KiSS1蛋白和MMP-2在宮頸癌組織中的表達及診斷價值

李 穎,王 瑚

(錦州市中心醫院 婦產科,遼寧 錦州121000)

宮頸癌(ICC)是女性常見的生殖道惡性腫瘤，隨著人們生活方式的改變及人口的高齡化，發病率明顯上升，且日趨年輕化。早期ICC無明顯癥狀，術后易復發和轉移，早期診斷能夠明顯提高治愈率[1]，降低死亡率。臨床亟待尋找敏感性高、特異性強的檢測方法，以早期診斷，提高治愈率，提高患者的生活質量。本文檢測宮頸組織(NCE)、宮頸上皮內瘤變(CIN)及ICC組織中的KiSS1和MMP-2的表達，以便指導臨床診療。

1 材料與方法

1.1標本選取2016年3月-6月我院治療存檔的宮頸組織蠟塊78例，宮頸癌38例，平均年齡(45.61±4.27)歲，根據2003年FIGO標準，Ia期14例，Ib期12例，Ⅱ期12例；22例深層浸潤，16例淺層浸潤；淋巴轉移8例，無淋巴轉移30例；29例分化為中、低級，9例分化為高級。同期22例行切除術CIN患者，平均年齡(44.73±4.55)歲。同期行子宮肌瘤切除術的NCE患者18例，平均年齡(45.39±4.53)歲。

1.2免疫組化試劑[2]南京德泰生物科技公司生產的MMP-2多克隆抗體、KiSS1蛋白兔抗人單克隆抗體，武漢默沙克生物科技有限公司生產的SP試劑盒。

1.3方法采用免疫組化SP法,宮頸組織的存檔蠟塊78例，38例ICC、22例CIN，18例NCE。石蠟包埋，每隔100 μm切取4 μm切片2張，分別用抗KiSS1蛋白抗體及抗MMP-2抗體染色，一抗陰性對照為PBS液。

1.4結果判定[3]由兩名病理科醫師采用盲法觀察。(A)染色強度評分：強染色為3分，中等染色為2分，無色為0分，弱染色為1分；(B)染色陽性細胞比例評分：<5%為0分，5%-25%為1分，26%-50%為2分，>50%為3分；陽性表達為總分(A+B)≥3分，陰性表達<3分。

1.5統計學分析應用SPSS11.0軟件分析，分析KiSS1蛋白和MMP-2在宮頸癌組織中的診斷價值，均數比較采用t檢驗，采用Fisher精確檢驗，統計陽性率，差異有統計學意義時P<0.05。

2 結果

2.1KiSS1、MMP-2表達KiSS1在NCE、CIN、ICC的陽性表達率依次降低(86.36%vs77.78%vs44.74%)，差異具有統計學意義(P<0.05)。MMP-2在NCE、CIN、ICC的陽性表達率依次升高(16.67%vs31.82%vs63.16%)，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表1。

2.2KiSS1、MMP-2與ICC病理相關性KiSS1蛋白與MMP-2的陽性表達率與ICC浸潤深度、組織學分級、臨床分期密切相關(P<0.05)。見表2。

表1 KiSS1蛋白和MMP-2在NCE、CIN及ICC中的表達

表2 ICC中二者的表達與病理相關性

3 討論

KiSS1屬于單纖絲蛋白，與GPR54受體結合后降低基質金屬蛋白酶活性，上調鈣離子水平，抑制腫瘤細胞的趨化、增殖、轉移[4]。KiSS1在正常組織中高表達，在癌細胞中往往表達過低或缺失，臨床較常用的檢測微轉移非侵入性的標記物，對于早期診斷ICC具有重要臨床價值。本研究中KiSS1蛋白在ICC組織中的陽性率44.74%，明顯低于其余二種組織的陽性表達，提示可能是ICC發生初期，隨著疾病的惡化程度加大下降更加明顯。ICC進展中的浸潤深度、組織學分級及臨床分期與其表達水平具有相關性，隨著病情程度加深表達下降[5]。表明KiSS1蛋白的低表達發生在癌變早期階段，其低水平表達促進了ICC的發生、發展、轉移，發揮類似癌基因樣作用，提示可將KiSS1蛋白的表達情況作為ICC的臨床分期指標，并用于判斷預后[6]。

MMP-2是一種非糖化的明膠酶，癌細胞要穿越基底膜侵入周圍組織，MMP-2在機體內降解細胞外基質(ECM)中Ⅳ型膠原，在腫瘤的侵潤、轉移中作用重大[7]。在ICC的發生發展過程中，促進癌細胞大量增殖，導致腫瘤發生，最終患者死亡，MMP-2高表達能夠促進腫瘤形成新生血管，降解ECM速度加快，癌細胞順利穿越基底膜向遠處侵襲、轉移[8]。MMP-2在各種腫瘤中的異常表達及其分子機制逐漸被闡釋，腫瘤的侵襲和轉移需要蛋白酶類降解ECM，破壞基底膜的完整性，提供侵襲“通道”[9]。MMP-2表達率可以區分正常細胞和腫瘤細胞，評估癌細胞增殖、侵襲程度，已作為一種特異的腫瘤標志物應用于臨床，可以作為判定癌浸潤及轉移的重要指標。臨床治療采取對MMP-2的降解功能進行阻斷，使其減少對ECM的降解，抑制腫瘤穿越基底膜進行轉移[10]。

本研究中發現ICC組織中MMP-2的陽性率明顯高其它組織，隨著臨床分期、腫瘤分級、浸潤深度的加深而增加，這表明MMP-2參與了惡性腫瘤的生長和轉移[11]，MMP-2的高表達促進了惡性腫瘤的發生進展，其還預示著患者預后不良[12]，檢測MMP-2的表達水平可做為高風險腫瘤的標志物，有效評估患者的預后[13]。

[1]吉 宏，李蓮英，郭 強，等.MMP-2及CK19在早期宮頸癌淋巴結微轉移中的表達及其意義[J].中國腫瘤臨床，2011，38(14)：843.

[2]張小平，李明玉.KiSS1蛋白和MMP2在宮頸癌中的表達及臨床意義[J].中國實驗診斷學，2013，17(3)：507.

[3]傅 瑤，梁冠盈，遲秋君，等.HPV感染及MMP-2、MMP-7、MMP-9的表達與子宮頸癌相關性分析[J].哈爾濱醫科大學學報，2014，48(6)：444.

[4]周亭芳，李高峰，李 朵，等.白楊素增強輻射誘導宮頸癌HeLa細胞系球形成細胞凋亡[J].湖南師范大學學報，2015，12(3)：1.

[5]趙玉嬋，李 蓮，張連梅，等.NF-κB、MMP-9在宮頸癌組織中的表達及意義[J].河北醫藥，2013，35(20)：3050.

[6]宋廣葉，宋志宇，邵淑麗，等.基質金屬蛋白酶-7基因表達在子宮頸鱗狀細胞癌發生發展中的意義[J].腫瘤研究與臨床2010，11(22)：778.

[7]湯 軼，孫曉紅.二甲雙胍對宮頸癌Hela細胞Twist及E-cadherin表達的影響及機制[J].山東醫藥，2016，56(9)：31.

[8]朱 偉，黎桂仙，韓 坤，等.順鉑處理聯合STAT3 RNA干擾對宮頸癌細胞增殖的影響[J].包頭醫學院學報，2015，31(6)：1.

[9]滕燕伊，劉曉云，鄭 洪，等.重Ki-67、MMP-7、MMp-2 在宮頸CIN和宮頸癌中的表達及意義[J].慶醫科大學學報，2010，3(7)：989.

[10]劉田雨，姚書忠.宮頸癌腫瘤微環境研究進展[J].國際婦產科學雜志，2015，42(2)：149.

[11]方禛浩，諶 鏨，李妍靜，等．NF-κB和STAT3對宮頸癌作用的研究進展[J].中國婦產科臨床雜志，2013，14(1)：81．

[12]齊玉明，王春麗，馮社軍.毛萼乙素通過調節STAT3抑制宮頸癌C-33A細胞survivin的表達[J].西部醫學2016，28(5)：625-627，631.

[13]朱 偉，黎桂仙，韓 坤，等.順鉑處理聯合STAT3 RNA干擾對宮頸癌細胞增殖的影響[J].包頭醫學院學報，2015，31(6)：1.