血清血小板反應蛋白2在結直腸癌早期診斷中的應用價值研究*

鄒瑟音，楊志勇，曹東林，徐金洪

1.廣東省第二人民醫院檢驗醫學部，廣東廣州 510000；2.廣東醫科大學，廣東東莞 523000

結腸直腸癌是全球診斷的第三大癌癥，也是癌癥相關致死的重要原因之一，在我國的發病率和致死率分別居第四位和第五位，且發病率出現逐年升高和年輕化的趨勢［1-2］。如果能被早期發現早期治療，很多患者是可以治愈的，遺憾的是大部分的患者直到晚期出現惡性增值、廣泛浸潤、淋巴結和遠處轉移才能被準確診斷，因此結直腸癌的早期診斷對提高患者的生存率和治愈率具有重要的價值。癌胚抗原（CEA）是消化道惡性腫瘤應用較為廣泛的標志物，無顯著臟器特異性，部分直腸惡性腫瘤患者未能被檢出，但某些非癌性因素如糖尿病、結腸炎、肝炎等因素也會導致CEA輕度升高，會存在一定的假陽性率，因此敏感度和特異度都遠不能滿足臨床的需求。血小板反應蛋白2（Thrombospondins，THBS-2）是一種具有多種生物學功能的糖蛋白，在腫瘤早期診斷及預后監測中受到越來越多的關注［3-6］，本研究對健康對照組及結直腸癌患者進行血清THBS-2水平檢測，并與常用標志物CEA進行對比分析，評價血清THBS-2檢測診斷結直腸惡性腫瘤的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 研究對象

研究對象來源于2019年1月—2019年12月在廣東省第二人民醫院肛腸科就診及住院的患者。所有患者均行肛門指診及結直腸鏡檢查，發現異常者行組織病理學及影像學檢查，按照中華醫學會消化病學分會《中國結直腸癌預防共識意見》［7］及《中國結直腸癌診療規范（2017版）》［8］制定診斷依據，共篩選出23例患者。另外以同一時間段的34例健康體檢人群作為對照組。

1.2 血清標志物檢測

采集健康對照組及患者治療前的靜脈血3 ml，3 000 rpm離心5分鐘，2 h內進行血清THBS-2和CEA檢測，其中THBS-2采用ELISA法檢測，嚴格按照試劑盒說明書進行操作，CEA采用羅氏E601電化學發光法進行檢測，正常參考范圍為0～6.5 ng/ml。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差表示，兩組間比較采用t檢驗;通過ROC曲線來確定血清THBS-2檢測診斷結直腸癌的靈敏度和特異度，并通過計算約登指數（Youden index）來確定THBS-2的cutoff值；兩種檢驗方法的差別采用卡方檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 THBS-2檢測結果

正常對照組和患者組血清THBS-2檢測結果見圖1，健康對照組血清中THBS-2的平均水平為（37.66±12.91）ng/ml，結直腸癌患者組的平均水平為（6.59±18.58）ng/ml，（P＜0.001），說明與健康對照組相比，絕大多數的結直腸癌患者血清中的THBS-2水平明顯降低。血清THBS-2的ROC曲線如圖2所示，曲線下面積AUC為0.934，通過計算約登指數來確定鑒別正常與患者的最佳cutoff值為17.495 ng/ml，此時血清THBS-2水平診斷結直腸癌的靈敏度為87%，特異度為100%。

圖1 結腸癌患者和正常對照組血清THBS-2水平.

圖2 血清THBS-2的ROC曲線

2.2 CEA和THBS-2檢測結果比較

血清CEA和THBS-2檢測23例結直腸癌患者的結果比較如表1所示，血清THBS-2檢測出的陽性患者明顯高于血清CEA的檢測（P＜0.001），說明血清THBS-2水平檢測在早期結直腸癌患者的鑒別診斷上更優于CEA。

表1 23例結直腸癌患者THBS-2檢測與CEA檢測結果比較

3 討論

THBS-2是血小板反應蛋白家族的一員，因為在結構上擁有4個蛋白結合區，如促血管生成、細胞轉移、增殖、促凋亡等，也有研究成果發現THBS2是一種惡性腫瘤相關血管生成和腫瘤侵襲性的負調節因子［9，10］，在各種腫瘤中的表達水平也不盡相同，如在宮頸癌、胃癌、卵巢癌等呈低水平表達，而在肝癌、胰腺導管癌、前列腺癌、口腔鱗癌等則呈高水平表達［11］，但不管是呈低水平表達還是高水平表達，都與對照組有顯著性差異，因而使THBS-2成為一個新的、在腫瘤早期診斷及預后監測中非常具有應用前景的標志物。

在本研究中，結腸癌患者的血清THBS-2水平遠遠低于健康對照組，具有統計學意義，說明該類患者與卵巢癌等腫瘤患者一樣血清中THBS-2呈低水平表達，而Wang等研究顯示與相鄰的正常組織相比，結直腸癌組織中THBS-2的表達水平明顯升高，并與腫瘤分級、晚期浸潤深度及淋巴結轉移呈正相關，而與患者預后呈負相關［6］。與Wang等的研究結果不太一致，其可能原因是檢測THBS-2水平的標本類型不一樣，Wang等檢測的是腫瘤組織，而本研究檢測的是腫瘤患者的血清標本，此外Wang等以腫瘤相鄰的正常組織作為對照，而本研究以健康人群作為對照，血清標本比組織標本更容易獲取，對患者的創傷性相對較小，也更易于進行批量標本的獲取和檢測，因此血清標本比組織標本更具有臨床實用性。

Hsuan-Yu Peng等研究結果證明血清THBS-2是胰腺導管癌的獨立預測標志物，可用于高度特異診斷胰腺導管癌，在鑒別患者組和高風險對照組時，保證100%特異度的條件下，診斷靈敏度達仍達到55.9%［5］。本研究結果顯示血清THBS-2診斷結直腸癌的ROC曲線下面積為0.934，說明通過檢測血清中THBS-2的水平來鑒別診斷正常對照人群與結直腸癌患者的準確性較高，在保證特異度為100%的情況下，靈敏度仍能高達87%，而臨床廣泛使用的CEA在同樣保證100%特異度的條件下，靈敏度不到50%，兩者相比，血清THBS-2檢測比CEA具有更明顯的優勢。

本研究結果顯示血清THBS-2水平檢測對于結直腸癌的早期診斷具有非常重要的臨床應用價值，若能建立實驗室正常參考范圍，并對結直腸癌診斷設立cutoff值，結合臨床癥狀，將有助于臨床對結直腸癌患者進行早期診斷及鑒別診斷。