李威霖,趙吉臣,孫成波
(廣東海洋大學水產學院甲殼動物遺傳育種和繁殖實驗室,廣東 湛江 524088)
中國是世界上最大的對蝦生產國,對蝦產業是水產養殖的支柱性產業[1],凡納濱對蝦是最主要的養殖品種。近年來,隨著養殖密度的增大和養殖水質的惡化,凡納濱對蝦(Litopenaeus vannamei Boone)養殖中遇到很多問題[2-3],人們試圖從免疫、病害和水質環境等方面嘗試各種新的養殖模式,來提高養殖成活率。對蝦養殖中,中間培育是重要的一個環節,從蝦苗培育到一定大小,再投入大塘養殖,有利于提高對蝦養成率。鄒宏海[4]等通過合理使用淺表水、加蓋遮陽網、加強通風等技術措施,使虹鱒魚(Oncorhynchus mykiss)室內的養殖水溫終年控制在5~25℃,較好地解決了虹鱒魚在江蘇的度夏難題;梅肖樂[5]等通過加遮陽網將史氏鱘(Acipenser schrencki Brandt)室內養殖溫度終年控制在一定的范圍內,以有利于史氏鱘的生長。2015年7月正大集團卜蜂(北海)水產飼料有限公司推出全新養殖模式——夏季遮陽網養殖模式,并在廣東省湛江市東海島與當地正大養殖戶進行交流探討[6]。國內外關于凡納濱對蝦遮陽網模式的中間培育報道極少,其他水生生物的遮陽網覆蓋養殖的報道也較少。本實驗設置了遮陽網條件下對凡納濱對蝦幼苗進行中間培育,與露天組分析對比了兩種情況下的一些水質指標和生長指標,希望可以給予養殖戶一定的基礎技術指導。
實驗時間:2016年8月23日至2016年9月21日,共25 d。實驗地點:選取湛江海洋高新科技園的6個室外對蝦中間培育池塘為實驗池,池塘規格:寬 5 m、長 10 m、高 2.0 m,2-6#、2-7#、2-8#池塘正上方完全搭蓋遮陽網為實驗組,3-20#、3-21#、3-22#池塘露天為對照組。實驗對象:凡納濱對蝦幼苗,其平均體長0.587 cm,平均體質量0.0012 g,購買于海南中正水產科技有限公司。樣品采集:每個實驗池進水1.5 m和放150 000尾蝦苗,8月23日8:00開始取樣檢測各種指標,每隔5 d定時檢測三氮一磷、細菌總數、弧菌總數、浮游動物、浮游植物、體長和體質量指標;溫度每天檢測一次;實驗進行到第15天,24 h檢測溫度、pH、鹽度和溶解氧。實驗環境條件:實驗養殖用水均經過砂濾沉淀、強氯精消毒處理;除了搭蓋遮陽網和露天條件不同,其他實驗條件完全相同;實驗到了第15天開始定量換水,每個池塘每天定時定量換水20 cm(約池水總量10%)。
1.2.1 主要實驗試劑和用品 磺胺溶液(10 g/L)、鹽酸萘乙二胺溶液(1 g/L)、氯化鎘溶液(20%)、氯化鈉溶液(20%)、1∶1鹽酸溶液、400 g/L氫氧化鈉溶液、磷酸鹽標準貯備液(0.30 g/mL)、抗壞血酸溶液(0.1 g/mL)無氨蒸餾水、TBCS培養基、營養瓊脂培養基等等。
1.2.2 主要實驗儀器 分光光度計及配套比色皿、精密測量儀、離心機搖床、電爐、抽濾瓶和濾膜抽濾裝置、真空脫氣機、移液槍、60 mL廣口瓶、25具塞比色管、45 μm微孔濾膜、25 mL比色管燒杯、量筒、玻璃棒等等。
1.2.3 實驗方法 三氮一磷的檢測采用國家標準:海水化學要素調查[7],其中,硝酸氮的測定采用鋅-鎘還原法;亞硝酸氮的測定采用重氮-偶氮光度法;氨氮的測定采用次溴酸鈉氧化法;養殖水體中可溶性活性磷濃度測定采用鉬藍比色法。檢測水體中的弧菌采用TBCS平板分離培養基檢測法[8];檢測水體中細菌采用營養瓊脂培養基檢測法;采用血球計數法檢測水體中浮游動物的濃度[9];檢測水體中浮游植物的濃度變化趨勢采用葉綠素a含量測定法[10],并由Lorenzen公式[11]的修正式計算出葉綠素a含量;采用碘量法測量水體中的溶解氧濃度[12];對蝦的體長和體質量采用直接測量法。
以Excel對數據做平均值±標準差(Mean±SD)處理并作得折線趨勢圖和條形圖,用SPSS軟件對遮陽網組和露天組數據進行顯著性分析。
0~25 d,遮陽網組的氨氮濃度范圍為0.0127~2.346 mg/L,而露天組的氨氮濃度范圍為0.0124~2.495 mg/L,兩組實驗的氨氮濃度相差不大,沒有統計學意義差異(P>0.05),見圖1。實驗數據表明,兩組實驗的硝酸氮濃度和亞硝酸氮濃度沒有統計學意義差異(P>0.05)。遮陽網組的活性磷濃度明顯高于露天組的活性磷濃度,遮陽網的活性磷濃度最高值達到了 26.26 μmol/L,而露天組的為 17.97 μmol/L,兩組實驗的活性磷濃度有統計學意義差異(P<0.05),詳細見圖 2。

圖1 氨氮的濃度變化曲線

圖2 活性磷的濃度變化曲線
0~15 d露天組的弧菌濃度范圍為 550×103~9.7×103CFU/mL,遮陽網組弧菌濃度范圍為 97×103~9.3×103CFU/mL;15 d后遮陽網組的弧菌反而高于露天組的,到了20 d時達到了最高值為1.9×104CFU/mL,露天組弧菌濃度最高為5.8×103CFU/mL。兩組實驗的弧菌含量有統計學意義差異(P<0.05),詳細見圖3。0~10 d,露天組的細菌總菌含量高于遮陽網組的細菌總菌含量;10~25 d,遮陽網組的細菌總菌數量高于露天組的。兩組實驗的細菌總菌含量沒有統計學意義差異(P>0.05)。

圖3 24 h弧菌菌落的濃度變化曲線
整個實驗過程中,露天組的浮游植物密度都比遮陽網組的高,兩組實驗的浮游植物密度有極具統計學意義差異性(P<0.01),詳細見圖4。露天組的浮游動物密度略高于遮陽網組的浮游動物密度,兩者之間沒有統計學意義差異(P>0.05)。

圖4 葉綠素a的密度變化曲線
實驗中,露天組的凡納濱對蝦的體長都高于遮陽網組的對蝦體長;25 d后露天組凡納濱對蝦的平均體長為4.40 cm,遮陽網組的平均體長為4.10 cm;兩組實驗的體長沒有統計學意義差異(P>0.05);詳細見圖5。25 d后露天組的凡納濱對蝦平均體質量為0.58 g,遮陽網組的平均體質量為0.40 g,兩組實驗的凡納濱對蝦體質量極具有統計學意義差異(P<0.01),詳細見圖 6。

圖5 凡納濱對蝦體長的變化曲線

圖6 凡納濱對蝦體質量的變化曲線
露天組24 h的溫度處于32.4~34.5℃范圍,遮陽網組的溫度處于29.4~29.8℃范圍,遮陽網組24 h溫度變化0~0.4℃,露天組溫度變化0~2℃,露天組溫度比遮陽網組溫度高3.0~4.9℃,詳細見圖7。遮 陽 網 組 在 7:00—11:00、21:00—24:00 和00:00—7:00時間段的pH值大于露天組的。露天組與遮陽網組的鹽度相差不大,基本處于29.5。9:00—17:00時間段,露天組的溶解氧高于遮陽網組的,其他時間段,遮陽網組溶解氧濃度高于露天組,詳細見圖8。
楊章武[13]等曾研究過溫度對凡納濱對蝦幼體生長的影響,實驗結果表明溫度為29℃和35℃時對蝦生長緩慢,31~32℃對蝦生長較快。王吉橋[14]等開展了水溫和鹽度對凡納濱對蝦幼蝦能量收支的影響,表明水溫33℃時幼蝦日平均攝食率是最高的。實驗中,露天組的24 h的溫度接近33℃,而遮陽網組溫度長期處于29.5℃,所以露天組的水溫更合適凡納濱對蝦幼苗的生長。遮陽網對養殖水體中的鹽度影響不大,兩組實驗的鹽度24 h檢測中多數時間穩定在29.5左右。海洋生物的最佳pH值范圍為7.5~8.5之間[15],兩組池塘的pH值大部分時間都屬于這個范圍之內,對對蝦的生長沒有影響。因為白天陽光充足,遮陽網組光合作用明顯比遮陽網組的強,所以白天露天組的溶解氧高于遮陽網組。沒有了陽光,在充氧條件相同的情況下,露天組的對蝦因為長得快和浮游生物多,需要消耗的氧氣更多,所以同時期的遮陽網組的溶解氧高于露天組。

圖7 24 h溫度變化曲線

圖8 24 h溶解氧變化曲線
植物吸收氮磷進行生長發育過程中的各種代謝活動[16],由于遮陽網組的浮游植物含量比露天組低,三氮一磷無機物不能被更好吸收,所以遮陽網組的三氮含量略高于露天組,遮陽條件下的活性磷積累明顯較多。
浮游植物是第一生產者,光照是影響其生長的最重要因素[17]。露天組,陽光充足,氮磷更好地被浮游植物吸收,所以浮游植物生長旺盛,浮游植物密度高于遮陽網組。一些有益微藻能調節水體溶氧量(DO)和酸堿度(pH),吸收氨氮和亞硝氮等有害物質,有效地調控養殖環境[18]。浮游植物有利于調節水體中的有害物質,有利于對蝦生長,而搭蓋遮陽網抑制浮游植物的生長,浮游植物數量減少,反而增加了有害物質的積累。因為浮游動物多數作為第一消費者以浮游植物為食,所以露天組的浮游動物也偏高。養殖前期對蝦主要以浮游動物為食[19],而浮游動物通過攝食浮游植物大量繁殖可以為對蝦提供部分食物。所以遮陽網條件下,抑制了浮游植物和浮游動物的生長,不利于有害物質的降解循環,減少了對蝦的食物來源。
養殖對蝦的高密度和投餌使得水體中的有機物含量升高,導致了異養細菌大量繁殖[20-21]。實驗中主要檢測的是異養細菌,前期兩組池子中的細菌濃度一直升高,12 d后由于換水開始下降,然后再增長,兩組池子的細菌含量沒有統計學意義差異,遮陽網條件下對細菌的生長影響不明顯。海水中的弧菌主要以溶藻弧菌和副溶血弧菌為主,副溶血弧菌是主要的致病弧菌,所以副溶血弧菌含量高低影響著對蝦生長。實驗中選取TBCS培養基,用于分離副溶血弧菌和培養。副溶血弧菌主要與溫度、鹽度、pH值有關[22],前期由于露天組的溫度較高更適合弧菌的生長,所以露天組的弧菌含量高于遮陽網組;中后期每天定時定量換海水,遮陽網組的細菌和弧菌迎來一個生長期,新進的海水帶進部分有機物,遮陽網組的細菌、弧菌會迅速增長;而同期換定量海水的露天組,由于浮游植物含量高,生態系統中的有機物始終處于一個動態平衡狀態,少量的海水添換對露天組水泥池影響不大,所以細菌、弧菌濃度比遮陽網組低。遮陽網組的弧菌含量和露天組的弧菌含量有統計學意義差異,遮陽網條件下,前期可以抑制弧菌生長,但后期弧菌數量增長較快。
遮陽網池凡納濱對蝦成活率為61.4%;露天組池凡納濱對蝦成活率為68.5%,遮陽網養殖條件下對蝦成活率更低。實驗過程中,每次取樣都會檢查對蝦的健康和活力,水泥池中隨機取一瓢對蝦,用手攪動,露天組的逆流對蝦相對較多,表明露天組對蝦活力較好。整個實驗過程中,露天組的體長和體質量都大于遮陽網組的,所以露天條件下的凡納濱對蝦在中間培育過程中生長更快。
夏天室外水泥池對蝦中間培育中,搭蓋遮陽網可以降低養殖水溫3.0~4.9℃,溫度長期保持28.9~29.8℃;水中pH穩定,略高于露天條件下的pH;鹽度沒有較大變化。遮陽網條件下:亞硝酸氮、硝酸氮和氨氮含量偏高,活性磷濃度明顯升高;前12 d可以降低細菌和弧菌的含量,但后期細菌和弧菌積累更多,抑制了浮游生物的生長,對蝦生長相對緩慢,成活率偏低。
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