任麗 黃銘娜 馮季靈 吳錫驊 蘇施雅

[摘要]目的探討急性腦梗死（ACI）合并2型糖尿病（T2DM）患者外周血免疫調節T淋巴細胞的表達特點及相關影響因素。方法選取在我院治療的ACI患者129例，根據是否合并有T2DM將其分為單純ACI組67例和ACI合并T2DM組62例。另同期選取30例健康體檢者為正常對照組（NC組）。檢測各組外周血輔助性T細胞1（Th1）、Th2、Th17、調節性T細胞（Treg）亞群及相關效應因子表達水平。結果與NC組相比，ACI合并T2DM組Th1、Th17、Th1/Th2、Th17/Treg及白介素-17（IL-17）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）升高，Th2、Treg及白介素-10（IL-10）降低;與單純ACI組相比，ACI合并T2DM組Th1、Th17、Th1/Th2、Th17/Treg及IL-17和TNF-α升高，Treg降低，差異均具有統計學意義（P<0.05）。Pearson相關分析顯示：糖化血紅蛋白（HbAlc）與Th1、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-17和TNF-α呈正相關（r=0.35～0.56，P<0.05）;與Treg和IL-10呈負相關（r=-0.46，-0.39，P<0.05）。多元回歸分析結果顯示：低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）是Th1影響因素，舒張壓（DBP）和HbAlc是Th2及Th1/Th2影響因素，LDL-C和空腹血糖（FPG）是Th17影響因素，TG和HbAlc是Treg影響因素，LDL-C和HbAlc是Th17/Treg影響因素。結論ACI合并T2DM患者外周血存在Treg數目減少及Th1/Th2和Th17/Treg比例失衡。

[關鍵詞]急性腦梗死;2型糖尿病;T淋巴細胞亞群;調節性T細胞

中圖分類號：R587.1：R743.3文獻標識碼：A文章編號：1009-816X（2018）06-0457-04

doi：10.3969/j.issn.1009-816x.2018.06.005

研究顯示免疫調節T淋巴細胞如輔助性T細胞（Th）和調節性（Treg）細胞在腦梗死發生、發展中扮演著重要角色[1，2]。高血糖是急性腦梗死（ACI）患者發生的獨立危險因素。2型糖尿病（T2DM）患者存在細胞及體液免疫異常，T淋巴細胞可作為評價糖尿病患者免疫狀態的重要指標[3，4]。但目前關于ACI合并T2DM患者免疫調節T淋巴細胞亞群分布特點研究仍鮮有報道，且未有研究系統分析影響ACI合并T2DM患者免疫調節T淋巴細胞比例的相關影響因素。本文對在我院治療的129例急性腦梗死患者進行T淋巴細胞亞群表達檢測，旨在探討ACI合并T2DM患者T淋巴細胞亞群表達特點及臨床意義，并分析影響其表達的相關因素。

1資料與方法

1.1一般資料：選取2015年1月至2017年5月在我院神經內科住院治療的129例ACI患者，其中男78例，女51例，年齡44～75歲，平均（66.42±10.28）歲，合并有T2DM的62例ACI患者納入ACI合并T2DM組;無合并糖尿病的67例ACI患者納入ACI組。

納入標準：（1）所有納入患者ACI診斷明確，均符合全國第四屆腦血管病會議修訂的診斷標準[5]，且經頭顱CT和（或）磁共振成像（MRI）等影像資料證實;（2）T2DM患者診斷均符合WHO1999年糖尿病診斷標準;（3）首次發病;（4）急性起病，發病至入院時間<24h。排除標準：（1）既往腦梗死、腦出血、腦部腫瘤等病史患者;（2）合并糖尿病急性并發癥、全身活動性感染者;（3）合并有血液系統、免疫系統及內分泌系統疾病者;（4）3個月內有外傷、手術、輸血及服用抗炎藥物、激素或免疫抑制劑者;（5）合并有嚴重肝腎心功能不全等患者。同期隨機選取本院健康體檢中心30例健康體檢者為正常對照組（NC組）。本研究獲得醫院倫理委員會批準，且所有入組患者均已簽署知情同意書。

1.2方法：

1.2.1實驗室檢查：所有受試者均在空腹狀態下計算體質量指數（BMI），并記錄患者平靜狀態下收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）及心率;入院次日清晨采集空腹血15ml，分別測定空腹血糖（FPG）、血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白-膽固醇（HDL-C）及糖化血紅蛋白（HbAlc）等指標水平。

2結果

2.1各組一般資料及生化指標比較：見表1。

2.4免疫調節T淋巴細胞比例影響因素的多因素分析：分別以Th1、Th2、Th17、Treg細胞比例及Th1/Th2、Th17/Treg比值為因變量，以性別、年齡、BMI、SBP、DBP、心率、高血壓比例、高脂血癥比例、吸煙飲酒史、TC、TG、LDL-C、HDL-C、FPG和HbAlc水平等指標為自變量，多元回歸分析結果顯示：LDL-C是Th1影響因素，DBP和HbAlc是Th2及Th1/Th2影響因素，LDL-C和FPG是Th17影響因素，TG和HbAlc是Treg影響因素，LDL-C和HbAlc是Th17/Treg影響因素，見表3。

3討論

ACI患者外周血受多種因素影響出現T淋巴細胞亞群分布異常[6]，如ACI合并T2DM患者體內存在T淋巴細胞亞群重新分布，合并糖尿病患者更容易出現免疫功能紊亂[7]。

Th1細胞是由初始CD4+T細胞在IL-2和干擾素-γ（IFN-γ）誘導下分化形成，主要參與機體細胞免疫過程。Th2細胞主要分泌IL-5、IL-10等細胞因子，激活B淋巴細胞介導的體液免疫過程。Th1細胞可參與T2DM發生發展過程。T2DM外周血存在Th1細胞升高及Th2降低[8]。研究發現，IFN-γ、IL-2等Th1細胞因子在ACI患者腦組織功能損傷中起重要作用[9，10]。本研究也得與De等[11]類似結果。本文認為，T2DM加重ACI患者免疫調節紊亂的機制有：（1）晚期終末糖代謝產物促進氧自由基生成，誘發氧化應激反應[11];（2）Th1細胞功能減弱，Th2細胞功能增強，Th1/Th2比例失衡，誘導炎癥反應發生。但目前具體相關調節機制仍鮮有報道，有待進一步研究。

既往認為，Th1和Th2比例失衡是ACI發生的免疫學基礎。而近來研究發現Th17及Treg細胞也可通過多種途徑參與ACI的發生發展過程[12]。Th17和Treg細胞是由初始T細胞分化出的不同亞型，二者在分化上相互排斥、功能上相互拮抗[13]。Miossec等[14]研究證實，Th17可通過促進機體內皮細胞釋放IL-17參與腦梗死區細胞凋亡過程，機體IL-17水平與ACI患者病情嚴重程度呈正相關。Treg細胞是在TGF-β誘導下分化形成的具有免疫抑制功能的T細胞亞群，其可通過多種途徑抑制初始T細胞、CD4+T細胞和CD8+T細胞增殖和分化。動物實驗發現，Treg細胞可通過分泌IL-10改善腦缺血再灌注大鼠神經功能損傷程度[15]。而Dolati等[16]對30例ACI患者外周血Th17和Treg細胞頻率進行檢測，結果發現患者外周血Treg細胞比例顯著降低，Th17比例顯著增加，下游TGF-β表達水平顯著降低。本研究中單純ACI組患者Th17、Treg細胞比例與上述結果類似。但與單純ACI組比，ACI合并T2DM患者Th17細胞比例及Th17/Treg比值更高，Treg細胞比例更低，血清IL-17表達水平明顯升高。Feuerer等[17]也發現采用高脂飲食誘導肥胖小鼠，與正常小鼠相比，肥胖小鼠內臟組織中出現Treg細胞數量及比例下降，Th17細胞比例升高。而Kuriya等[18]則認為T2DM患者本身即存在Th17/Treg軸免疫失衡，故上述結果均表明ACI患者存在一定程度的Th17/Treg比例失衡，而T2DM是加重ACI患者Th17/Treg軸功能平衡失調的重要影響原因。

T2DM發展成為ACI與多種危險因素有關，包括年齡、血糖控制水平、合并有高血壓、高血脂等[3]。本文結果表明T2DM患者更易合并血壓、血脂等代謝異常情況，血壓、血糖和血脂異常能對患者體內T淋巴細胞亞群分布產生影響，且患者近期血糖控制情況與免疫T淋巴細胞亞群明顯相關。T2DM合并血糖、血脂等代謝異常能夠刺激機體產生持續慢性炎癥反應，可進一步加重ACI合并T2DM患者體內免疫異常反應[19]。故建議對于ACI合并T2DM患者，急性期綜合監測并及時控制患者體內血脂異常及血壓穩定非常重要，HbAlc水平也能在一定程度上反映出患者外周血免疫細胞亞群異常分布情況。

本文研究細胞免疫功能參與ACI患者的發生發展過程，將為未來ACI的治療提供更多思路。仍存在不足之處，比如納入例數較少，循證醫學級別較弱、未設置糖尿病對照組，研究結果的代表性和推廣性有一定限制。我們將進一步納入更多的病例數，同時對腦梗死急性期及慢性期患者進行分層研究。

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（收稿日期：2018-5-31）