近期國外重要學術期刊發表的蠶桑學相關論文簡介

1.Chen F1，Zhu L1，Zhang Y1，Kumar D1，Cao G1，2，Hu X1，2，Liang Z1，Kuang S1，Xue R1，2，Gong C1，2.(1.School of Biology&Basic Medical Science，Soochow University，Suzhou，215123，China;2.National Engineering Laboratory for Modern Silk，Soochow University，Suzhou，215123，China).Clathrin-mediated endocytosis is a candidate entry sorting mechanism for Bombyx mori cypovirus.Scientific reports.2018，8(1):7268.

題目：網格蛋白介導的內吞作用是家蠶質型多角體病毒選擇入侵的機制之一

摘要：家蠶質型多角體病毒（BmCPV）是呼腸孤病毒科成員，能夠特異性感染家蠶并對蠶業生產造成巨大經濟損失。迄今為止，BmCPV進入細胞的機制尚不清楚。本研究采用電子顯微技術，探究了BmCPV進入細胞的途徑，結果顯示BmCPV入侵BmN細胞是由內吞作用介導的。用阻礙內吞途徑的4種抑制劑（丹酰尸胺、氯丙嗪、黃酮和PP2）處理，能夠顯著降低BmCPV的感染力，表明BmCPV進入BmN細胞依賴于內吞作用，并且網格蛋白介導的分類選擇是主要的入侵方式。通過RNA干擾來抑制涉及網格蛋白介導內吞作用的網格蛋白重鏈（clathrin，GenBank登錄號：NM_001142971.1）和銜接蛋白復 合 物 -1γ亞 基（AP-1，GenBank登 錄 號 ：JQ824201.1）的表達水平，或利用相應抗體來阻斷clathrin和AP-1的功能，則會造成BmCPV的感染力顯著下降，顯示BmCPV是通過網格蛋白介導的內吞作用而進入細胞的。本研究結果表明，網格蛋白介導的內吞途徑，可以作為家蠶質型多角體病毒病的治療靶點。

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2.Yu Z，Jiang H，Guo R，Yang B，You G，Zhao M，Liu X.(College of Light Industry and Food Engineering，Guangxi University，Nanning 530004，China)Taste，umami-enhance effect and amino acid sequence of peptides separated from silkworm pupa hydrolysate.Food research international.2018，108:144-150.

題目：蠶蛹水解肽的氨基酸序列及其口味、鮮味增強作用

摘要：本試驗通過超濾、凝膠過濾層析，從蠶蛹水解產物中分離純化了四種鮮味肽，并采用超性能液相色譜串聯質譜法（UPLC-MS/MS），鑒定出這四種鮮味肽分別是纈氨酸-脯氨酸-酪氨酸（VPY）、蘇氨酸-丙氨酸-酪氨酸（TAY）、丙氨酸-丙氨酸-脯氨酸-酪氨酸（AAPY）和甘氨酸-苯丙氨酸-脯氨酸（GFP）。研究結果還顯示，鮮味肽并非是由鮮味氨基酸組成的，其中還含有苦味氨基酸；VPY、TAY、AAPY和GFP的鮮味閾值分別為1.65 mmol/L、1.76 mmol/L、2.97 mmol/L和6.26 mmol/L；TAY、VPY 和AAPY對于谷氨酸鈉（MSG）+食鹽（NaCl）溶液具有鮮味增強效果，其有效濃度分別為2.5 g/L、5 g/L和5 g/L，但GFP對谷氨酸鈉（MSG）+食鹽（NaCl）并沒有明顯的鮮味增強效果。此外，這些肽的口味比組成它們的氨基酸要好，表明肽的味道不依賴于其氨基酸組成。

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3.Chen H1，2，Liu Y2，Wang W3，Olatunji O4，Pan G5，Ouyang Z2.(1.School of Food and Biological Engineering，Jiangsu University，Zhenjiang，China;2.School of Pharmacy，Jiangsu University，Zhenjiang，China;3.Institute of Life Sciences，Jiangsu University，Zhenjiang，China;4.Faculty of Thai Traditional Medicine，Prince of Songkla University，Hat Yai，Thailand;5.Sericultural Research Institute，Chinese Academy of Agricultural Sciences，Zhenjiang，China).Proteomic-Based Approach to the Proteins Involved in 1-Deoxynojirimycin Accumulation in Silkworm Bombyx mori(Lepidoptera:Bombycidae).Journal of insect science.2018，18(2):42.

題目：基于蛋白質組學方法的家蠶（鱗翅目：蠶蛾科）中與1-脫氧野尻霉素積累相關的蛋白研究

摘要：1-脫氧野尻霉素（DNJ）是桑葉中含量最為豐富的多聚烴基生物堿，它能保護桑葉免受昆蟲的取食。然而，家蠶能夠在DNJ的毒害作用下生存，并將食下的桑葉DNJ積累在體內。為了確定DNJ在蠶體內積累的分子機制，本試驗通過比較蛋白質組學分析，評估了家蠶3齡蠶（是家蠶生命周期中DNJ含量最高的階段）和剛孵化蟻蠶（蠶體中不含有DNJ）這兩組蠶體內的蛋白表達情況。結果發現，在3齡蠶體中一些差異表達蛋白參與了物質代謝、能量代謝、氧化還原、解毒、免疫和轉運調節等途徑，并可能與DNJ的積累有關。此外，用熒光定量PCR法測定了熱激蛋白（Hsp70）、谷胱甘肽轉移酶（GST）、絲氨酸蛋白酶前體（Ser）、血淋巴蛋白（30K）和過氧化物酶（TPx）這5種差異表達蛋白編碼基因的表達水平，并采用HPLC法檢測了DNJ的積累，關聯分析發現Hsp70和Ser的表達水平與DNJ的積累具有較弱的負相關性，而30K、GST和TPx編碼基因與DNJ的積累有正相關性。以上研究結果表明，30K、GST和TPx這3種蛋白在蠶體富集DNJ這一生理過程可能發揮了重要作用。

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4.Lee KS，Kim BY，Choo YM，Jin BR.(Department of Applied Biology，College of Natural Resources and Life Science，Dong-A University，Busan，604-714，Republic of Korea).Dual role of the serine protease homolog BmSPH-1 in the development and immunity of the silkworm Bombyx mori.Developmental and comparative immunology.2018，85:170-176.

題目：絲氨酸蛋白酶同源物BmSPH-1在家蠶發育和免疫中的雙重功能

摘要：絲氨酸蛋白酶和絲氨酸蛋白酶同源物參與引發黑化的酚氧化酶原（proPO）激活系統，家蠶絲氨酸蛋白酶同源物BmSPH-1調控結節黑化作用。本研究發現，BmSPH-1在家蠶發育和免疫中具有雙重功能。在蠶正常發育過程中，BmSPH-1在蛻皮及幼蟲-蛹轉化過程的血細胞中表達。而當蠶發生感染后，BmSPH-1在血細胞中表達并在血淋巴中裂解，從而誘導酚氧化酶（PO）活性。此外，BmSPH-1在幼蟲-蛹轉化階段和蛹早期的表皮中被裂解。用BmSPH-1 RNAi處理蠶，造成BmSPH-1 mRNA水平在吐絲階段或前蛹期降低，將分別導致化蛹停滯或蛹表皮黑化。結合試驗分析發現，BmSPH-1與家蠶的免疫聚集素、proPO和proPO激活酶相互作用。本研究結果表明，BmSPH-1參與家蠶的幼蟲-蛹轉化、蛹表皮黑化和先天免疫，在家蠶發育和免疫中發揮著雙重功能。

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5.Shen Y，Feng M，Wu X.(College of Animal Sciences，Zhejiang University，Hangzhou 310058，PR China).Bombyx mori nucleopolyhedrovirus ORF40 is essential for budded virus production and occlusionderived virus envelopment.The Journal of general virology.2018，doi:10.1099/jgv.0.001066.

題目：家蠶核型多角體病毒ORF40對于出芽型病毒粒子產生和包涵體衍生型病毒包膜是必需的

摘要：家蠶核型多角體病毒（BmNPV）ORF40（bm40）是編碼苜蓿銀紋夜蛾核型多角體病毒（Ac-MNPV）AC51的同源物，在已測序的α桿狀病毒中是一個高度保守的基因。為探究bm40在桿狀病毒感染周期中的功能，本研究在大腸桿菌中通過同源重組的方法構建了BmNPV bm40敲除型質粒。免疫印跡分析顯示，bm40是一個病毒感染過程中的晚期基因。與野生型和修復型病毒相比，bm40敲除型病毒表現出單細胞感染表型。滴度實驗確認，bm40敲除后不能產生有感染力的出芽型病毒粒子（BV），但對于病毒DNA的復制沒有影響。電子顯微成像分析發現，Bm40在核衣殼從核內轉運至細胞質、核衣殼包膜形成包涵體衍生型病毒（ODVs）以及ODVs隨后組裝入多角體的過程均必不可少。共聚焦顯微成像顯示，Bm40在感染后48 h主要定位在細胞核內，隨后在感染晚期聚集在核膜和多角體上。綜合以上結果表明，Bm40在BmNPV感染循環中對于BV產生和ODV包膜至關重要。

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6.Mao F1，2，Lei J1，2，Enoch O1，2，Wei M1，2，Zhao C1，2，Quan Y1，2，Yu W1，2.(1.Institute of Biochemistry，College of Life Sciences，Zhejiang Sci-Tech University，Hangzhou 310018，Zhejiang Province，PR China;2.Zhejiang Provincial Key Laboratory of Silkworm Bioreactor and Biomedicine，Hangzhou 310018，Zhejiang Province，PR China).Quantitative proteomics of Bombyx mori after BmNPV challenge.Journal of proteomics.2018，181:142-151.

題目：家蠶在感染BmNPV后的定量蛋白質組學分析

摘要：家蠶是一種理想的經濟昆蟲模型，在蠶絲業和生物反應器開發中發揮著關鍵作用。家蠶核型多角體病毒（BmNPV）不僅是家蠶的致病性病原，也是表達重組蛋白的有效載體。盡管BmNPV感染家蠶和BmN細胞膜脂筏的蛋白質組已有研究，但BmN細胞抵御BmNPV感染的蛋白質組學特征仍未知。為了探究家蠶與BmNPV的相互作用關系，本研究通過定量質譜法分析了BmNPV感染BmN細胞后的若干個關鍵過程，共鑒定到4205種蛋白，其中4194種蛋白達到定量水平。具體來講，在BmNPV感染過程中，一些轉錄因子和表觀修飾蛋白顯示出明顯不同的豐度水平。特別是結合活性蛋白在分子功能上表現出顯著的變化。阻斷BmNPV連接的非同源末端，則表現出DNA的不可逆斷裂。然而，用高豐度的超氧化物歧化酶試驗揭示，細胞防御系統在維持生化平衡中發揮了持續性作用。本研究的比較和定量蛋白質組學結果，將有助于揭示家蠶感染BmNPV的動力學，同時也為解明BmN細胞與BmNPV的相互作用機制提供了新的思路。

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7.Hikida H1，Kokusho R1，Kobayashi J2，Shimada T1，Katsuma S1.(1.Department of Agricultural and Environmental Biology，Graduate School of Agricultural and Life Sciences，The University of Tokyo，1-1-1 Yayoi，Bunkyo-ku，Tokyo 113-8657，Japan;2.Department of Biological and Environmental Sciences，Graduate School of Sciences and Technology forInnovation，YamaguchiUniversity，Yamaguchi 753-8515，Japan).Inhibitory role of the Bm8 protein in the propagation of Bombyx mori nucleopolyhedrovirus.Virus research.2018，249:124-131.

題目：Bm8蛋白在家蠶核型多角體病毒增殖中的抑制作用

摘要：鱗翅目昆蟲核型多角體病毒在宿主幼蟲體中具有不同的病毒組織趨向性。在先前的研究中，作者鑒定到了家蠶核型多角體病毒（BmNPV）Bm8基因的編碼產物能夠抑制病毒在中部絲腺（MSG）的增殖。然而Bm8蛋白的抑制功能是否存在MSG特異性尚未知。本研究構建了表達綠色熒光蛋白（GFP）的Bm8-缺失型重組BmNPV，并檢測了病毒在家蠶培養細胞和幼蟲體內的增殖。發現與野生型病毒相比，Bm8-缺失型BmNPV在培養細胞和幼蟲體內均產生較少的出芽型病毒和較多的包涵體（OBs）。顯微鏡觀察到OB產生和GFP表達，顯示Bm8缺失加劇了病毒在各個幼蟲組織中的感染。此外，qRT-PCR實驗發現，Bm8缺失使得病毒基因在BmNPV感染的幼蟲組織中表達上調。以上研究結果表明，Bm8蛋白對于病毒增殖的抑制作用在不同幼蟲組織中存在差異，這可能與BmNPV在家蠶幼蟲中的組織趨向性有關。

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8.Yong Cui1，Yanan Zhu1，Yongjian Lin1，Lei Chen2，Qili Feng1，Wen Wang2，Hui Xiang1.(1.Guangzhou Key Laboratory of Insect Development Regulation and Application Research，Institute of Insect Science and Technology，School of Life Sciences，South China NormalUniversity，Guangzhou，510631，China;2.Center for Ecological and Environmental Sciences，Northwestern Polytechnical University，Xi'an，710129，China).New insight into the mechanism underlying the silk gland biological process by knocking out fibroin heavy chain in the silkworm.BMC genomics.2018，19(1):215.

題目：絲素重鏈敲除為家蠶絲腺生物過程內在機制提供了新認識

摘要：本研究利用CRISPR/Cas9系統，成功地對家蠶Bmfib-H進行了基因組編輯，發現Bmfib-H敲除突變體具有裸蛹、薄繭等表型。與野生型相比，Bmfib-H敲除突變體的后部絲腺在絲腺細胞程序性死亡前被明顯降解成碎片。通過5齡第4天蠶絲腺的比較轉錄組分析，在后部絲腺與中部絲腺間鑒定到1456個差異表達基因，在Bmfib-H敲除突變體與野生型間鑒定到1388個差異表達基因。差異表達基因的分層聚類分析表明，差異表達基因在Bmfib-H敲除突變體的絲腺中顯著下調，有一個基因簇在Bmfib-H敲除突變體的絲腺中上調。下調基因主要富集于與癌癥、DNA復制和細胞增殖等有關的通路中，而有趣的是上調基因顯著富集于蛋白酶體通路中。進一步比較正常型和Bmfib-H敲除突變體的中部絲腺和后部絲腺轉錄組，發現Bmfib-H敲除突變體的后部絲腺中表達上調的差異基因富集于蛋白降解和蛋白酶體通路中，同時有一系列與細胞自噬有關的基因表達上調。正常情況下這些蛋白的降解過程將在產絲完成后進行，所以本研究結果暗示Bmfib-H敲除突變體中這些通路被提前激活了。絲素重鏈蛋白的異常積累可能會導致蛋白酶體通路和細胞自噬通路的激活，以促進絲腺細胞中異常絲素蛋白的快速降解。本研究提出了一個由絲蛋白突變導致的蛋白及部分細胞降解的后續過程，這將有助于理解絲蛋白突變對絲腺生物過程的影響，并為進一步探明蠶體中氮素的再分配機制提供理論依據。

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