飼用甜高粱青貯對綿羊血常規及血清內毒素濃度的影響

侯明杰,周恩光 ,付曉悅,尚占環,王虎成

(1.蘭州大學草地農業生態系統國家重點實驗室蘭州大學農業部草牧業創新重點實驗室蘭州大學草地農業科技學院,甘肅 蘭州 730020;2.蘭州大學生命科學學院,甘肅 蘭州 730000)

大力發展草產業,不僅關乎我國經濟的發展,而且對國家糧食安全和生態保護具有重要的意義。近30年來,隨著我國經濟結構變化以及政府對草產業發展的大力支持,我國草業的產業化、現代化程度得以不斷提高,已經基本形成了一個較為完善的產業體系。但是我國農業受美國現代農業模式影響,不顧國情片面追求規?；?導致養殖業與種植業嚴重脫節。這種種養分離的農業生產方式有很大弊病,是影響我國農業可持續發展的最大隱患。實行種養結合循環農業生產方式,不僅能夠降低糧食種植成本,還能降低畜禽養殖成本[1]。飼用甜高粱適應性強、耐刈割、含糖量高,是優良的飼料作物[2-5],對有效解決我國人多地少的矛盾和推動我國種養結合循環農業生產方式的發展意義重大。目前在我國西北地區,甜高粱青貯在奶牛、肉牛飼糧中已經得到廣泛的應用,青貯飼料由于其較低的pH值,過度采食可能會引起瘤胃酸中毒、拉稀、腹瀉等癥狀,高比例飼喂甜高粱青貯是否會對綿羊健康產生影響,在種養結合背景下如何將甜高粱青貯科學應用于肉羊產業,未見系統研究。通過血常規,觀察數量變化及形態分布,判斷疾病,是獸醫診斷病情常用的輔助檢查手段,而血液內毒素(LPS)濃度是動物多種并發癥的致病因子[6]?；诖?本研究以肉羊為研究對象,通過飼喂傳統飼糧(玉米青貯)和甜高粱青貯,對比研究試羊在不同飼喂階段(第30、第60、第90天)血常規參數及血液 LPS濃度的變化,為綿羊新型飼料資源的開發利用以及甜高粱在西北地區的推廣提供技術支持。

1 材料與方法

1.1 試驗方案 2016年7月,于甘肅省定西市安定區“蘭州大學肉羊養殖產學研基地”選取體況一致的3月齡杜泊羊、小尾寒羊各12只,隨機將同一品種試羊等數分為2組,分別飼喂裹包青貯(玉米青貯或甜高粱青貯),青貯料自由采食,精飼料及苜蓿顆粒按動物體重的1%及0.5%補飼,準確計算日采食量。試驗羊進行單欄飼養,自由飲水。甜高粱青貯、玉米青貯、苜蓿顆粒及精料補充料養分含量見表1和表2。于試驗期第30、第60、第90天分別采取血液,測定血常規及LPS濃度。

1.2 樣品采集與預處理 分別在試驗期第30、60、90天,晨飼前用注射器經頸靜脈采血,一部分于抗凝管,2小時之內測定血常規,另一部分經3 500 r/min離心15 min,收集血清,與-20℃保存,以備檢測 LPS濃度。

表1 粗飼料養分含量 (g/kg DM)

表2 試驗精料組成及營養水平 (干物質基礎)

1.3 測定指標與方法 使用血常規自動分析儀(BC-2008,Mindray,深圳)測定血液中白細胞數(WBC)、紅細胞數(RBC)、血紅蛋白含量(HGB)、平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、紅細胞壓積(HCT)、血小板數(PLT)、平均血小板體積(MPV)、平均紅細胞體積(MCV)、血小板分布寬度(PDW)。

血液內毒素(LPS)檢測按照綿羊脂多糖/內毒素(LPS)酶聯免疫分析試劑盒(上海潤裕公司)方法進行。

1.4 數據處理與分析 各測試指標經Excel 2003初步整理后,利用SPSS 20軟件對數據進行分析,對同一飼喂階段組間血常規參數和LPS進行一般線性模型分析,不同階段組內采進行單因素ANOVA分析。顯著水平為P＜0.05。

2 結果分析

2.1 不同青貯飼糧對綿羊血常規的影響 由表3可知,WBC及MCHC高于正常值,但未受到綿羊飼喂時間、品種、處理及其交互作用的影響。RBC、HGB、MCHC、HCT、MCV、MPV、PDW 均未受到品種、處理及其交互作用的影響;但在飼喂6 d和90 d時,杜泊羊WBC顯著高于小尾寒羊(P＜0.05);在飼喂90 d時杜泊羊PLT顯著高于小尾寒羊(P＜0.05);RBC、HCT、HGB隨著飼喂時間的增加而增加,且DY和HY組飼喂90 d時顯著高于30 d(P＜0.05);但血小板隨著飼喂時間的增加而減少,且DG和HG組飼喂90 d時顯著低于30 d(P＜0.05);其他血常規參數均未發生顯著變化。

2.2 不同青貯飼糧對綿羊血液內毒素濃度的影響 由表3可知,經過90 d的飼喂,血液LPS濃度未受到不同青貯飼糧處理及飼喂時間的影響,在飼喂90 d后杜泊羊血液LPS濃度顯著高于小尾寒羊(P＜0.05),但均在正常范圍之內(250 ng/L～965 ng/L)。

表4 不同青貯飼糧對綿羊血液內毒素濃度的影響

3 討論

3.1 不同青貯飼糧對綿羊血常規的影響 血常規是最一般、最基本的血液檢驗。醫生通過觀察數量變化及形態分布,來判斷疾病,其經常會受到品種、性別、年齡、季節等的影響與制約[7-9]。參閱盧宗藩[10]對健康綿羊生理指標的測定結果,本試驗WBC和MCHC高于正常范圍,但未受到綿羊飼喂時間,處理的影響。白細胞增高一般提示存在感染或其他炎癥,如腸炎、胰腺炎、闌尾炎等;WBC除了疾病因素可以引起變化外,亦受生理因素及其他原因影響,餐后、劇烈運動、寒冷、疼痛、恐懼等影響。本試驗研究發現,WBC高于正常值,且在飼喂60 d和90 d時,杜泊羊WBC顯著高于小尾寒羊(P＜0.05),可能是由于在采血過程中,杜泊羊相較于小尾寒羊,由于疼痛、恐懼,導致劇烈運動引起或在飼喂高比例的青貯飼糧,綿羊存在感染或其他炎癥,需進一步研究;MCHC是指每個紅細胞內所含血紅蛋白的平均值,研究發現,嘔吐、腹瀉等病理情況下,細胞縮水,體積變小,在抽血的過程中發生溶血等均可導致MCHC升高[12];此外,MCHC的升高及RBC和HGB的升高可能預示著巨幼細胞性貧血癥的出現[13]。研究發現,RBC和HGB在正常范圍內,表明不是貧血癥狀,且供試羊未發生嘔吐、腹瀉等病理情況,MCHC的升高可能是由于是在晨飼前采血,導致平均血紅蛋白的升高或者在采血過程中發生溶血導致。其余各項血液生理指標均在參考值范圍內,其中RBC、HCT、HGB隨著飼喂時間的增加而增加,這與之前的研究結果相一致[7-9],且在飼喂玉米青貯90 d時顯著高于30 d(P＜0.05),飼喂甜高粱青貯無顯著差異(P＞0.05);PLT隨著飼喂時間的增加而減少,符合動物生長規律[14],但小尾寒羊和杜泊羊在飼喂甜高粱青貯90 d時,顯著低于30 d(P＜0.05),其原因有待深入研究;其他血常規參數均未發生顯著變化。說明甜高粱青貯與玉米青貯相比并未對綿羊血常規產生顯著影響,可作為綿羊優質飼糧。

3.2 不同青貯飼糧對綿羊血液LPS濃度的影響LPS主要是指當細菌死亡溶解或者人工方法破壞細胞后釋放出來的一種對宿主有毒性作用的大分子物質,主要在胃腸道產生。當飼糧中精粗比提高,或者飼喂高比例的青貯型飼糧,使瘤胃pH值下降,導致瘤胃內革蘭陰性菌的死亡以及細胞自溶,造成釋放致使瘤胃LPS濃度增加,經瘤胃上皮吸收入血液,從而導致血液LPS濃度升高[15-17],研究發現,血液LPS濃度是動物多種并發癥的致病因子[6],因此通過血液LPS濃度能夠間接鑒定綿羊采食高比例甜高粱青貯是否會引起胃腸道微生物的變化及腹瀉。研究結果表明,經過90 d的飼喂,血液LPS濃度未受到不同青貯飼糧處理及飼喂時間的影響,在飼喂90天后杜泊羊血液LPS濃度顯著高于小尾寒羊(P＜0.05),但均在正常范圍之內,說明甜高粱青貯并未對綿羊血液LPS濃度產生顯著影響。

4 結論

本試驗WBC(114.22×109/L～181.60×109/L)和MCHC(495.86～647.00 g/L)高于正常范圍,但未受到綿羊飼喂時間、處理的影響。其余各項血液生理指標和血液LPS濃度均在參考值范圍內,說明飼喂甜高粱青貯與玉米青貯相比,并未對綿羊健康產生影響,可作為綿羊優質飼糧進行推廣。