白細胞介素—24基因用于膝關節骨性關節炎發病患者中的效果

李洪強　劉偉　趙立強

【摘要】目的 評估白細胞介素-24基因用于膝關節骨性關節炎發病患者中的效果。方法 篩選本市三甲醫院2015年6月～2016年4月接收的膝關節骨性關節炎發病患者46例，設置為研究組（實驗標本：膝關節滑膜標本）；同時篩選同期在本市三甲醫院體檢的健康人45例，設置為參照組（實驗標本：膝關節滑膜組織），提取機體RNA，以實時逆轉錄聚合酶鏈反應來檢測膝關節骨性關節炎滑膜組織中白細胞介素-24基因表達。結果 研究組白細胞介素-24基因表達值（0.051±0.006），參照組白細胞介素-24基因表達值（0.940±0.070），差異有統計學意義（P<0.05）。結論 臨床檢驗膝關節骨性關節炎發病患者過程中，白細胞介素-24基本表達降低，可為臨床確診及救治膝關節骨性關節炎提供依據。

【關鍵詞】白細胞介素-24；基因；膝關節骨性關節炎

【中圖分類號】R684.3 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095-6681.2017.29..01

為了解白細胞介素-24基因用于膝關節骨性關節炎發病患者中的效果，篩選本市三甲醫院接收的膝關節骨性關節炎發病患者46例，同時篩選同期在本市三甲醫院體檢的健康人45例作研究對象，提取機體RNA，以實時逆轉錄聚合酶鏈反應來檢測膝關節骨性關節炎滑膜組織中白細胞介素-24基因表達，現將研究結果報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料

篩選本市三甲醫院2015年6月～2016年4月接收的膝關節骨性關節炎發病患者46例，女26例/男20例，40至60歲，均值（52±3.15）歲；同時篩選同期在本市三甲醫院體檢的健康人45例（參照組），女25例/男20例，42至60歲，均值（53±5.05）歲。比對兩組各項資料，差異無統計學意義（P<0.05）。

1.2 方法

提取機體RNA，以實時逆轉錄聚合酶鏈反應來檢測膝關節骨性關節炎滑膜組織中白細胞介素-24基因表達：（1）選取電子天平稱取組織樣本0.3～0.5 g，以液氮預冷研缽將組織樣本研磨，為保證組織不會融化，研磨時可添加定量液氮。根據RNA提取液100：1的比例慢慢加入RNA，而后研磨組織直至粉末狀，將其轉到干凈工作臺，待融化之后將液體轉移至1.5 ml體積離心管內，1 ml/管，并在室溫下保存超過15 min；檢驗人員根據氯仿：RNA提取液為0.2：1的比例融入氯仿，將其搖勻30秒左右，且并室溫下保存2～3 min，并于4℃環境下，每分鐘15000 r，時間保持在15 min左右[1]。將離心后所得上清液轉移至Eppendorf管中；（3）異丙醇：RNA提取液為0.5：1的比例融入異丙醇，搖勻，于零下20℃的環境下放置超過10 min，在4℃環境下，每分鐘15000 r，大約15 min；（4）把異丙醇完全棄掉，融入乙醇1 ml75%，反復顛倒，于4℃環境下，7500 r/min，離心大約5 min。而后把75%的乙醇棄掉，于超凈臺內自然干燥大約15～30 min；根據RNA沉淀大小慢慢加入體積適宜的無核酸酶水，并在65℃的環境下助溶大約5～10 min，放于零下80℃的環境下長時間冷凍保存。

選取2 ugRNA放在反應管內，添加1uLO ligodT，而后加入2.5 mmol 4 uLdNTPm，搖勻，加入加dd H2O直到

13 uL。于60℃環境下保存10 min后，于冰上保存超過1 min。

向反應管內倒入5×4 uL第一鏈緩沖液，1 ul二硫蘇糖醇

0.1 mol，1ulRNaseout，1ulSuperscri ptⅢ RT，搖勻后離心，于70℃環境下經滅活逆轉錄酶，以合成cDNA第一鏈，保存在4℃環境下。

1.3 統計學處理

以SPSS 20.0軟件對數據進行處理，計量資料以“x±s”表示，采用t檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

檢驗結果顯示，研究組白細胞介素-24基因表達值0.051±0.006，參照組白細胞介素-24基因表達值0.940±0.070。差異有統計學意義（P<0.05）。

3 討 論

作為臨床常見關節炎病癥之一，膝關節骨性關節炎主要指膝關節受慢性勞損、外傷及關節嚴重畸形等伴發的關節軟骨增生，臨床表現為疼痛、伸屈受限、腫脹等癥狀。患者一旦伴發膝關節骨性關節炎，易使軟骨代謝發生較大變化，主要表現在關節軟骨結構不斷變化，滑膜炎癥一直影響此過程。

此次重點了解白細胞介素-24基因用于膝關節骨性關節炎發病患者中的效果，白細胞介素內包含抑制白細胞介素、促炎癥白細胞介素2類，運用到膝關節骨性關節炎中的效果確切[2]。白細胞介素-24與炎癥抑制、腫瘤抑制及損失修復作用等有緊密聯系，可抑制機體鼻咽癌、宮頸癌、肺癌等癌細胞持續生長。而且白細胞介素-24在機體損傷修復中，可提升皮膚角化內的細胞表達，進一步抑制因TGF-α所產生的促炎癥作用。

綜上所述，經分析白細胞介素-24I基因運用到膝關節骨性關節炎發病患者中的具體作用機制，結果顯示，可大大降低基因表達，表明白細胞介素-24與膝關節骨性關節炎發病有直接聯系。

參考文獻

[1] 趙 霽.通絡止痛膏治療膝關節骨性關節炎臨床療效與護理[J].中國民間療法，2016，24（7）：40-41.

[2] 衡 麗.超聲電導藥物治療老年膝關節骨性關節炎的臨床觀察[J].中國保健營養，2016，26（12）：87-88.

本文編輯：吳宏艷