三種魚類嗜水氣單胞菌的分離鑒定及藥敏試驗

邱燕

(海安市水產技術推廣站，江蘇海安 226600)

烏鱧、草魚、鳊魚是我國重要的淡水養殖魚類，養殖過程中極易發生細菌性疾病，其中嗜水氣單胞菌對淡水魚類有廣泛的致病性，該菌屬于弧菌科氣單胞菌屬，常會引起魚類出血性敗血癥的暴發性流行，危害嚴重[1]。大量使用抗生素容易導致病菌產生耐藥性，導致抗生素失效[2]。本文就以三種魚類分離的嗜水氣單胞菌為例，通過藥敏試驗的研究，旨在為嗜水氣單胞菌的防治和進一步研究提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料的采集

取病體烏鱧2個樣，2017年8月24日在江蘇省海安市雅周鎮烏鱧養殖基地采集。

取病體鳊魚2個樣，2017年9月2日在江蘇省海安市高新區隆政村鳊魚養殖基地采集。

取病體草魚2個樣，2017年9月8日在江蘇省海安市墩頭鎮仇湖村草魚養殖基地采集。

1.1.2 主要試劑

培養基、BD Crystal陰性板條及藥敏試驗板條均購自南京菲恩醫療科技有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 病魚的剖檢

肉眼檢查病魚解剖前后體表病癥，以及主要臟器的病變，顯微鏡觀察主要器官細胞破壞、出血、溶血情況。

1.2.2 病原菌的分離培養

無菌采取魚體表面和內臟組織，分別接種于營養瓊脂培養基，28℃恒溫培養24h，挑取單個菌落進一步純化。

1.2.3 病原菌的鑒定

根據革蘭氏染色結果，使用BD Crystal陰性板條來鑒定其生化特性，從而確定鑒定菌種。

1.2.4 藥敏試驗

對分離的三株嗜水氣單胞菌進行藥敏試驗，將分離菌株制成0.5麥氏的菌懸液，取0.1mL注入藥敏板條，28℃恒溫培養24h，觀察細菌生長情況。使用藥物為：硫酸新霉素、氟苯尼考、恩諾沙星、甲砜霉素、鹽酸環丙沙星、紅霉素、鹽酸土霉素和強力霉素。

2 結果

2.1 病魚的體征與病變

患病魚的肉眼病變以魚體多處發紅出血或充血，呈創傷樣；鰓蒼白或紫色，鰓絲腫脹，多黏液。解剖后出現腸壁充血且半透明，腹腔內積黃色或血紅色腹水，腸道有炎癥，肛門紅腫，肝臟、脾臟、腎臟腫大，脾呈紫黑色，膽囊膨大，腸系膜、腹膜充血為主要體征；顯微病變以全身各主要器官的細胞廣泛性破壞，出血，溶血為特征。

2.2 病原菌鑒定結果

共分離3種菌株，鑒定結果均為嗜水氣單胞菌。

2.3 藥敏試驗結果

試驗結果如表1所示，鹽酸環丙沙星對三種魚類嗜水氣單胞菌顯示出較強的抑菌效果，硫酸新霉素次之，紅霉素和甲砜霉素抑菌效果不明顯。

表1 各種抗菌藥物對嗜水氣單胞菌的

3 討論

本試驗通過不同魚類病原菌分離培養，分離出3種菌株，生化鑒定初步鑒定為嗜水氣單胞菌，但是在判定嗜水氣單孢菌種屬時還應結合分子生物學等方面的特性進行綜合判斷[3]。

通過對3個菌株的藥敏試驗，鹽酸環丙沙星對3種魚類的嗜水氣單胞菌有較強的抑菌效果，硫酸新霉素次之。由于鹽酸環丙沙星屬于禁用魚藥，本次治療中可采用硫酸新霉素治療，同時應加強對水質的管理調控。

由于不同的養殖區域、養殖品種、用藥方法都會使病原菌因藥物環境不同而產生耐藥性差異，給疾病的預防帶來困難，因此對嗜水氣單胞菌等引起的細菌性疾病的防治既要考慮病原菌對藥物的敏感性，也要根據水產用藥的相關規定合理用藥，還應做好平時的預防工作。建立健康的養殖模式，科學投餌，做好魚塘、魚種的消毒以及水質的管理。