三種不同免疫檢測法對乙肝血清學標志物檢測的結果比較

顧挺 蘇娜

乙型肝炎病毒（HBV）感染后可演變為急慢性肝炎、肝硬化和肝癌等多種臨床形式，嚴重危害人類健康[1]。血清學標志物仍是臨床實驗室診斷乙肝病毒最主要的檢測指標之一，其中以HBsAg最為重要。本文通過比較酶聯免疫吸附法、化學發光免疫分析法、膠體金免疫層析法三種方法檢測乙肝五項血清學標志物的結果，以期為臨床選擇合適的檢測方法，提高乙肝病毒感染診斷準確性提供一定參考。

1 對象與方法

1.1 對象

標本來源于2016年1月—2017年12月我院肝病門診就診化驗乙肝的患者103例，其中男62例，女41例，年齡19～78歲，平均（46.1±7.3）歲。

1.2 方法

采集清晨患者空腹靜脈血5 ml，離心，分離血清，無溶血。每份血清分為均等的三份，分別采用酶聯免疫吸附法、化學發光免疫分析法、膠體金免疫層析法檢測乙肝五項血清標志物。嚴格按照試劑說明書標準和儀器規程操作。HBsAg＞0.2 ng/ml，HBsAb＞5 ng/ml，HBeAb＞0.2 PEIU/ml，HBeAg＞0.5 PEIU/ml，HBcAb＞0.9 PEIU/ml，判定結果為陽性。

1.3 統計學方法

應用SPSS 22.0軟件統計所有數據，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三種方法檢測乙肝五項血清標志物的結果比較

乙肝五項血清標志物陽性率高低依次為：化學發光免疫分析法、酶聯免疫吸附法、膠體金免疫層析法，見表1。

表1 三種方法檢測乙肝五項血清標志物的結果比較

2.2 三種方法檢測乙肝病毒標志物-HBsAg的靈敏度和特異性比較

經病理確診為乙肝患者52例。以病理學診斷為標準，化學發光免疫分析法檢測HBsAg的靈敏度為94.2%（49/52），特異性為92.2%（47/51）；酶聯免疫法檢測靈敏度為78.9%（41/52），特異性為86.3%（44/51）；膠體金免疫層析法檢測靈敏度為71.2%（37/52），特異性為80.4%（41/51）。化學發光免疫分析法檢測HBsAg的靈敏度高于酶聯免疫法，高于膠體金法，差異均有統計學意義（P＜0.05），三種方法檢測HBsAg特異性差異均無統計學意義（P＞0.05）。

3 討論

酶聯免疫法又稱為固相酶聯免疫測定法，是在放射免疫分析的基礎上發展起來的。通過化學反應連接檢測對象和酶，檢測對象和固相載體上的抗原經免疫反應結合，再加入底物，進行顯色。通過對比顏色的深淺，判斷抗體的水平[2]。酶聯免疫法主要對乙肝病毒進行定性或半定量檢測，目前在臨床應用非常廣泛，具有靈敏度高、特異性強、檢測費用低、無污染等優點。然而，該種檢測方法也存在操作步驟多而繁瑣，操作時間較長，影響因素多等缺陷[3]。

膠體金免疫層析法利用免疫層析法結合膠體金顯色的特點，達到診斷特異性待測物的目的[4]。該方法簡單快捷、能快速檢測出結果，且成本低廉，適合急診等緊急情況下的快速檢測。但只能做定性檢測，對低濃度標本的檢出存在缺陷，易造成弱陽性標本的漏讀和誤讀[5-6]。

化學發光免疫分析法結合了化學發光測定技術和免疫反應，同時具有兩種技術的優點，具有更加寬廣的線性范圍，主要對乙肝病毒進行定量檢測，在臨床實驗室檢測中應用極為廣泛[7-8]。但其成本較高。

結果顯示，乙肝五項血清標志物陽性率高低依次為：化學發光免疫分析法、酶聯免疫吸附法、膠體金免疫層析法。三種方法檢測HBsAg的靈敏度差異有統計學意義（P＜0.05），而三種方法檢測HBsAg特異性差異均無統計學意義（P＞0.05）。

由此可見，化學發光免疫分析法檢測乙肝表面抗原靈敏度和特異性均較高，但三種方法均有其各自的優缺點，根據臨床不同檢測目的選擇合適的檢測方法。

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