人工胃液中藥用炭片對尿毒清顆粒的吸附作用研究

崔 彥 ，王偉英 ，馬玉蓉 ，葉利明

(1.重慶市第五人民醫院藥劑科，重慶 400061； 2.四川大學華西藥學院，四川 成都 610041)

經腸道吸附毒素是慢性腎功能不全患者非透析治療階段的常用方法。藥用炭片用于治療慢性腎臟疾病已有20年，具有不溶于水、不為消化液或細菌所分解的特點，可從腸道吸附尿素、肌酐等尿毒癥毒素，并從腸道排出，使患者的血尿素氮、血清肌酐水平下降，以延緩腎功能的進行性惡化[1-5]。腎功能不全患者常需要合并使用很多藥物，有些藥物可被藥用炭片吸附[6-7]，但目前未見藥用炭片吸附相關藥物及吸附率的研究報道。本研究中采用體外吸附的方法[8-11]，利用藥物溶出度儀模擬人體內環境進行藥用炭片對尿毒清顆粒在人工胃液中的體外吸附試驗，以探討體外吸附的程度，指導臨床合理用藥，減少藥物資源浪費。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

1100型高效液相色譜儀(Agilent Technologies Inc.，USA)；紫外可見光檢測器（ultraviolet-visible detector）；RCZ-8B型溶出實驗儀（天津天大天發科技有限公司）。

1.2 試藥

芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號為MUST-17031901）；藥用炭片（河北長天藥業有限公司，批號為48161120，規格為每片3 g）；尿毒清顆粒（康臣藥業＜內蒙古＞有限責任公司，批號為20161264，規格為每袋5 g）；流動相配制用溶劑均為色譜純，其他溶劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 芍藥苷含量測定

2.1.1 色譜條件[12-15]與系統適用性試驗

色譜柱：Kromasil(Akzo Nobel Inc.，Sweden)C18柱(250 mm × 4.6 mm，5 μm)；流動相：乙腈 -0.05 mol／L磷酸二氫鉀溶液(15∶85)；檢測波長：230 nm；柱溫：35℃。理論板數按芍藥苷峰計算不低于3 000。在此色譜條件下，芍藥苷峰與其他相鄰色譜峰可達到有效分離，分離度大于1.5。色譜圖見圖1。

2.1.2 溶液制備

取80℃干燥至恒重的芍藥苷對照品9.52 mg，精密稱定，置50 mL容量瓶中，加水使溶解并稀釋至刻度，精密量取5 mL，置25 mL容量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得對照品溶液(每1 mL含芍藥苷0.038 mg)。

取稀鹽酸（取鹽酸234 mL，加水稀釋至1 000 mL，即得）16.4 mL，加水約800 mL與胃蛋白酶 10 g，搖勻，加水稀釋成1 000 mL，即得人工胃液。

采用藥物溶出度儀模擬人體內環境，參照2015年版《中國藥典（四部）》通則0900特性檢測法項下溶出度與釋放度測定法中第三法（小杯法）[16]測定，溶出介質200 mL（人工胃液），恒溫控制在(37.0 ± 0.5)℃，轉速100 r／min，將6片藥用炭片和1袋尿毒清顆粒同時投入同一溶出杯（規格為250 mL）中，同時將尿毒清顆粒單獨投入盛有相同體積人工胃液的另一溶出杯中，分別在 0.5，1.0，2.0 h 取一定量溶出液用微孔濾膜過濾，棄去初濾液，取續濾液（自取樣至濾過在30 s內完成，所量取溶出介質的體積之和如超過總體積的1%時，補充等體積等溫度的溶出介質），即得供試品溶液。

取按處方除白芍外的其他藥材和輔料制作的制劑，按供試品溶液制備方法處理，即得陰性對照品溶液。

2.1.3 方法學考察

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專屬性試驗：分別吸取一定體積的對照品溶液、供試品溶液、陰性對照品溶液進樣測定。結果表明，陰性對照品溶液中其他成分對樣品的測定無干擾。色譜圖見圖1。

圖1 高效液相色譜圖

線性關系考察：將2.1.2項下制得的芍藥苷對照品母液，依次稀釋 2，4，6，8，10 倍，分別進樣，記錄峰面積。以芍藥苷質量濃度為橫坐標、以峰面積為縱坐標繪制標準曲線，得標準曲線回歸方程 Y=1 460 X-2.114，R2=0.997(n=6)。結果表明，芍藥苷質量濃度在 19.04 ～190.4 μg／mL范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗：精密吸取同一對照品溶液 20 μL，按擬訂色譜條件連續進樣6次，記錄峰面積。結果的 RSD為1.42%（n=6），表明儀器精密度良好。

重復性試驗：按2.1.2項下供試品溶液，將尿毒清顆粒單獨投入盛有人工胃液的溶出杯中，平行操作6次，精密吸取每個溶出杯中的供試品溶液，依法前處理后，按擬訂色譜條件進樣20 μL，分別記錄峰面積。結果的RSD為2.68%（n=6），表明方法重復性良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，于室溫下自然放置，分別于 0，1，2，4，8，12，24 h 時精密吸取 20 μL，按擬訂色譜條件進樣測定。結果的 RSD為2.54%（n=6），表明供試品溶液室溫條件下放置24 h內穩定性良好。

加樣回收試驗：精密量取2.1.2項下供試品溶液共6份，分成3組，每組按高、中、低質量濃度分別精密加入對照品貯備液，定量稀釋至刻度，進樣測定，計算加樣回收率。結果見表1。

表1 芍藥苷加樣回收試驗結果(n=9)

2.2 吸附率測定

分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20 μL，注入液相色譜儀，按擬訂色譜條件于 0.5，1.0，2.0 h 時測定每個溶出杯中芍藥苷的峰面積，計算吸附率。結果見表2。吸附率（%）=（1-吸附后溶液藥物峰面積／未吸附溶液藥物峰面積）×100%。

表2 人工胃液中藥用炭片對尿毒清顆粒芍藥苷的吸附率(n=5)

3 討論

藥用炭片具有發達的孔隙結構和巨大的比表面積，臨床用于治療慢性腎臟疾病，可從腸道吸附尿素、肌酐等有毒物質，并從腸道排出體外，可降低患者的血尿素氮、血清肌酐水平，可代替腎臟的解毒功能，保護健存的腎單位，并延長透析間期，減少透析次數。

腎功能不全患者常常需要合并使用多種藥物，尿毒清顆粒是常見的合并用藥。本研究中利用藥物溶出度儀模擬人體內環境，用人工胃液作介質以模擬胃部環境，考察藥用炭片對尿毒清顆粒的吸附作用，結果顯示，將藥用炭片和尿毒清顆粒投入同一溶出杯中后，隨著時間的推移，藥用炭片對尿毒清顆粒中有效成分芍藥苷的吸附率逐漸增高，2.0 h后吸附率已達92.62%。由于人體胃排空的速度為0.5～2.0 h，為了減少藥用炭片對尿毒清顆粒的吸附，建議二者至少間隔2.0 h以上服用。

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