參附注射液抗休克的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制研究進(jìn)展＊

熊艷玲，陳 雨，徐國良,2，嚴(yán)小軍,2，聶 鵬,2，姜 麗,2＊＊

（1.江西中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)基礎(chǔ)理論分化發(fā)展研究中心 南昌 330004；2.江西省中醫(yī)病因生物學(xué)重點(diǎn)實驗室 南昌 330004）

參附注射液源自《校注婦人良方·卷九》之參附湯，由紅參、附子的提取物制成的中藥復(fù)方制劑。藥理研究表明[1-3]，參附注射液具有強(qiáng)心、升壓、增強(qiáng)心肌收縮力、降低外周阻力、增加組織器官的血供、改善組織器官缺血狀態(tài)等功能，同時可改善血液流變性及微循環(huán)，臨床用于休克療效確切[4-6]。

為了更全面地理清參附注射液抗休克的有效成分并闡明其藥效機(jī)制，本文對參附注射液抗休克的物質(zhì)基礎(chǔ)及作用機(jī)制進(jìn)行了綜述，以期為參附注射液在心血管方面的臨床應(yīng)用提供參考。

1 物質(zhì)基礎(chǔ)

1.1 生物堿

附子生塊根含多種生物堿，如烏頭堿、次烏頭堿以及新烏頭堿等。目前從附子提取物中分離鑒定出來的生物堿已有90多個，根據(jù)生物堿所含酯基的不同，可分為雙酯類生物堿、單酯類生物堿、胺基醇類生物堿和脂型生物堿等[7,8]。雙酯類生物堿又分為烏頭堿、次烏頭堿和新烏頭堿等；單酯類生物堿可分為苯甲酰烏頭胺、苯甲酰次烏頭胺和苯甲酰新烏頭胺等；氨基醇類生物堿又分為烏頭胺、次烏頭胺和新烏頭胺等[9]。作為參附注射液的有效成分之一，生物堿能通過強(qiáng)心，增加心輸出量等機(jī)制有效地改善休克癥狀。

1.2 人參皂苷

Yang等[10]采用HPLC-QTOF-MS法鑒定出了參附注射液中的44個成分，并用HPLC-Q-MS對其中19個人參皂苷進(jìn)行了定量，為參附注射液質(zhì)量控制提供了依據(jù)。楊瑞杰[11,12]按照參附注射液的制備工藝，在紅參提取物中分離鑒定出12種常見皂苷和10種稀有皂苷。前者分別為人參皂苷 Rg1、Re、Rf、Rg、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd、F1、F3、F5；后者分別為人參皂苷Rk1、Rg5、Rk3、Rh4、Rg6、F4、Rg3、20(R)-Rg3、Rh1和20(R)-Rh1。紅參是人參經(jīng)蒸制后得到的藥材，但其所含的人參皂苷類成分含量與其他人參類藥材相比存在著顯著差異，紅參中主要含有Rg1、Ro、Rb1和Rc等4種人參皂苷[13]。此外，周琪樂等[14]通過大孔吸附樹脂、硅膠等柱色譜以及反相高效液相色譜等方法，進(jìn)行系統(tǒng)性分離、純化得到了52個三萜類皂苷成分，其中人參皂苷Ro-甲酯、人參皂苷Re2和人參皂苷Rg4都為首次從紅參中分離得到。有文獻(xiàn)表明[15]，人參皂苷能通過對離子通道的調(diào)節(jié)來控制心律失常，同時抑制心肌肥厚和心肌細(xì)胞的凋亡從而改善心肌缺血達(dá)到抗休克的目的。

1.3 氨基酸

參附注射液有效成分除人參皂苷和生物堿外，還含有氨基酸類。研究表明[16]，新開河紅參和高麗紅參均含17種以上的氨基酸，其中精氨酸含量最高，甲硫氨基酸最低。崔云秀等[17]研究發(fā)現(xiàn)，紅參中含有丙氨酸單糖苷，該物質(zhì)能抑制麥芽糖酶活性，使其水解能力下降，進(jìn)而減少了血中葡萄糖的含量。黃寶亮等[18]以紅參為實驗材料，經(jīng)過粉碎、超聲提取等一系列操作得到了一種非皂苷小分子類物質(zhì)—精氨酸雙糖苷(AFG)，其為鮮參在蒸制成紅參的過程中發(fā)生美拉德反應(yīng)生成，具有促進(jìn)微循環(huán)、改善休克癥狀等功效。

1.4 其他成分

此外，參附注射液中還含有少量的揮發(fā)油（如β-欖香烯和人參炔醇）、糖類物質(zhì)（如果糖、蔗糖、人參果膠等）、核酸、有機(jī)酸（如檸檬酸、延胡索酸等）、多肽、蛋白質(zhì)、酶類（如L-天冬氨酸轉(zhuǎn)移酶、腺苷轉(zhuǎn)化酶等）、維生素（如維生素B1、B2、B12和維生素C等）、無機(jī)元素、木質(zhì)類（如戈米辛N等）、甾醇及黃酮類等。張金秋等[19]利用RP-HPLC法從紅參中檢驗出了蘋果酸、丙二酸、乳酸、乙酸、檸檬酸和琥珀酸等6種物質(zhì)。王蘊(yùn)馨等[20]研究發(fā)現(xiàn)，人參中一般含有豐富的多肽，且各地區(qū)的人參多肽含量差異不明顯。張娜等[13]研究表明，參附注射液中含有4種糖（果糖、葡萄糖、蔗糖和麥芽糖），總量占參附注射液總固體量的60.23-85.53%，且含有鈉、鉀、鈣、鎂、鐵、鋁及鋅等無機(jī)金屬元素。上述物質(zhì)作為基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)，對休克可起到一定的輔助治療作用。

2 對休克的作用機(jī)制

2.1 改善血流動力學(xué)

臨床研究表明，人參皂苷能減慢心率，降低外周血管阻力，增加心肌收縮力和心輸出量。殷文朋等[21]研究發(fā)現(xiàn)，心源性休克大鼠在注射參附注射液后，通過增加CO，減少外周阻力，降低肺動脈嵌頓壓(PAWP)和心率(HR)來維持動脈壓“正常”水平，且不減少組織灌注，其機(jī)制可能與去甲烏藥堿是β-受體激動劑有關(guān)。樊文惠等[22]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)參附注射液具有正性肌力的作用，能調(diào)節(jié)血流動力學(xué)狀態(tài)，提高左心室射血分?jǐn)?shù)，改善心功能不全的臨床癥狀和體征；還能增加心肌收縮力和心輸出量，降低冠脈、腦和外周血管阻力，降低心肌耗氧量，減少缺血時乳酸的產(chǎn)生及磷酸激酶釋放，起到保護(hù)心臟功能的作用。

2.2 保護(hù)心肌細(xì)胞

參附注射液能顯著降低血漿脂質(zhì)過氧化物的含量，從而提高紅細(xì)胞膜超氧化物歧化酶的活性，對急性心肌梗死(AMI)患者的缺血心肌有保護(hù)作用。其作用機(jī)制除了參附的活血作用外，還可能與其抗脂質(zhì)過氧化及改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能有關(guān)[23]。董艷紅等[24]研究發(fā)現(xiàn)，人參皂苷Rg1與附子配伍后對大鼠的心肌細(xì)胞具有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與改善細(xì)胞膜的通透性，增強(qiáng)三磷酸腺苷(ATP)酶活性以及調(diào)節(jié)大鼠腦鈉肽(BNP)的分泌功能有關(guān)，從而對心源性休克起到一定治療作用。

2.3 改善微循環(huán)

微循環(huán)是指微動脈與微靜脈之間的微細(xì)循環(huán)，分布于全身各臟器和組織，在調(diào)節(jié)局部的血液供應(yīng)方面發(fā)揮著重要作用[25]。休克的中心環(huán)節(jié)為微循環(huán)障礙，而參附注射液可以改善休克患者的微循環(huán)狀態(tài)從而達(dá)到治療作用[4-6,26]。有研究表明，10 mL·kg-1以上劑量的參附注射液可使早期心源性休克大鼠微血管管徑變寬，白細(xì)胞黏附數(shù)減少；可使中期心源性休克大鼠紅細(xì)胞流速加快、白細(xì)胞黏附數(shù)減少，從而改善微循環(huán)的缺血、缺氧現(xiàn)象[27]。楊芳炬等[28]研究發(fā)現(xiàn)，參附注射液不僅可擴(kuò)大正常動物微動脈管徑，增加毛細(xì)血管交叉網(wǎng)點(diǎn)數(shù)，加快血流速度，且能改善休克動物微血管病理狀態(tài)，并通過強(qiáng)心作用使有效血液循環(huán)增加，從而改善休克癥狀。

2.4 改善血液流變學(xué)

參附注射液還可通過降低血液黏稠度和紅細(xì)胞聚集率來改善血液流變性，包括血管的流變性、血液的流動性、粘滯性、變形性及凝固性。沙恩麗等[29]研究發(fā)現(xiàn)，給心肌缺血血瘀證大鼠給予高劑量參附藥后，大鼠全血黏度高切、中切、低切值均有降低趨勢，血細(xì)胞參數(shù)MCV和PDW降低明顯，血沉也顯著升高。因此，參附配伍可通過降低全血粘度、血細(xì)胞參數(shù)的值、減少血沉?xí)r間來改善模型動物血液“濃、粘、聚、凝”狀態(tài)。丁宇棟等[30]通過臨床研究發(fā)現(xiàn)，將參附注射液應(yīng)用于休克患者，其療效與西藥多巴胺相同。但在血液流變學(xué)方面，參附組血液流變學(xué)指標(biāo)改善明顯，且優(yōu)于多巴胺組。劉智等[31]研究發(fā)現(xiàn)，參附藥對降低血液高切、中切、低切的血液黏度有明顯效果，并能顯著降低血沉和血細(xì)胞參數(shù)?？邓貗沟萚32]通過給予86例血瘀型心衰患者給予基礎(chǔ)藥物和參附注射液聯(lián)用治療后，患者低切變率血黏度、血漿黏度及血小板黏附率較對照組和治療前降低，治療效果明顯。因此，參附注射液可通過改善血液流變學(xué)達(dá)到改善休克癥狀的目的。

2.5 抑制炎癥反應(yīng)

炎癥細(xì)胞因子級聯(lián)反應(yīng)對于休克的發(fā)生、發(fā)展具有重要作用。比如持續(xù)表達(dá)的腫瘤壞死因子（TNF-α）能抑制肌漿網(wǎng)Ca2+泵，使細(xì)胞內(nèi)Ca2+失調(diào)。多種細(xì)胞因子介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)還可能與急性心肌梗塞并發(fā)心源性休克有關(guān)。柯大智等[33]用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RTPCR)研究心源性休克犬的炎癥因子參數(shù)，發(fā)現(xiàn)血漿中TNF-α、IL-1βmRNA表達(dá)均異常升高，在給予參附注射液后，血漿TNF-α、IL-1β含量顯著下降。張昆等[34]將參附注射液用于治療失血性休克，結(jié)果表明，通過降低IL-1β和TNF-α，增加IL-10，進(jìn)而阻斷了SIRS(全身炎癥反應(yīng)綜合癥Systemic Inflammatory Reaction Syndrome)的發(fā)生，從而達(dá)到抗休克的目的。張茜等[35]通過對豬的心肺復(fù)蘇模型給予參附注射液和腎上腺素進(jìn)行治療，發(fā)現(xiàn)參附組中IL-6、IL-8和TNF-α的值與腎上腺素組相比顯著下降。付蓉[36]等研究發(fā)現(xiàn)，參附注射液還能降低慢性心力衰竭大鼠血漿TNF-α和IL-6的含量，其機(jī)制可能通過平衡免疫系統(tǒng)的失衡狀態(tài)，增強(qiáng)心肌的收縮力，改善血流動力學(xué)的紊亂狀態(tài)，并逆轉(zhuǎn)心室重塑，從而改善心臟功能。由此可見，參附注射液能通過降低炎癥因子的表達(dá)從而達(dá)到抗休克作用。

2.6 抗心律失常作用

心源性休克的癥狀常伴隨有心律失常。趙立志等[37]研究驗證了參附注射液加常規(guī)藥物治療慢性心力衰竭的有效性，特別針對合并緩慢性心律失常的患者。參附注射液可抑制左心室重構(gòu)，改善心臟功能和房室傳導(dǎo)，延緩慢性心力衰竭進(jìn)程，其機(jī)制可能與降低N-末端腦鈉肽前體水平有關(guān)。另有研究[15]證實，參附注射液中的人參皂苷Rh可限制大鼠心肌細(xì)胞L、T型鈣通道的活動，減少其開放概率與開放時間。由此可見，人參皂苷可通過控制離子通道的開合來有效地調(diào)節(jié)心率，從而對心律失常等癥狀進(jìn)行控制。

3 展望

參附注射液作用廣泛，可通過調(diào)節(jié)血壓、調(diào)節(jié)心律、保護(hù)心肌細(xì)胞、改善微循環(huán)及血液流變學(xué)、降低炎癥因子的表達(dá)等方面達(dá)到抗休克效果，臨床上應(yīng)用于心血管疾病方面的治療已近三十年，療效顯著，且安全性較好[38]。

參附注射液主要由紅參和附子兩味藥組成，但其有效成分極其復(fù)雜，還受添加劑與環(huán)境變化的影響，因此明確其有效成分及含量從而有效控制其質(zhì)量至關(guān)重要。

資料檢索表明，目前的研究多關(guān)注參附注射液臨床療效，尚缺乏對參附注射液全方在分子水平的機(jī)制研究。因此，亟待對其藥理作用機(jī)制進(jìn)行深入研究，以探尋其各種作用靶點(diǎn)與作用途徑。明確其作用機(jī)制將有助于其臨床更加合理、有效地應(yīng)用，進(jìn)而發(fā)揮中成藥制劑的獨(dú)特優(yōu)勢。

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