重組人內皮抑素結合化療對晚期非小細胞肺癌患者血清LMTK-3、IGFBP-7的影響

韓敏，王堅，王久勝

（安徽省馬鞍山市人民醫院 腫瘤科放療病區，安徽 馬鞍山 243000）

肺癌是一種死亡率較高的惡性腫瘤疾病，其中主要為非小細胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）[1]。NSCLC在被發現時，多數已經處于中晚期，治療難度大大增加。目前，晚期NSCLC的治療以放化療為主[2]，但其療效較差。恩度（重組人內皮抑素，Endostar）主要由人工合成，是一種內源性抗血管生成物質，可作用于內皮細胞，阻止組織內皮細胞的遷移，誘導其死亡，對NSCLC具有良好的抑制效果。為此，有必要探討恩度聯合化療對晚期NSCLC患者的療效。Lemur酪氨酸激酶3（Lemur trrosine kinase-3，LMTK-3）是一種酪氨酸激酶亞型，在腫瘤的發生、發展過程中，酪氨酸激酶酸化具有重要的作用[3]。LMTK-3可催化蛋白質磷酸化，將會參與細胞信號通路的轉導，對于細胞的增殖、分化及凋亡等過程具有重要的作用。胰島素樣生長因子結合蛋白7（insulin-like growth factor binding protein-7，IGFBP-7）是一種腫瘤抑制基因，可抑制腫瘤細胞的增殖，對于腫瘤發生、發展具有重要的作用[4]。為此，本研究采用重組人內皮素聯合化療治療NSCLC，觀察臨床治療效果并探究其對患者血清LMTK3、IGFBO-7的影響，以期為NSCLC的臨床治療提供依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2012年1月-2015年1月于本院收治的NSCLC患者86例為研究對象，按隨機數字表法分為觀察組和對照組，每組43例。其中，對照組：男性27例，女性16例；年齡52～76歲，平均（59.1±4.2）歲；腺癌29例，其他14例；臨床分期Ⅲ B期22例，Ⅳ期21例。觀察組男性29例，女性14例；年齡53～80歲，平均（60.2±5.0）歲；腺癌31例，其他12例；臨床分期Ⅲ B期24例，Ⅳ期19例。對兩組患者的性別、年齡、病理類型、臨床分期等一般資料差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經過我院倫理委員會批準。

1.2 納入標準與排除標準

1.2.1 納入標準①所有患者癥狀符合非小細胞癌診斷標準[5]，經病理切片活檢確診為NSCLC患者；②患者卡氏評分不低于70分，機體狀況可耐受化療；③TNM分期為Ⅲ B～Ⅳ期；④入院前未接受過其他手術、化療或放療等相關治療；⑤患者的預計生存期≥3個月；⑥已獲得患者知情同意書。

1.2.2 排除標準①排除發生遠處轉移的患者；②排除患有嚴重心臟疾病及臟器功能障礙患者；③排除對本方案藥物過敏患者；④排除同時伴有其他惡性腫瘤患者。

1.3 方法

對照組患者采取化療治療：吉西他濱+順鉑。觀察組在對照組基礎上聯合恩度治療。對照組患者中，第1天和8天靜脈滴注吉西他濱（ELI LILLY公司，注冊證號：H20110535）1 000 mg/m2，靜脈滴注。第1天靜脈滴注順鉑（江蘇豪森藥業股份有限公司，國藥準字H20110812）75 mg/m2。觀察組患者第1～14天同時給予恩度（東先聲麥得津生物制藥有限公司，國藥準字S20050088）7.5 mg/m2進行治療。14 d為1個化療周期。

1.4 觀察指標

1.4.1 臨床療效兩組患者均在3個化療周期后評價療效，參考WHO制定的相關療效標準[6]，分為完全緩解（complete remission，CR）、部分緩解（partial remission，PR）、疾病穩定（disease stability，SD）和疾病進展（disease progression，PD）4 類。客觀有效率 =（CR+PR）/總例數×100%；總有效率=（CR+PR+SD）/總例數×100%。

1.4.2 不良反應記錄治療期間患者出現不良反應，按照國際通用的NCICTC 3.0版的分級標準評價。

1.4.3 外周血血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、胰島素樣生長因子1（type-1 insulin like growth factor，IGF-1）檢測兩組患者均在治療前后的清晨空腹下采集5 ml外周靜脈血，在3 000 r/min離心取上清，置入-20℃冰箱冷凍儲存。采用ELISA法（上海江萊生物科技有限公司）檢測血清VEGF，IGF-1含量。

1.4.4 外周血LMTK-3、IGFBP檢測分別于治療前和治療后的清晨空腹采集兩組患者外周靜脈血5 ml，3 000 r/min離心取上清液，置入-20℃冰箱冷凍保存。采用ELISA法（南京金益柏生物科技有限公司）檢測血清LMTK-3、IGFBP含量。

1.5 統計學方法

數據分析采用SPSS 19.0統計軟件，計量資料以均數±標準差（±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，計數資料以（%）表示，兩兩比較用χ2檢驗，等級資料比較采用秩和u檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 療效評價

觀察組治療客觀有效率、總有效率高于對照組（χ2=5.403和7.493，均P＜0.05），觀察組的療效優于對照組，差異有統計學意義（u=6.438，P＜0.05），見表1。

2.2 兩組患者不良反應比較

兩組患者的白細胞降低、血紅蛋白降低、血小板降低、靜脈炎、肝功能損害、心電圖改變發生率差異無統計學意義（P＞0.05）。見表2。

2.3 兩組患者血清VEGF、IGF-1比較

兩組患者治療后VEGF、IGF-1水平較治療前更低，差異有統計學意義（t=5.679、3.108、6.700及 2.722，均P＜0.05），且觀察組治療后較對照組更低，差異有統計學意義（t=2.548和5.021，均P＜0.05），見表3。

2.4 兩組患者血清LMTK-3、IGFBP-7比較

治療前，兩組患者的血清LMTK-3、IGFBP-7水平無有統計學差異（P＞0.05）；兩組患者治療后LMTK-3較治療前更低，IGFBP水平較治療后更高，差異有統計學意義（P＜0.05），且觀察組治療后LMTK-3較對照組更低，IGFBP-7更高，差異有統計學意義（P＜0.05），見表4。

表1 兩組療效比較 例（%）

表2 兩組患者不良反應比較 例（%）

表3 兩組患者治療前后血清VEGF、IGF-1比較 （n =43，±s）

表3 兩組患者治療前后血清VEGF、IGF-1比較 （n =43，±s）

IGF-1/（ng/ml）治療前 3周后 t值 P值 治療前 3周后 t值 P值觀察組 526.14±150.28 358.15±122.64 5.679 0.000 179.23±54.31 114.52±32.58 6.700 0.000對照組 508.96±139.30 423.42±114.79 3.108 0.003 185.64±62.89 154.52±40.83 2.722 0.008 t值 0.550 2.548 0.506 5.021 P值 0.584 0.013 0.614 0.000 VEGF/（pg/ml）組別

表4 兩組患者血清LMTK-3、IGFBP-7比較 （n =43，±s）

表4 兩組患者血清LMTK-3、IGFBP-7比較 （n =43，±s）

IGFBP-7/（ng/L）治療前 3周后 t值 P值 治療前 3周后 t值 P值觀察組 17.54±4.28 8.95±2.16 11.749 0.000 30.52±10.93 39.47±8.31 4.274 0.000對照組 16.39±5.30 13.42±4.81 2.859 0.005 31.76±12.58 34.15±9.56 2.992 0.010 t值 1.107 6.114 0.488 2.754 P值 0.271 0.000 0.627 0.007 LMTK-3/（ng/ml）組別

3 討論

肺癌是一種威脅人類健康的惡性腫瘤，80%以上的NSCLC患者在確診時已經于Ⅲ、Ⅳ期，已經失去治療時機[7]。晚期NSCLC患者主要治療方案為吉西他濱、紫杉類等藥物與鉑類聯合，雖有一定的療效，但患者的生存收益有限[8]。近幾年，抗血管生成已經成為治療腫瘤侵襲轉移的重要方式。腫瘤患者存在著血管增生異常，恩度是一種血管增生抑制劑，可提高NSCLC患者的治療的安全性。恩度可通過內皮細胞的凋亡、周期、遷移等影響，控制血管內皮細胞的增殖，控制癌變組織中的新生血管不斷形成。由于恩度的可作用于腫瘤血管內皮細胞，促進藥物濃度作用于局部細胞，在原發灶、繼發病灶中均具有良好的療效。

本研究中，觀察組的客觀有效率和總有效率均高于對照組，有差異，且觀察組治療后的血清VEGF水平低于對照組。VEGF會有效促進肺癌組織不斷新生幼稚血管，結構缺乏完整性，癌細胞易于對其進行侵蝕，增加肺癌細胞進入人體血液循環的機率，有助于肺癌的轉移。恩度通過特異性作用于新生血管內皮細胞，抑制細胞的遷移，誘導其凋亡，保持良好的抗血管生成效果，降低VEGF水平。同時治療期間兩組患者的不良反應無差異。恩度可抑制NSCLC患者的新生血管生成，控制腫瘤生成，而腫瘤的生成需要血管的生成。與此同時，恩度還可作用于VEGF傳導通路，降低蛋白水解酶的活性，進而降低VEGF的表達水平，誘導肺癌細胞凋亡。劉文靜等[9]研究表明，恩度聯合化療治療晚期非小細胞肺癌是一種安全有效的治療方法，且不增加毒副反應。汪力慧等[10]研究表明，恩度聯合化療方案較單獨化療方案的療效更高，不良反應發生率并未增加，本研究結果類似，表明重組人內皮抑素結合化療并不會增加不良反應，安全性較高。

有研究表明，實體瘤的生長、轉移主要依靠血管生成，而新生血管會提供營養及氧氣，還提供大量的生長因子及存活因子[11]。肺癌的轉移是多種因素互相影響的復雜過程。新生血管為腫瘤的轉移提供通道，是腫瘤生長的不可或缺的因素。LMTK-3在ER信號通路中具有重要的作用，與腫瘤患者的的生存情況緊密相關。LMTK-3可催化蛋白質磷酸化，參與眾多細胞信號通路的傳導以及細胞的增殖、分化、轉移等過程[12]。近幾年，LMTK-3在肺癌腫瘤細胞中高表達，影響細胞的生物學特征，提示可能是一種新的致癌基因參與惡性腫瘤的發展過程。IGFB是IGF-1的受體，兩者的異常表達對腫瘤的進展發揮著重要的作用。胰島素樣生長因子是一類多功能細胞增殖調控因子，可促進細胞的分化、增殖、個體的生長發育。IGFB0-7主要通過競爭抑制ICG-1與其受體互相結合，可保持IGF-1免受相關蛋白水解酶的降解。

本研究中，兩組患者治療后VEGF、IGF-1水平較治療前更低，比較有差異，且觀察組治療后LMTK-3較對照組更低，IGFBP-7更高（P＜0.05）。雌激素一般通過ER通路提高基因的轉錄水平，促進細胞的增殖、死亡，而ER通路廣泛存在于胃、肺等靶器官中。研究表明，NSCLC患者的生物學特征與ER水平異常緊密相關[13]。LMTK-3是一種酪氨酸激酶亞型，可促進ERa編碼基因的活性通路，保護ER受體，調節ER通路[14]。LMTK-3在肺癌患者的血清和組織中高表達，是非小細胞肺癌不良預后的獨立危險因素。本研究中，觀察組較對照組的LMTK-3降低更加明顯，表明恩度改善患者病情，提高患者的預后水平，進而改善患者的LMTK-3水平，其機制尚需進一步研究。ER通路還與IGF-1信號通路存在著互相干擾，兩者共同促進NSCLC的發展。IGFBP-7是IGF的受體，是一種分泌蛋白，廣泛存在于多種組織、器官中。IGFBP-7與腫瘤的聯系較為復雜，其與肺癌的發生具有負相關性，可參與調節細胞增殖、腫瘤血管構建、腫瘤侵襲性。目前研究認為，IGFBP-7在惡性腫瘤中的基因表達會受到抑制[15]，進而導致VEGF介導的腫瘤血管生成相關，間接提高腫瘤的生長、轉移等過程。本研究中，兩組患者的IGFBP-7升高，且觀察組升高更加明顯，表明恩度聯合化療可提高患者的IGFBP-7，抑制了腫瘤的生長與轉移過程。

綜上所述，重組人內皮抑素聯合化療可有效降低NSCLC患者的血清LMTK3水平，升高血清IGFBO-7水平，患者的療效良好，不良反應較低。

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