貴陽市三文魚轉基因成分檢測調查

◎ 孫端方，左澤彥，田志強

（貴州省產品質量監督檢驗院，貴州　貴陽　550016）

當前轉基因作物的研發和種植發展迅速，轉基因作物產品的利弊之爭也是全球熱點，而轉基因動物卻通常只見于新聞媒體刊載的一些實驗室先進成果報道、分子生物學科普文章等。在2015年，美國FDA批準AquaBounty Technologies公司的AquAdvantage轉基因三文魚上市；2017年，該公司完成了該三文魚的首次規模銷售，由此標志著轉基因動物產品已開始進入市場；截至當前，市售轉基因動物產品也僅此三文魚一種。

本文完稿時，未見我國農業部批準該三文魚進入國內市場。但目前跨國貿易蓬勃發展、進口商品可謂海量，也常有漏網之魚悄然在市場銷售。為確保消費者的知情權、了解相關產品情況、面向省內開展實踐相關檢測技術，對市售進口三文魚食品進行轉基因成分檢測的抽樣調研。

1　材料與方法

1.1　取樣、制樣

樣品均為市場隨機抽樣，抽樣范圍為餐飲、散裝、包裝各10批次，分別編為1～10號樣品。樣品的取樣和前處理按SN/T 1194-2014執行，進行雙平行檢測。

1.2　DNA提取

DNA提取試劑盒為TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0。樣品DNA提取后，用Thermofisher NanoDrop One進行DNA純度和濃度測定，若1.6＜OD260/280＜1.8則進行后續實驗，否則重新進行DNA提取。濃度若低于20 ng/μL，則用Millipore Microcon DNA fast flow (PCR grade)濃縮DNA濃度至20 ng/μL以上，若高于50 ng/μL，用ddH2O稀釋至50 ng/μL以下。

1.3　檢測方法

熒光PCR所用引物和探針根據AquAdvantage公開序列進行設計，包括內源基因和外源基因各一對。熒光PCR試劑為TaKaRa Premix Ex Taq (Probe qPCR),ROX plus，熒光PCR體系配置及反應參數按上述試劑盒說明書，用熒光PCR儀ABI One step plus檢測。

2　結果與分析

餐飲、散裝、包裝中1號樣品的內源和外源基因的熒光信號如圖1所示，內源基因20＜Ct值＜30，熒光信號有明顯S型曲線；外源基因Ct值≥40，熒光信號無S型曲線；其余樣品與上述示例情況相同。陽性對照、陰性對照、空白對照的檢測結果均符合要求（圖略）。由上可知，未檢出含有轉基因成分的樣品批次。

圖1　熒光PCR圖譜圖

3　討論

3.1　檢出率

本次實驗未檢出轉基因三文魚批次，表明當前轉基因三文魚及相關產品尚未流入貴陽市場。

3.2　檢測方法

隨著基因工程在食品研究中的深入運用，轉基因食品的市場化將從微生物、植物領域拓展到動物方面。目前，主流PCR檢測技術以基因序列為主要檢測對象，能夠滿足未來轉基因動物產品的基礎定性檢測需求，但目前仍有標準方法更新慢、深加工產品難檢測等常見問題。