SHR大鼠腎臟去交感神經與主動脈miRNA相關性分析

李杰，覃智芳，顏彥，何成龍，何沙金

(遵義市第一人民醫院 心內科，貴州 遵義　563000)

1　材料與方法

1.1　動物來源

選擇健康4～6月齡SHR Wistar鼠和正常大鼠(WKY)各40只，雌雄不限，SHR鼠體重350～400 g，平均(375.6±25.4)g，購自第三軍醫大學大坪醫院試驗動物中心；正常大鼠體重355～395 g，平均(373.8±31.2)g，購自第三軍醫大學實驗動物中心。所有大鼠分籠飼養，適應環境1周后進行實驗。

1.2　分組

大鼠隨機分成4組，分別為SHR對照組、SHR手術組、WKY對照組和WKY手術組，其中SHR對照組和WKY對照組均為假手術組，SHR手術組和WKY手術組接受RSD手術。RSD手術：術前禁食12 h，不禁水。腹腔注射水合氯醛0.35 mg·g-1麻醉后，大鼠俯臥位于固定臺上，從脊柱旁右側順肋骨緣切開皮膚，分離皮下組織和腰背筋膜，切開內斜肌，推開背長肌，暴露右腎，在手術顯微鏡下分離出腎動脈交感神經，采用同樣方法從左側分離左腎動脈交感神經，離斷交感神經。SHR對照組和WKY對照組行假手術，即不行離斷交感神經，逐層縫合皮下組織及皮膚。

1.3　指標檢測

1.3.1血壓于術前和術后4、8、16和24周采用全自動無創血壓測量系統測量鼠尾收縮壓和舒張壓，分別測量3次取平均值。檢測4組大鼠尾動脈收縮壓和舒張壓。

1.4　統計學處理

采用SPSS 20.0軟件進行統計分析，計量資料以均數±標準差表示，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，多組間比較采用單因素ANOVA分析，術前后不同時間點數據比較采用整體重復測量的方差分析；P<0.05認為差別有統計學意義。

2　結　　果

2.1　手術前后不同組別大鼠血壓水平的比較

SHR對照組、SHR手術組、WKY對照和WKY手術組術前、術后4周、8周、16周和24周收縮壓和舒張壓比較，采用重復檢測數據的方差分析，結果：(1) 不同時間點的收縮壓有差別；(2) 不同時間點的舒張壓有差別；(3) SHR對照組與SHR手術組的收縮壓和舒張壓有差別，SHR手術組的收縮壓和舒張壓較低；(4) WKY對照和WKY手術組的收縮壓和舒張壓有差別，WKY手術組的收縮壓和舒張壓較低。見表1。

表1手術前后不同組別大鼠血壓水平的比較
Tab1Comparisonofbloodpressurelevelindifferentgroupsofratsbeforeandafteroperation

參數時間SHR對照組SHR手術組WKY對照組WKY手術組F值P值收縮壓(mmHg)術前152．9±9．7153．6±8．696．4±7．296．9±7．0317．7440．000術后4周154．2±7．9132．9±7．5?97．1±7．490．1±6．7?335．4680．000術后8周153．7±8．1111．5±6．7?#96．8±6．887．4±6．5?345．8110．000術后16周153．9±8．695．4±6．2?#&97．5±6．486．3±6．0?400．1250．000術后24周159．4±9．294．2±6．4?#&97．2±7．185．1±5．7?#443．7600．000F值1．783256．1560．07210．819--P值0．1390．0000．9910．000--舒張壓(mmHg)術前115．5±7．0115．6±6．472．6±4．872．8±4．7362．4540．000術后4周116．2±6．792．7±5．1?73．1±4．871．5±4．5306．1630．000術后8周115．8±6．574．6±5．0?#72．8±4．970．2±4．6335．3590．000術后16周116．9±6．071．6±4．9?#&72．4±4．568．9±4．0?440．2330．000術后24周115．4±5．772．1±4．7?#&72．6±4．667．8±3．9?#440．8480．000F值0．182262．4150．0634．195--P值0．9470．0000．9930．004--

與術前比，*P<0.05，與術后4周比，#P<0.05，與術后8周比，&P<0.05

2.2　手術前后不同組別大鼠血清miRNAs水平的比較

SHR對照組、SHR手術組、WKY對照和WKY手術組術前、術后4周、8周、16周和24周miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145比較，采用重復檢測數據的方差分析，結果：(1) 不同時間點的miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145有差別；(2) SHR對照組和SHR手術組的miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145有差別，SHR手術組的miRNAs較低；(3) WKY對照和WKY手術組的miR-150、miR-155、miR-124、miR-135a和miR-143/145無統計學意義。見表2和圖1。

2.3　各組大鼠主動脈組織miRNAs表達水平的比較

3　討　　論

表2手術前后不同組別大鼠血清miRNAs水平的比較
Tab2ComparisonofserummiRNAslevelsindifferentgroupsofratsbeforeandafteroperation

參數時間SHR對照組SHR手術組WKY對照組WKY手術組F值P值miR?150術前0．76±0．150．75±0．150．48±0．140．49±0．1423．1200．000術后4周0．75±0．160．65±0．16?0．47±0．150．49±0．1514．8580．000術后8周0．78±0．170．48±0．16?#0．49±0．160．48±0．1716．1650．000術后16周0．77±0．140．49±0．14?#0．51±0．130．46±0．1322．4570．000術后24周0．76±0．160．46±0．16?#0．50±0．150．47±0．1516．9300．000F值0．10613．7340．2330．159--P值0．9800．0000．9190．959--miR?155術前0．65±0．120．65±0．120．30±0．110．32±0．1158．2640．000術后4周0．66±0．130．52±0．12?0．32±0．120．31±0．1237．9260．000術后8周0．67±0．130．34±0．13?#0．34±0．130．34±0．1233．4560．000術后16周0．62±0．110．33±0．11?#0．31±0．130．32±0．1527．7040．000術后24周0．64±0．130．32±0．12?#0．31±0．120．33±0．1234．1650．000F值0．47930．0140．3080．167--P值0．7510．0000．8720．955--miR?124術前0．78±0．160．75±0．150．34±0．110．35±0．1557．0420．000術后4周0．75±0．150．53±0．11?0．36±0．130．36±0．1438．4810．000術后8周0．81±0．160．34±0．16?#0．35±0．140．34±0．1251．1420．000術后16周0．74±0．150．33±0．13?#0．34±0．130．34±0．1147．5930．000術后24周0．73±0．150．35±0．14?#0．33±0．140．35±0．1041．8040．000F值0．88433．9180．1530．089--P值0．4760．0000．9610．986--miR?135a術前0．72±0．160．76±0．150．27±0．110．26±0．1183．5320．000術后4周0．73±0．150．42±0．11?0．26±0．130．25±0．1554．2340．000術后8周0．72±0．190．29±0．16?#0．28±0．140．27±0．1339．4840．000術后16周0．76±0．150．29±0．12?#0．29±0．130．26±0．1267．8010．000術后24周0．75±0．160．27±0．14?#0．27±0．140．24±0．1162．6530．000F值0．25246．5000．1580．173--P值0．9080．0000．9590．952--miR?143/145術前0．52±0．080．57±0．050．25±0．040．24±0．06172．6710．000術后4周0．53±0．090．39±0．06?0．26±0．050．26±0．0579．5210．000術后8周0．56±0．070．25±0．07?#0．25±0．060．27±0．0893．3000．000術后16周0．54±0．090．26±0．05?#0．27±0．050．24±0．04110．0680．000術后24周0．55±0．070．24±0．06?#0．26±0．070．25±0．06106．1960．000F值0．772116．7840．4640．960--P值0．5460．0000．7620．433--

與術前比，*P<0.05，與術后4周比，#P<0.05

圖1各組大鼠術前血清miRNAs水平
Fig1SerummiRNAslevelinratsbeforeoperation

表3各組大鼠主動脈組織miRNAs表達水平的比較
Tab3ComparisonoftheexpressionlevelofmiRNAsintheaortaofratsineachgroup

參數SHR對照組SHR手術組WKY對照組WKY手術組F值P值miR?1500．61±0．120．37±0．110．38±0．100．37±0．1123．0860．000miR?1550．60±0．130．48±0．120．49±0．110．48±0．124．7400．004miR?1240．54±0．110．25±0．090．23±0．070．24±0．0760．1780．000miR?135a0．65±0．130．26±0．080．25±0．060．24±0．05109．0250．000miR?143/1450．42±0．090．23±0．070．20±0．050．22±0．0643．9440．000F值11．74024．33644．86433．600--P值0．0000．0000．0000．000--

綜上所述，RSD可降低SHR血壓，可能與降低主動脈組織和循環血清miRNAs表達有關，但可能機制還需進一步研究。

[參考文獻]

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