基于表型性狀及抗病標(biāo)記的番茄種質(zhì)資源遺傳多樣性分析

張倩男，王曉敏,芮文婧，胡學(xué)義，胡新華，付金軍，高艷明, 2，，李建設(shè), 2, ，張亞紅, 2, *

(1.寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院，寧夏 銀川 750021；2.寧夏設(shè)施園藝(寧夏大學(xué))技術(shù)創(chuàng)新中心，寧夏 銀川 750021；3.寧夏現(xiàn)代設(shè)施園藝工程技術(shù)研究中心，寧夏 銀川 750021；4.寧夏巨豐種苗有限責(zé)任公司，寧夏 銀川 750021)

【研究意義】番茄(Solanumlycopersicum)為茄科一年生或多年生草本植物，原產(chǎn)于中美洲和南美洲，現(xiàn)作為食用蔬果已被全球性廣泛種植，因其味美多汁并含有豐富礦物質(zhì)以及維生素和番茄紅素等活性物質(zhì)，一直都深受人們的喜愛(ài)。此外，番茄是自花授粉型植物，適應(yīng)性廣、產(chǎn)量高且栽培方式多樣，還可以作為重要的蔬菜加工原料，在提高人民的生活水平和加快經(jīng)濟(jì)發(fā)展中起著重要作用[1]。【前人研究進(jìn)展】遺傳多樣性是指種內(nèi)不同種群之間或一個(gè)種群內(nèi)不同個(gè)體之間的遺傳變異，多樣化的遺傳資源是品種改良的基礎(chǔ)[2-3]。由于有限的馴化資源和長(zhǎng)期對(duì)有益性狀的高壓選擇，栽培種番茄的遺傳背景越來(lái)越狹窄，因此種質(zhì)資源的廣泛收集、鑒定、繁殖和傳播對(duì)于番茄育種至關(guān)重要[4]。遺傳多樣性具有可遺傳性和可標(biāo)記性兩個(gè)基本特征，因此生物所有存在差異表現(xiàn)的基因突變型均可作為遺傳標(biāo)記。遺傳標(biāo)記包括：形態(tài)標(biāo)記、細(xì)胞學(xué)標(biāo)記、生化標(biāo)記和分子標(biāo)記，其中形態(tài)標(biāo)記與分子標(biāo)記相結(jié)合是研究作物遺傳多樣性的有效途徑[3]。對(duì)于番茄種質(zhì)的遺傳多樣性有很多學(xué)者已經(jīng)進(jìn)行了比較深入的研究[5-6]，龔亞菊[7]等對(duì)49份大果番茄的農(nóng)藝性狀進(jìn)行遺傳多樣性分析和聚類分析，篩選出6份綜合性狀優(yōu)良的種質(zhì)材料應(yīng)用于大果番茄育種和生產(chǎn)中。Kochieva[8]對(duì)58個(gè)普通和野生番茄品種進(jìn)行SSR分子標(biāo)記鑒定，研究發(fā)現(xiàn)在擴(kuò)增出的318個(gè)片段中，多態(tài)性率為95.6 %。鄧學(xué)斌[9]等分別利用20個(gè)表型性狀和均勻覆蓋12條染色體的40個(gè)SNP標(biāo)記，對(duì)3026份加工番茄同類型種質(zhì)資源進(jìn)行10種初始核心種質(zhì)的構(gòu)建。番茄DNA分子標(biāo)記在番茄抗病蟲(chóng)害(白粉病、煙草花葉病毒病、黃化曲葉病毒病和根結(jié)線蟲(chóng)等)育種中應(yīng)用比較廣，提高了育種效率[10-11]。李亞玲[12]利用SNP標(biāo)記鑒定47份番茄是否能夠抗根結(jié)線蟲(chóng)病，最終篩選出3份番茄抗病材料。彭祥珍[13]利用田間接種鑒定和分子標(biāo)記對(duì)72份種質(zhì)資源進(jìn)行篩選，獲得11份含Ty-I基因的種質(zhì)資源。目前，大多學(xué)者都只探討了番茄的部分品質(zhì)性狀或利用單一的方法對(duì)其進(jìn)行分類，而表型性狀調(diào)查和分子鑒定結(jié)合起來(lái)對(duì)番茄種質(zhì)資源遺傳多樣性進(jìn)行分析鮮有報(bào)道。【本研究切入點(diǎn)】本研究采用多元統(tǒng)計(jì)法[14],結(jié)合形態(tài)學(xué)標(biāo)記和抗病性分子標(biāo)記對(duì)收集到的117份番茄種質(zhì)資源進(jìn)行遺傳多樣性分析。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以期明確各種質(zhì)資源材料的綜合性狀特性，為這些種質(zhì)材料在番茄品質(zhì)改良方面的利用提供依據(jù)，進(jìn)而為番茄種質(zhì)資源研究和育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)材料來(lái)源于寧夏大學(xué)農(nóng)學(xué)院園林系蔬菜課題組和寧夏巨豐種苗有限責(zé)任公司共同收集的117份番茄種質(zhì)材料，編號(hào)依次為R1～R117。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)材料于2016年10月播種于寧夏大學(xué)試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)育苗溫室，每份種質(zhì)材料播種9株在72孔穴盤中進(jìn)行育苗，育苗基質(zhì)為草炭和蛭石(2︰1)及有機(jī)肥料，待其長(zhǎng)到5～6片真葉時(shí)選取大小均勻的幼苗，12月4日定植于寧夏大學(xué)試驗(yàn)農(nóng)場(chǎng)日光溫室。田間溝心距1.2 m，株距30 cm，壟高20 cm，采用單行栽植，常規(guī)田間管理。

1.3 表型性狀調(diào)查

表型性狀調(diào)查包括：首花序節(jié)位、單花序果數(shù)、果柄長(zhǎng)度、果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑、果型指數(shù)、果梗洼大小、單果重、硬度、可溶性固形物含量、果肉厚、心室數(shù)、單果種子數(shù)、葉片長(zhǎng)、葉片寬、成熟果色、生長(zhǎng)習(xí)性、生長(zhǎng)勢(shì)、葉片類型、葉片形狀、綠肩有無(wú)、果頂形狀共22個(gè)重要農(nóng)藝性狀，具體方法參照《番茄種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》[15]， 并結(jié)合種質(zhì)材料生長(zhǎng)的情況略作調(diào)整。其中用RHS Colour Chart色卡測(cè)定成熟果色，用MNT-150T游標(biāo)卡尺進(jìn)行測(cè)量果柄長(zhǎng)度、果實(shí)縱橫徑、果梗洼大小、葉片長(zhǎng)寬，可溶性固形物含量采用TD-45糖度計(jì)測(cè)定，果實(shí)硬度用GY-4硬度計(jì)進(jìn)行測(cè)量。

1.4 抗病標(biāo)記分子檢測(cè)

番茄材料生長(zhǎng)期間，取少量幼嫩葉片保存于-80 ℃超低溫冰箱待用，用改良后的堿式法[16]提取基因組DNA，最終稀釋濃度至50 ng·μl-1，置-20 ℃冰箱保存。根據(jù)前人研究結(jié)果收集到抗TY病毒病、花葉病毒病、根結(jié)線蟲(chóng)病、葉霉病4種病害的5個(gè)分子標(biāo)記分別為：Ty1[17]、Ty3[18]、Tm-2a[19]、Mi[18]和Cf9[20]，引物由北京奧科鼎盛生物有限公司進(jìn)行合成。

PCR反應(yīng)總體積為10 μl，反應(yīng)程序?yàn)?4 ℃預(yù)變性5 min；94 ℃變性30 s，最適溫度退火30 s，72 ℃延伸40 s，30個(gè)循環(huán)；72 ℃延伸7 min，4 ℃保存。將PCR擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物于1.5 %的瓊脂糖凝膠中電泳檢測(cè)[16]，電泳程序?yàn)椋?00 V電壓，電泳50 min，用凝膠成像系統(tǒng)觀察拍照，并記錄電泳結(jié)果。在擴(kuò)增產(chǎn)物電泳圖中，找出與抗病性連鎖的目標(biāo)條帶，有抗性條帶的記為“R”，為抗病材料；有感病條帶的記為“S”，為感病材料。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析

選取種質(zhì)材料間存在較大差異的質(zhì)量性狀包括：成熟果色、生長(zhǎng)習(xí)性、生長(zhǎng)勢(shì)、葉片類型、葉片形狀、有無(wú)綠肩、果頂形狀、抗TY病毒病、抗番茄花葉病毒、抗根結(jié)線蟲(chóng)病和抗葉霉病，共11個(gè)質(zhì)量性狀分析其頻率分布和多樣性指數(shù)。對(duì)首花序節(jié)位、單花序果數(shù)、果柄長(zhǎng)度、果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑、果型指數(shù)、果梗洼大小、單果重、硬度、可溶性固形物含量、果肉厚、心室數(shù)、單果種子數(shù)、葉片長(zhǎng)和葉片寬15個(gè)數(shù)量性狀進(jìn)行平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)、遺傳多樣性指數(shù)、特征值、貢獻(xiàn)率分析[21]。

數(shù)據(jù)整理在Excel 2007中進(jìn)行，利用SPSS 20.0軟件進(jìn)行方差分析和相關(guān)性分析。基于平均值和標(biāo)準(zhǔn)差對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行10個(gè)等級(jí)的劃分，每0.5σ為一級(jí)，σ為標(biāo)準(zhǔn)差，計(jì)算Shannon-Wiener多樣性指數(shù)(H′)，其計(jì)算公式為：H′=-∑PilnPi(i=1,2,3…), 其中Pi是某性狀第i個(gè)級(jí)別的材料數(shù)占總材料數(shù)的百分比[22]。利用SAS 8.2軟件采用UPGMA法進(jìn)行聚類分析，繪制樹(shù)狀聚類圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 數(shù)量性狀變異分析

根據(jù)表型性狀田間考查結(jié)果，對(duì)可溶性固形物、果梗洼大小、果實(shí)縱橫徑、單果重等15個(gè)表型性狀進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算其變異幅度、均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)和F值，如表1所示，單果重和單果種子數(shù)的變異幅度較大，標(biāo)準(zhǔn)差也相對(duì)較高分別為61.73和42.13，具有較高的離散程度。從變異系數(shù)可發(fā)現(xiàn)，117份供試材料在各數(shù)量性狀中具有不同程度的變異，其中單果種子數(shù)、心室數(shù)、單果重、硬度、果型指數(shù)的變異系數(shù)相對(duì)較高，依次為61.70 %、52.27 %、46.55 %、33.04 %、30.12 %，均達(dá)到30 %以上，表明其具有較高的變異程度，果梗洼大小和果肉厚的變異系數(shù)較小，分別為3.53 %和7.21 %，說(shuō)明其變異程度低。通過(guò)計(jì)算F值發(fā)現(xiàn)，種質(zhì)材料各表型性狀的遺傳差異達(dá)到極顯著水平，說(shuō)明供試種質(zhì)材料間存在極大的遺傳差異。

2.2 表型性狀遺傳多樣性分析

2.2.1 質(zhì)量性狀遺傳多樣性分析 對(duì)供試的117份番茄種質(zhì)資源材料的11個(gè)質(zhì)量性狀(包括番茄黃化曲葉病、花葉病毒病、根結(jié)線蟲(chóng)病、葉霉病4種病害的5種抗病分子標(biāo)記檢測(cè)結(jié)果)進(jìn)行遺傳多樣性分析，如表2所示。通過(guò)計(jì)算其遺傳多樣性指數(shù)發(fā)現(xiàn)：11個(gè)質(zhì)量性狀的遺傳多樣性指數(shù)變化范圍在0.366～1.198，成熟果色和果頂形狀的變異類型較為豐富，遺傳多樣性指數(shù)相對(duì)較高，分別為1.196和1.198，其中成熟果色主要以紅色和粉紅色為主，頻率分別為37.6 %和34.2 %，占到總材料數(shù)的71.8 %，而成熟果色為黃綠色和黃色的材料很少，兩者共占總材料數(shù)的3.4 %。果頂形狀多呈圓平狀，分布頻率為41.03 %，微凸?fàn)罟數(shù)牟牧项l率為14.53 %，這些材料較為符合商品果的果頂形狀要求。生長(zhǎng)勢(shì)的變異類型與成熟果色和果頂形狀同樣豐富，其遺傳多樣性指數(shù)為0.775，生長(zhǎng)勢(shì)較強(qiáng)的材料數(shù)最多，占總材料的44.44 %。所有供試種質(zhì)材料以無(wú)限生長(zhǎng)習(xí)性為主，分布頻率高達(dá)86.32 %，有限生長(zhǎng)型的僅占13.68 %；以無(wú)果肩為主，分布頻率為84.62 %，無(wú)果肩的材料分布頻率為25.38 %。在第二穗果成熟期對(duì)番茄葉片類型及葉片形狀這兩個(gè)葉部性狀進(jìn)行調(diào)查，通過(guò)計(jì)算得到其遺傳多樣性指數(shù)分別為0.940和0.674，葉片類性以普通型居多，頻率達(dá)到63.25 %；其次為復(fù)寬型，分布頻率為21.37 %；葉片形狀以羽狀復(fù)葉為主，占總材料數(shù)的59.83 %。通過(guò)對(duì)117份種質(zhì)資源材料進(jìn)行抗病標(biāo)記檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)抗黃花曲葉病的材料僅占總數(shù)的5.12 %，抗花葉病毒病的材料占11.97 %，大多數(shù)材料均抗根結(jié)線蟲(chóng)和葉霉病，頻率分別為76.07 %和88.03 %。總體看來(lái)，質(zhì)量性狀的遺傳變異均較為豐富。

表1 番茄種質(zhì)資源數(shù)量性狀遺傳多樣性分析

注：* 在 0.05 水平上顯著相關(guān)；** 在0.01 水平上極顯著相關(guān)。

表2 番茄種質(zhì)資源質(zhì)量性狀頻率分布和多樣性指數(shù)

注：成熟果色：1黃綠：FAN3 144A-145A，2橘黃：FAN4 163A，3紅：FAN4 169A-178C,4紅褐：165A-N170A,5粉：179A-N180C；生長(zhǎng)習(xí)性：1有限，2無(wú)限；生長(zhǎng)勢(shì)：1極弱，2弱，3中，4強(qiáng)，5極強(qiáng)；葉片類型：1普通型，2薯葉型，3復(fù)寬型，4復(fù)細(xì)型；葉片形狀：1羽狀復(fù)葉，2二回羽狀復(fù)葉；果肩：1有，2無(wú)；果頂形狀：1深凹，2微凹，3圓平，4微凸，5凸尖；黃化曲葉病、花葉病毒病、根結(jié)線蟲(chóng)病、葉霉病：1感，2抗。

2.2.2 數(shù)量性狀遺傳多樣性分析 對(duì)供試的117份番茄種質(zhì)資源材料的14個(gè)數(shù)量性狀進(jìn)行遺傳多樣性分析，計(jì)算出其遺傳多樣性指數(shù)(表3)，結(jié)果表明：14個(gè)數(shù)量性狀的遺傳多樣性指數(shù)分布范圍在1.363～2.049，其中首花序節(jié)位和果肉厚這2個(gè)性狀遺傳多樣性指數(shù)較高，分別為2.049和2.048，表明其遺傳變異較為豐富；遺傳多樣性指數(shù)最低的性狀為果型指數(shù)，為1.363，表明其變異類型相對(duì)較少；14個(gè)數(shù)量性狀中，有12個(gè)性狀的遺傳多樣性指數(shù)均大于1.9，表明數(shù)量性狀的遺傳多樣性較為豐富。

2.3 相關(guān)性分析

為進(jìn)一步了解供試材料不同性狀之間的關(guān)聯(lián)度，提高種質(zhì)性狀的選擇效率，對(duì)117份種質(zhì)材料的15個(gè)數(shù)量性狀進(jìn)行遺傳相關(guān)性分析，表4表明：與心室數(shù)呈極顯著相關(guān)的性狀最多，有9個(gè)，其中與果實(shí)縱徑、果梗洼大小、單果重呈極顯著正相關(guān)，與首花序節(jié)位、單花序果數(shù)、果實(shí)橫徑、果型指數(shù)、硬度、果肉厚呈極顯著負(fù)相關(guān)，與單果重的相關(guān)系數(shù)最高，為0.716，初步表明心室數(shù)與單果重的遺傳相關(guān)性最大；與單果重呈極顯著相關(guān)的性狀數(shù)目次之，包含8個(gè)，其中與果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑、果梗洼大小、心室數(shù)、單果種子數(shù)呈極顯著正相關(guān)，與單花序果數(shù)、果型指數(shù)、可溶性固形物含量呈極顯著負(fù)相關(guān)。首花序節(jié)位僅與心室數(shù)呈極顯著負(fù)相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為-0.258；葉片寬僅與單花序果數(shù)呈極顯著正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.250。不同性狀間存在著復(fù)雜的相關(guān)關(guān)系，且大部分都表現(xiàn)為顯著或極顯著的相關(guān)性。

2.4 主成分分析

表3 番茄種質(zhì)資源數(shù)量性狀遺傳多樣性分析

表4 15個(gè)數(shù)量性狀相關(guān)性分析

注：* 在 0.05 水平(雙側(cè))上顯著相關(guān)；** 在0.01 水平(雙側(cè))上極顯著相關(guān)。1:首花序節(jié)位；2:單花序果數(shù)；3:果柄長(zhǎng)度；4:果實(shí)縱徑； 5:果實(shí)橫徑； 6:果型指數(shù)；7:果梗洼大小；8:單果重； 9:硬度； 10:可溶性固形物含量；11:果肉厚；12:心室數(shù)；13:單果種子數(shù)；14:葉片長(zhǎng)；15:葉片寬。

對(duì)117份種質(zhì)材料的遺傳差異達(dá)極顯著的15個(gè)數(shù)量性狀及變異類型豐富的3個(gè)質(zhì)量性狀進(jìn)行主成分分析，如表5所示，前8個(gè)的主成分的特征值大于或近似等于1，累計(jì)貢獻(xiàn)率為80.8 %。第一主成分特征值為4.564，貢獻(xiàn)率為24.0 %，其中單花序果數(shù)的特征向量最大，為0.413，首花節(jié)節(jié)位、果實(shí)縱橫徑、果實(shí)硬度的特征向量也相對(duì)較大，均大于0.300，表明第一主成分的影響因子主要是花數(shù)和果實(shí)大小的性狀。第二主成分的特征值為2.479，貢獻(xiàn)率為13.1 %，果型指數(shù)和單果重的特征向量較大，可見(jiàn)這一主成分主要與果型和果重相關(guān)。 第三主成分心室數(shù)的特征向量較大，果頂形狀的特征向量有較高的負(fù)值，這2個(gè)性狀均與果實(shí)形狀相關(guān)。第四主成分的貢獻(xiàn)率主要由可溶性固形物含量、單果種子數(shù)及成熟果色這3個(gè)性狀影響，其特征向量分別為0.418、-0.470和0.453。在第五主成分中，生長(zhǎng)勢(shì)和葉片形狀的特征向量較大，尤其是葉片形狀，特征向量為0.511，這一主成分貢獻(xiàn)率主要由葉片形狀決定。第六主成分的貢獻(xiàn)率為5.6 %，主要是由果柄長(zhǎng)度影響，其特征向量為0.588。第七主成分中生長(zhǎng)勢(shì)的特征向量為負(fù)值最大，表明這一主成分大時(shí)，生長(zhǎng)勢(shì)較弱。第八主成分中，生長(zhǎng)勢(shì)和果梗洼大小的特征向量較大，表明這一主成分主要影響因子為這2個(gè)性狀。

表5 番茄種質(zhì)資源18個(gè)性狀的主成分分析

2.5 聚類分析

對(duì)117份種質(zhì)的26個(gè)性狀進(jìn)行聚類，分析其親緣關(guān)系遠(yuǎn)近，結(jié)果表明(圖1)：供試種質(zhì)在歐式距離為0.78時(shí)可聚為Ⅶ大類，第Ⅰ類包括19份材料，第Ⅱ類包括35份材料，第Ⅲ類包括50份材料，第Ⅳ類包括10份材料，第Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ類各包括1份材料，均屬特殊材料。Ⅶ個(gè)番茄類群的質(zhì)量性狀描述如表6所示，各個(gè)組群表型性狀特征如表7所示。通過(guò)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn)，同時(shí)抗葉霉病、根結(jié)線蟲(chóng)病這2種病害的材料有24份，同時(shí)抗葉霉病、花葉病毒病的材料有10份，同時(shí)抗Ty1、葉霉病的材料有2份，同時(shí)抗Ty3、根結(jié)線蟲(chóng)病的材料有1份。同時(shí)抗3種病害的材料有3 份，其中一份抗Ty3、根結(jié)線蟲(chóng)病、花葉病毒病，另一份抗花葉病毒病、根結(jié)線蟲(chóng)病、葉霉病，還有一份抗Ty1、葉霉病、根結(jié)線蟲(chóng)病。這40份種質(zhì)資源可以作為多抗育種材料進(jìn)行收集利用。

3 結(jié) 論

優(yōu)良基因的發(fā)現(xiàn)和利用對(duì)新品種的選育極其有利，通過(guò)遺傳多樣性分析育種材料的遺傳變異和遺傳背景是育種研究的基礎(chǔ)。農(nóng)藝性狀的調(diào)查測(cè)定相對(duì)簡(jiǎn)單，易操作，更直觀，是種質(zhì)資源研究最基本的方法和途徑，也是分類不可缺少的重要依據(jù)之一[19]。

4 討 論

4.1 各性狀的差異分析

表6 組群內(nèi)各個(gè)表型質(zhì)量性狀描述

表7 番茄不同類群性狀的平均值

通過(guò)對(duì)117份番茄種質(zhì)資源的數(shù)量性狀進(jìn)行變異分析，發(fā)現(xiàn)單果種子數(shù)、心室數(shù)、單果重的變異系數(shù)高，均達(dá)到45 %以上，表明這3個(gè)性狀的變異程度高，F(xiàn)值表明各種質(zhì)材料表型性狀的遺傳差異都達(dá)到極顯著水平，說(shuō)明供試種質(zhì)材料間存在極大的遺傳差異。對(duì)供試種質(zhì)材料的數(shù)量性狀和質(zhì)量性狀進(jìn)行遺傳多樣性分析，結(jié)果顯示葉片長(zhǎng)、葉片寬、首花序節(jié)位、果肉厚、果實(shí)橫徑、單花序果數(shù)和果柄長(zhǎng)度的遺傳多樣性指數(shù)均大于2.000，表明這些性狀的遺傳差異大，遺傳變異高。通過(guò)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)果實(shí)縱徑、果實(shí)橫徑、果梗洼大小、心室數(shù)、單果種子數(shù)這幾個(gè)性狀之間的相關(guān)性較高，心室數(shù)與各性狀呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)。

4.2 主成分分析和聚類分析的應(yīng)用

通過(guò)對(duì)遺傳差異達(dá)極顯著的15個(gè)數(shù)量性狀及變異類型豐富的3個(gè)質(zhì)量性狀進(jìn)行主成分分析，前8個(gè)的主成分累計(jì)貢獻(xiàn)率為80.8 %，最終選擇單花序果數(shù)、果型指數(shù)、單果重、心室數(shù)、可溶性固形物含量、單果種子數(shù)、成熟果色、生長(zhǎng)勢(shì)、葉片形狀、果柄長(zhǎng)度這幾個(gè)性狀作為主要因子。通過(guò)聚類分析在歐式距離為0.78時(shí)將供試種質(zhì)材料分為Ⅶ大類，第Ⅰ類材料多為橘色，果型好且果肉厚，可作為觀賞品種進(jìn)行培養(yǎng)；第Ⅱ類材料果實(shí)體積大，單果種子數(shù)少，紅色果，可作為加工類番茄育種材料；第Ⅲ類材料果型偏扁圓，硬度大，可溶性固形物含量高，果色多為紅色，可作為培養(yǎng)精品果的種質(zhì)材料；第Ⅳ類材料果肉厚，多為橘色果，較早熟，可在番茄品種改良育種中發(fā)揮作用。

4.3 抗病性分子標(biāo)記檢測(cè)

對(duì)供試材料進(jìn)行抗病性分子標(biāo)記檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)抗Ty-1、Ty-3的材料較少，共占總材料的5.12 %，在后期抗病育種中應(yīng)加強(qiáng)該類種質(zhì)材料的收集；抗葉霉病、抗根結(jié)線蟲(chóng)病的材料相對(duì)豐富，分別占總材料的88.03 %和76.07 %，可作為抗源材料在抗病育種中進(jìn)行利用。通過(guò)統(tǒng)計(jì)未發(fā)現(xiàn)4種病害均抗的材料，僅有3份材料可同時(shí)抗3種病害，在后期會(huì)利用分子平臺(tái)通過(guò)抗性基因?qū)氲确椒ㄅ嘤呖狗哑贩N。

圖1 番茄種質(zhì)資源聚類分析Fig.1 Cluster analysis of tomato germplasm

4.4 種質(zhì)資源遺傳多樣性分析方法

形態(tài)與分子2種標(biāo)記均可反映出番茄種質(zhì)資源品質(zhì)性狀的遺傳多樣性，但是不同的生態(tài)環(huán)境和種植模式對(duì)番茄的表型性狀有較大影響，長(zhǎng)期在同一生態(tài)環(huán)境下進(jìn)行種植，雖對(duì)其基因型無(wú)影響，但形態(tài)和生育期會(huì)發(fā)生一定程度的改變[6]，因此形態(tài)標(biāo)記與分子標(biāo)記相結(jié)合是研究作物遺傳多樣性的有效途徑。本研究選取的26個(gè)性狀中，有23個(gè)為表型性狀，易受環(huán)境、基因顯隱性及栽培措施等因素影響，在種質(zhì)遺傳多樣性分析上還具有一定的局限性，因此，在之后的研究中會(huì)結(jié)合SSR分子標(biāo)記及SNP分子標(biāo)記更近一步檢測(cè)各種質(zhì)資源材料的遺傳多樣性，以期為番茄地方品種改良提供有效依據(jù)，為番茄種質(zhì)資源研究和育種提供參考。

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