脾多肽注射液對慢性阻塞性肺病急性加重期患者細胞免疫功能及炎癥反應的影響

何海艷，馬航，呂學東

(南通市第一人民醫院，江蘇南通 226001)

慢性阻塞性肺病(COPD)是一種以氣流受限為特征的疾病，氣流受限多呈進行性發展，與氣道和肺組織對香煙煙霧等有害氣體或有害顆粒的異常慢性炎癥反應有關[1]。目前關于COPD的發病機制仍不確切，有研究表明細胞的免疫功能受損參與COPD的發生發展過程。機體免疫失衡可導致COPD患者反復發生感染，誘發急性加重，從而導致肺功能下降[2]。因此，提高COPD患者免疫功能，減少呼吸道感染發生率，將有助于減少COPD患者急性加重次數，延緩肺功能下降速度。我們對COPD急性加重期患者在常規治療的基礎上加用脾多肽注射液治療，探討其對COPD患者細胞免疫功能及呼出氣冷凝液(EBC)、血清中炎癥因子水平的影響。現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年1月～2016年7月在南通市第一人民醫院呼吸科就診的COPD急性加重期患者65例(COPD組)。COPD診斷標準符合中華醫學會呼吸病學分會關于COPD的診斷標準。COPD急性加重定義為短期內患者的呼吸道癥狀加重，超過了日常的波動范圍，需要更改藥物治療。所有病例在入院前2周均未使用過激素和免疫抑制劑，排除合并有惡性腫瘤、自身免疫性疾病、對研究藥物過敏及心、腦、腎嚴重原發性疾病者。按照隨機數字表法，將患者隨機分為對照組(33例)和觀察組(32例)。觀察組男19例、女13例，年齡(69.2±7.1)歲，病程(10.5±4.6)年，第1秒用力呼氣容積(FEV1)為(0.76±0.14)L，用力肺活量(FVC)為(1.35±0.36)L，動脈血氧分壓(PaO2)為(67.56±8.35)mmHg，動脈血二氧化碳分壓(PaCO2)為(58.95±7.26)mmHg。對照組男18例、女15例，年齡(68.5±7.4)歲，病程(8.2±3.6)年，FEV1為(0.79±0.17)L，FVC為(1.46±0.27)L，PaO2為(65.43±5.95)mmHg，PaCO2為(57.45±6.95)mmHg。兩組一般資料比較差異均無統計學意義。同時選取同期在我院行健康體檢的老年人30例為正常組。所有患者簽署知情同意書，本研究經南通市第一人民醫院倫理委員會同意。

1.2 治療方法 對照組予以持續低流量吸氧、抗感染、止咳化痰、解痙平喘等常規治療，觀察組在常規治療的基礎上加用脾多肽注射液輔助治療。將脾多肽注射液(吉林豐生制藥有限公司)4 mL加入0.9%生理鹽水250 mL中靜脈滴注，1次/d，共14 d。

1.3 臨床療效判定 臨床控制：咳、痰、喘等主要癥狀基本控制穩定，肺部干、濕啰音偶可聞及或消失，活動耐受力顯著改善，無復發，一般情況(包括飲食、睡眠等)明顯改善；顯效：病情相對穩定，肺部干、濕啰音明顯減少，活動耐受力較前改善，發作次數減少、程度減輕，一般情況好轉；有效：癥狀有所減輕，肺部體征無明顯改善；無效：臨床癥狀及體征均無明顯改善或加重，發作次數及程度無明顯改善。

1.4 肺功能及血氣分析檢測 采用美國Sensormedics公司生產的肺功能儀測定FEV1、FVC。于相同時間段呼吸空氣條件下抽取橈動脈血3 mL，用血氣分析儀測定PaO2、PaCO2。

1.5 細胞免疫功能檢測 所有患者于入院時及治療2周后抽取外周靜脈血3 mL，采用流式細胞儀(Facsc anto Ⅱ Mutitest，美國BD公司)測算T細胞亞群(CD3+、CD4+、CD8+)百分率。正常組亦抽取外周血3 mL檢測T細胞亞群。

1.6 炎癥反應情況觀察 EBC采用HAAK EK20 EcoScreen型EBC收集器(德國JAEGER公司生產)收集,收集所有患者入院時、治療2周時EBC及正常組EBC。首先安裝好收集管，將EBC收集器首先預冷20 min，同時受試者需漱口清潔口腔，帶鼻夾，口含咬口器平靜呼吸20 min。將收集的呼出氣冷凝物移入Ependoff管內，置于-70 ℃冰箱保存待測。抽取所有受試者空腹肘靜脈血5 mL，室溫靜置1 h后以2 000 r/min離心15 min，吸取血清于Ependoff管中，-70 ℃冰箱保存待測。采用酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清及EBC中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平，相關試劑盒購自上海船夫生物科技有限公司。

1.7 病情再次急性加重情況觀察 比較觀察組、對照組出院后6個月內病情再次急性加重例數。

2 結果

2.1 COPD組、正常組細胞免疫功能、TNF-α水平比較 見表1。

表1 COPD組、正常組細胞免疫功能、TNF-α水平比較

2.2 觀察組、對照組臨床療效比較 觀察組臨床控制11例、顯效13例、有效7例、無效1例，總有效率為96.9%，對照組分別為7、12、10、4例及87.9%，兩組總有效率比較P<0.05。

2.3 觀察組、對照組治療前后細胞免疫功能及血清和EBC中TNF-α水平比較 見表2。

表2 觀察組、對照組治療前后細胞免疫功能比較

注：與同組治療前比較，aP<0.05；與對照組治療后比較，bP<0.05。

2.4 觀察組、對照組病情再次急性加重情況比較 觀察組、對照組出院后6個月內病情再次急性加重例數分別為11、20例，兩組相比χ2=4.481，P<0.05。

3 討論

目前COPD已成為美國第四大死亡原因[3]。我國COPD的發病率也在逐年上升，在超過40歲的人群中，COPD發病率高達9.4%[4]。COPD的發病機制目前尚未完全闡明。氣道炎癥被認為是COPD重要的發病機制，近年來也有研究表明獲得性免疫反應在COPD的發病機制中起重要作用。免疫功能紊亂導致COPD急性加重及病情進展。和其他免疫介導的疾病類似，COPD患者中激活的效應淋巴細胞可導致直接的細胞毒效應，促進各種促炎介質的釋放，并激活下游的效應細胞，從而導致組織的損傷，如上皮細胞凋亡、纖維組織增生等[5]。在進展期COPD患者中亦發現上皮下淋巴組織聚集[6]，這些均表明免疫反應和COPD的發病機制密切相關。

近年來研究表明，T淋巴細胞亞群失衡在COPD發病機制中起重要作用。在COPD患者氣道黏膜及肺間質中發現CD8+T淋巴細胞浸潤[7]，COPD患者肺內表達IL-17的CD8+T淋巴細胞明顯增加[8]。此外還有研究表明，CD8+T淋巴細胞和COPD患者FEV1下降呈正相關[9]。Freeman等[10]研究認為，表達TLRS的CD8+T淋巴細胞比例和肺氣腫評分相關。我們對COPD患者外周血T淋巴結亞群研究發現，和正常組相比，COPD患者外周血中CD3+、CD4+T淋巴細胞亞群比例下降，CD8+T淋巴細胞比例上升，CD4+/CD8+下降。表明COPD患者存在細胞免疫功能下降，免疫功能受損。這和陳紅等[11]研究類似，他們認為COPD患者存在細胞免疫功能異常，這可能是COPD的發病機制之一。

COPD患者免疫功能下降將導致機體對病原微生物防御功能下降，易導致反復呼吸道感染，誘發急性加重，同時加劇呼吸道局部及全身炎癥反應。EBC收集為一種簡單、無創的、患者易接受的方法。對EBC中成分的分析可反映肺泡內襯液及氣道的生物化學特性，該方法已被用于評估氣道炎癥性疾病患者呼吸道局部炎癥狀態[12]。TNF-α為重要的前炎癥因子，主要由單核細胞和巨噬細胞釋放。它具有趨化作用，能促進炎癥因子在病變部位聚集，對炎癥反應起級聯放大作用。多項研究證實其在COPD發病機制中起重要作用。研究表明，大鼠過度表達TNF-α可引起類似COPD的肺部改變及肺氣腫的發生[13]，血清中高水平的TNF-α和COPD患者體質量減輕有關[14]。本研究發現，和正常組相比，COPD患者血清及EBC中TNF-α水平明顯升高。這表明COPD患者存在呼吸道局部及系統性炎癥反應。

脾多肽是由健康小牛脾臟提取物制成。它是一種雙向免疫調節藥物，能糾正機體免疫功能紊亂，增強機體非特異性免疫功能，促進T淋巴細胞成熟，并可使未致敏的淋巴細胞激活為致敏淋巴細胞，從而提高淋巴細胞免疫功能。目前，臨床上脾多肽主要用于提高惡性腫瘤患者的免疫力。武春濤等[15]研究表明，脾多肽可提高胰腺癌根治術后化療患者細胞免疫功能。蘇文忠[16]研究認為，脾多肽可提高晚期非小細胞肺癌患者化療時CD4+T淋巴細胞及CD4+/CD8+，改善患者免疫功能，提高生活質量。目前，對于脾多肽對COPD患者免疫功能及全身和呼吸道局部炎癥反應的影響研究較少。彭朝勝等[17]曾對脾多肽治療COPD急性加重期的臨床療效進行觀察，發現脾多肽可降低COPD急性加重期患者的全身炎癥反應，提高臨床療效。本研究表明，應用脾多肽聯合常規治療2周后，觀察組較對照組CD3+、CD4+T淋巴細胞及CD4+/CD8+升高，而CD8+T淋巴細胞下降。證明脾多肽可提高COPD患者細胞免疫功能，增強機體抵抗能力。同時，與對照組相比，觀察組血清及EBC中TNF-α水平均明顯降低，提示脾多肽尚可降低COPD患者全身及呼吸道局部的炎癥反應。臨床療效比較亦顯示，觀察組的臨床療效有效率高于對照組。COPD的急性加重是導致其肺功能下降及死亡的主要因素。本研究對COPD患者出院后6個月內急性加重情況進行比較，我們發現在對兩組患者都進行充分的背景治療(噻托溴銨、長效β受體激動劑、吸入糖皮質激素)基礎上，觀察組急性加重例數低于對照組，表明2周的脾多肽注射治療可減輕COPD患者急性加重次數，其免疫保護作用可持續6個月甚至更長時間。其原因可能與脾多肽提高了淋巴細胞免疫功能，增強了機體對感染的抵抗能力有關。

綜上所述，脾多肽注射液靜脈滴注可能通過調節患者細胞免疫功能減輕COPD患者全身及呼吸道局部炎癥反應，提高臨床療效，降低COPD患者未來急性加重風險，有望成為COPD重要的輔助治療方法。

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