洱、西雙版納、德宏、麗江、楚雄5地產辣木葉揮發油的化學成分進行了GC-MS分析，以期為進一步優化種植栽培區域、促進其資源的合理利用提供理論依據。

1 材料與方法

1.1材料Agilent 7890A/5975C 型氣相色譜-質譜聯用儀(GC-MS)(美國安捷倫公司)；色譜柱為HP-50 石英毛細管柱(0.25 μm×250.00 μm × 30.00 m)；可調式電熱套(北京科偉永興儀器有限公司)；CP313型電子天平(廣州市怡華新電子儀器有限公司)。

辣木葉于2014 年 10 月采自云南普洱、西雙版納、德宏、麗江、楚雄5地，由中國科學院張書東副研究員鑒定為MoringaoleiferaLam.。無水硫酸鈉(西隴化工股份有限公司，分析純)。

1.2揮發油的提取根據2010版中國藥典提取揮發油方法[10]，在相同條件下對云南5個產地(普洱、西雙版納、德宏、麗江、楚雄)辣木葉進行揮發性成分的提取。普洱產辣木葉干葉經超微粉碎，得100目微粉，稱取5個產地微粉各100.0 g，加入1 000 mL蒸餾水，浸泡1.0 h，借助水蒸氣蒸餾裝置，采用常壓水蒸氣蒸餾法提取其揮發油，微沸后保持4.0 h，提取時間為5.0 h，提取2次，收集合并所得揮發油并用無水硫酸鈉脫水，4 ℃下保存備用；其他4個產地辣木葉超微粉均以相同方式提取，獲得待測揮發油樣品。

1.3氣相色譜條件石英毛細管柱(0.25 μm×30 m×0.25 μm)，載氣為純度99.999%的氦氣，選擇氣化室溫度為250 ℃，初始溫度設定為40 ℃，同時保持1 min；此后，以5 ℃/min速度升至200 ℃；達200 ℃后以4 ℃/min速度上升至 250 ℃，升溫至250 ℃后保持 10 min。進樣口溫度設為 250 ℃，流速為1.0 mL/min；進樣量設定為1 μL，分流比為5∶1。離子化方式為EI離子源，其溫度設定為200 ℃，電離電壓設為 70 eV，四極桿溫度設定 150 ℃，溶劑延遲設定 3 min，掃描選擇：m/z 40～350 amu。

2 結果與分析

2.1云南西雙版納產辣木葉揮發油的化學成分經GC-MS定性分析從云南西雙版納產辣木葉揮發油中共鑒定出15個化學成分(表1)，分別占西雙版納產辣木葉揮發油總量的99.71%，化合物類型以脂肪烴類、萜類、甾體類、芳香化合物為主，主要成分有乙基環戊烷(28.74%)、1，2，4-三甲基環戊烷(9.90%)、1，2，3-三甲基環戊烷(10.20%)、2-甲基庚烷(5.57%)、2-甲基戊基異戊酸(5.21%)、1，3-二甲基環己烷(8.33%)、亞麻酸乙酯(9.31%)等。

2.2云南楚雄產辣木葉揮發油的化學成分經GC-MS定性分析從楚雄產辣木葉揮發油中共鑒定出25個化學成分(表2)，分別占楚雄產辣木葉揮發油總量的94.98%，化合物類型以脂肪烴類、萜類、甾體類、芳香化合物為主，主要成分有乙基環戊烷(15.13%)、1，2，4-三甲基環戊烷(5.18%)、1，2，3-三甲基環戊烷(5.33%)、亞麻酸(4.65%)、亞麻酸乙酯(9.30%)、2，2′-亞甲基雙[6-(1，1-二甲基乙基)-4-甲基-苯酚(22.24%)等。

表2 云南楚雄產辣木葉揮發油主要化學成分

2.3云南德宏產辣木葉揮發油的化學成分經GC-MS定性分析從德宏產辣木葉揮發油中共鑒定出17個化學成分(表3)，分別占德宏產辣木葉揮發油總量的69.18%，化合物類型以脂肪烴類、萜類、甾體類、芳香化合物為主，主要成分有乙基環戊烷(12.13%)、1，2，4-三甲基環戊烷(4.14%)、1，2，3-三甲基環戊烷(4.26%)、亞麻酸乙酯(3.85%)、去甲何帕烷(7.41%)、長葉烯(20.09%)等。

2.4云南麗江產辣木葉揮發油的化學成分經GC-MS定性分析從云南麗江產辣木葉揮發油中共鑒定出17個化學成分(表4)，分別占麗江產辣木葉揮發油總量的99.99%，化合物類型以脂肪烴類、萜類、甾體類、芳香化合物為主，主要成分有乙基環戊烷(24.98%)、1，2，4-三甲基環戊烷(8.55%)、1，2，3-三甲基環戊烷(8.90%)、1，3-二甲基環己烷(7.27%)、亞麻酸乙酯(13.91%)等。

表3 云南德宏產辣木葉揮發油主要化學成分

表4 云南麗江產辣木葉揮發油主要化學成分

2.5云南普洱產辣木葉揮發油的化學成分經GC-MS定性分析從云南普洱產辣木葉揮發油中共鑒定出20個化學成分，分別占普洱產辣木葉揮發油總量的99.99%，化合物類型以脂肪烴類、萜類、甾體類、芳香化合物為主，主要成分有乙基環戊烷(18.91%)、1，2，4-三甲基環戊烷(6.68%)、1，2，3-三甲基環戊烷(6.88%)、1，3-二甲基環己烷(5.78%)、亞麻酸乙酯(4.59%)、2，2′-亞甲基雙[6-(1，1-二甲基乙基)-4-甲基-苯酚(6.47%)、2-(4a，8-二甲基-6-氧-1，2，3，4，4a，5，6，8a-八羥基-萘亞甲基-2-丙醛(9.27%)、羊毛甾醇(16.50%)等。

表5 云南普洱產辣木葉揮發油主要化學成分

由表6可知，經GC-MS定性分析從云南產辣木葉揮發油中共鑒定出31個化學成分，分別占普洱、西雙版納、德宏、麗江、楚雄5個不同產地的揮發油總量的99.99%、99.71%、69.18%、99.99%和94.98%，化合物類型以脂肪烴類、萜類、甾體類、芳香化合物為主，其中共同含有的成分11種，在4個以上產地中含有的成分16種，主要成分有2，5-二甲基己烷(1.58%、2.39%、0.98%、2.04%、1.21%)、2，4-二甲基己烷(2.31%、3.48%、1.46%、3.05%、1.79%)、乙基環戊烷(18.91%、28.74%、12.13%、24.98%、15.13%)、1，2，4-三甲基環戊烷(6.68%、9.90%、4.14%、8.55%、5.18%)、1，2，3-三甲基環戊烷(6.88%、10.20%、4.26%、8.90%、5.33%)、2-甲基庚烷(3.81%、5.57%、2.29%、4.79%、3.58%)、2-甲基戊基異戊酸(3.57%、5.21%、2.18%、4.55%、2.73%)、1，3-二甲基環己烷(5.78%、8.33%、3.52%、7.27%、4.41%)、1，4-二甲基環己烷(1.66%、2.47%、1.02%、2.11%、1.27%)、辛烷(2.37%、3.41%、1.44 %、2.98%、1.81%)、亞麻酸乙酯(4.59%、9.31%、3.85%、13.91%、9.30%)等。值得注意的是，普洱產辣木葉特異性的含有羊毛甾醇(16.50%)、維生素E(2.20%)，德宏產辣木葉中特異性含有長葉烯(20.09%)；德宏和楚雄辣木葉中含有去甲何帕烷(7.41%、1.99%)。麗江和楚雄辣木葉中含有巴卡林烷(1.53%、0.47%)。綜上所述，云南不同產地間辣木葉揮發油成分差異較大，主要集中在分子量相對較大的成分差異，有待進一步系統的化學成分研究。

表6 云南5個產地辣木葉揮發油GC-MS 成分分析

3 結論與討論

該研究選擇云南普洱、西雙版納、德宏、麗江、楚雄5個產地的辣木葉干葉的揮發油成分為研究對象，借助GC-MS 對其中主要成分進行定性和初步定量分析，研究結果表明，云南產辣木葉揮發油中主要含有小分子脂肪酸和長鏈脂肪酸，且不同產地之間存在差異，普洱產辣木葉特異性的含有羊毛甾醇，作為膽固醇合成的中間體具有重要的生物學意義，羊毛甾醇的衍生物具有抗真菌活性[11]；德宏產辣木葉中特異性含有長葉烯(20.09%)，作為一種天然香料，長葉烯是香精香料調配的重要原料[12]。通過文獻調研發現不同產地、不同提取部位、不同提取方法得到的辣木葉揮發油成分不同，比如Marrufo等[13]通過GC和GC-MS的分析方法檢測了非洲東南部國家莫桑比克產辣木精油的成分，研究表明單其主要包括α-水芹烯，其次還含有二十六碳烷(13.9%)、二十五碳烷(13.3%)等。Gatade等[14]應用GC-MS法檢測發現辣木葉含有棕櫚酸、二十五烷、β-谷甾醇、植醇、十八酸甲酯和VE醋酸酯。Faizi等[15]應用GC-MS方法，指認了辣木根石油醚和二氯甲烷提取物中涉及脂肪酸、酯類、乙醇、硫代氨基甲酸酯類化合物、氨基酸、甾體等主要類型。Rigano等[16]報道辣木油可加速創面愈合、縮短愈合時間、減輕組織病理變化的作用，其主要活性成分有待進一步研究。前期研究發現云南不同產地間辣木葉在蛋白含量、氨基酸組成、黃酮類、多糖等成分差異較大[4]。

綜上所述，云南普洱、西雙版納、德宏、麗江、楚雄5個產地辣木葉揮發油化學成分涉及脂肪烴類、萜類、甾體類等，但具體化學成分組成相差較大，該研究為云南產辣木葉產地整理和資源開發提供了一定的數據支持，后期有必要從藥理活性的角度對辣木葉的化學成分進行深入研究，以期為進一步優化辣木種植栽培區域、促進其資源的合理利用提供參考。

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